\".\'.0. V~, .• ·.k..t).."I .• I99j, 6(1·2): )4.)7
TOXOPLASl\.1 0 S IS'DE IgG VE IgM SEVIYELERi NIN ELlSA ILE ÖLÇÜMÜ VE BU TESTIN
TAN I içiN ÖNEMI
$ereL1r DECERI Rifal CA)\''TQRA yı Abdurrahman GOLI Cihangir AKDEMiRI IYazı.1ncit Yıl Üniversitesi, Vekrincr Fakillıesi, Parnziıoloji Anabilim Doıh Vnn-TÜRKIYE
Determinnlion of
IgG
and IgM tiıers in Toxoplasnıosis and ıhe Importance of this Test For DiagnosisSuınınal'y:llıis study ha~ beCIl done to delenııiııe ııcrı;ı"ııla~e of the [gO aııd IgM ıilcrs iıı
sera
of health)' wonıen wiılı EUSAmıd put Ilıe importnnce ofELlSA ıesı in dingnosis in Toxnpbsn!o:sis,
LLL cvohwıioıı ofELlSA ıesI in diagnosis fo! Tm..:oplasl11osis, i' lms bt..'Cn fonnd ıo he scıısi,i,,\), correlaıioll and ıime sa"ing.
[gM um' [SG levcl~ hn~ been dcıcnnined in hc",ıhy "'oııı"n'~ SCTll ",iıh ELJSA [!LG /\Iıd ILiM ıiı"r~ in ıh".,., ""ra ",ilh EUSA [gG and IgM tilers in ,hese sera hJS been found JS 73.3 % mıd 13.3 %, resıx...:ti\'clv.
Finaıı)', the detennination of IgG for Toxoplasınosis with ELlSA hns 'sho\\'s to be s,1Iisfaeıory. Bm IgM Iiıers h.1S to be
snppcırteı.i by an anoth~ semlogic tesl.
Kc)' Words : Toxoplmmıosis, IgG ,IgM ,ELlSA
Ö~cı :Bu çııhşnuı Toxopl.ıSllIosis'in I~nısmd.ı EUSA testinin I\ncllIini orıu~'ıı kO~'luık ı'e EUSA tesıi ile s.1ghkh görünen klldll1lann kan senımilinnda 19(} "t! IgM mılikor tiırelerinin % omnlarını s:ıptmıuık aın~cıyla y:ıpılmıştır
Yaınlan dcgerlcndinnelcr soınıı.:ıında EUSA ıesıinin Toxopl"snlOSı$'ın IUnısıı"':. duyarlı, u~ı.mlu i'c z.ıım:ııı ııçısııı<lun ekonomık
bir tesı oldugu l.:spiı edilmişıir Sa~hkh görllneıı kadınlnrın kan scnıınl:ırıııd:ı IgG ~Ölılil)dcıı % 73.3, Lı.tM rÔlıfmdl .. 1ı ise 0/. 13.3
po7.iıifmre sapıaıuıuş1Lr.
Sonuç olomk Toxol)lnsmosls'lc ukııı iııfcksi~"OIıları tcspıl ederken nı'lu~1I çıkını pGlJıif liıNıerin Ob::lIikle IgM yönflnden ikind semlojik bır lesı ile dotnllmUlWlsıUlII daha gl ... .,ı ,'erici olaclıj11 ı..unumını .. \,urılmıştır
,\nuhııır Kelimclcr: Toxplanııozis, IgG, I~M. ELlsA
Giriş
Toxoplasmosis Tiirki)'e'dc ve dfin~'ııdıı oldukçıı yııygın göril1cn bir prOı07,OCr eiıfeksiyon olup bu
hnslııJı~a sebep olıı11 To.'mplnsmn gondii (Ürii insan dnhil biitOn memeli ha~'v,ın[nrdn \'e kuşlardıı göriikbilir (1.9).
Etkenin insmıl:mı bulaşmasında eLi önemli ka~'nıık dışkılıınndıı oocysıe ııışıyan kedilerdir. Ayrıca bulaşık
sebzclcr vc iyi pişmemiş hayvans,11 kaynaklı besiıılerin
"c özellikle çi~ eılerin bulaşıııada önemli roın '·ardır.
To:-:opl:ısına kistlcri lıışıyıın hayvanların eılcri iyi pişirihnMen ~·enilirse enfeksiyon blılıışl1llş olur.
Ellreksiyon kongeııitat olarak lImıdan ~'<l\'Tuya geçebilir, Parıııiı yal'nl1111n RES hüerelerinde çoğ.11ar.ık ya"md,t adenopmi vcyn beyinde tahribat ~'aparak h~'droccphali
"c
microcephali gibi anomalilere. göze gircrekcorioreniıis sonueu çocukların kör doğmasına veya bu anomaliler sonucunda abonlarııı şekillenmesinc sebeb olnbilir (1.9,12.16).
Gerek ins,1nlarda ,"c gerekse ha~Tanlarda ço~unlııkla ya"nı atmndıın başka bir seıııptom göstermeyen enfcksiyon olduğu için bu hastailgın teşhisindc serolojik ~'öntemlerden ~'arnrlamlmakıadır.
Bu testler ar:ısıııda IHA, Sabin·Feldmaıı, ELlSA. lFA.
VIDAS s.1~'ılabilir (5,6. i 3.17. i 8).
Yurdıınıu~.d;ı Toxopl;lsmosis'le ilgili olarnk yapılan
serolojik çnlışmalarda de~işik sonuçlar al1ll1111şur (2, 3, 7, 8, LO. IL. 14,16).
Tnl1~'Üksek ı·c arkndaşlan (15) Toxoplasıııosis'in ıaııısındıı serolojik tesılerili karşılıışlırmasını yaparken spcsiliıesi ye scıısi"itesi ~'[jksck bir testin seçiminin tanı ve tedavi :ıçısıııdan önemli olduğımil bildirmiş ve hiçbir testin
wnıda ıek başına yetcrli olmadığını. özellikle akuı enfcksi~'onlann \anısını koyııbilıııck için IgM anıikorlanııı
göstereeck tcstlerin kullıınılmnsll1I öncrmişlerdir.
Cöplü vc arkndnşlnn (~) To.\."oplasmosis tanısında SFD
I'C EIA'yl kıır,ılaştırnıış vc SFD ile pozitif buldukları I"akııların %2' sini EIA IgG ncgatif.
sm
ile negatifbulduklıırı vakaların % 6'sı111 EIA IgG yöufınden pozilir bulmuşlardır. Bu veriler sonucunda To.\."oplasmosis'ıc akut enreksiyon kararı I'erirken tek bir ıesı sonuCli ile yeıinilmcmesi SFD tesıi ilc sınır de~crler elde cdildi~inde I'~'a diğer test sonuçInn ıle u~'lınısıız olduğundıı 15 gün
ar.ı~·la tesıin ıekrıırlanarıık tiıre artışıııın gözlenmesinin
~'1Ifarll olm~ .. 1~1 kana.ıtiııe vardıklarını bildirmişlerdir.
Eriş ı'e arkadnşları (6) To.\."oplasrnosis'in tanısında
IFAT ve ELlSA ıesti duyarhhk. özgiilllik. u~ııınluhık.
z.1m;m I'e ekonomik açıdan karşıl;ışıırıırak hcr iki ıesne de
Y,Y.O, Vet,F.k.DerJ.I99~. 6(1-2):J4-31
("lo 40.3) IgG seropozitif. (o/uSlA) negalif oldutunu
bildirmişlerdir \"C bu iki test arasında ("lo 8.3) gibi küçük bir oranda uyumsuzluk tesbit etmişlerdir. Bu
araştırıcılar testlerin hastaııın klinik durumu dikkate
alınıırak üçer tıııfta ara ile birden faZıa titrcde
deterlendirilınesi gerektitini belinmişlerdir.
Poyraz ve arkadaşIMI (13) düşük. ölü do~nı re erken dotum olgularında ELISA ile IgG'yi % 75.3, IgM'yi ise %10 sero pozitifbulmuşlardır.
Bu araşumıa Toxoplasnıosis yönüilden ELlSA
tekııiti ilc IgG \'c IgM antikorlanııın kadlıılard.1ki sero-po7jtif1i~ni amşıırarak ELI SA testiilin öıgiillüğil.
U}1Imlulutlı, zaman \"C ekonomik açıdan gCÇ1:rli1i~i ilc
To.~oplasnıosis'in tanısmdaki öneliiini onaya koyıııak amacıyla yııpılnıışıır.
!\Iıııcryal n~ Metot
Bu araştırmada kuJlanllan ııımeryııl: s,ı~lıkll
gönllen IS kadından rastgele alıo.1n kan seruııılnrınd.1n eıde ediınıiştir. Bunun için her şahıstan LO ml'lik steril tüplere kan alınmış ve Ulplerdeki kan öruekleri
çbdldikıeu sonra 1300 dcvirde Lo dakikıı s,ıııırinij
edilerek seruınları ayrılmıştır. Daha sonra "Gull" braııd ınarka IgGllgM ham tesı kitleri ile ha;IJT poıitir \'e
neı;:llif serumlar kullanılnnık U$lIhınc u~'g"n IIIU·12~u
titreleri arasırıda sulandırılamk spekırofOIOl1lelrede
.lOS Ilm'de okunmuştur.
Sonuçlar aşııAıda belinilen !imiılere göre
değerkndi ril miştir:
Ref.".,.,ıs """'''' .1-+>0 .... , RI'.\'-O.IIOO..o.9OO-0.800..0.900 - ","",ıif{...,,,. ~-.i ... , 'q.ıif)
REV 0,~.900-ci ... < "" •• Iif
REV-0.90 1..0,999-fOıı/>.:li ("e)" ., .. Ia,,",, po:>ıiıif)
REV-1.000' d"n" is<: pnuıif
To"opı.",,.,,.i.'oje IgG '" IKM Se,'i)""I"";";,, ELlS,1 iıe Oıçuıııu '" Du T.:sıi" r • .,.
"i'"
O""m,Ayrıca incelenen kan serumlarında [gG ~'önünden duyarlılık, özgüllük \1: uyumluluk a$ll~ıdaki förmül1ere göre hesaplanmıştır.
Gcrç"k poriıif( Gl' ).'\100 Lg(; d"y.,lıhk-
----="'--'--="'-=::..-'--___
00or · Y.I.,Ic,
"egoıif( Y.,wg) 01':':10019(; özC0ııok" - - - -"', Gl'. r.ı.,
... ,
poril,f( Y.",-.:ıto lI)lImlnlıık-
Uulgulıır
To:<opl:ısnıocis yönı,ndcil tar:ınan 13 adet knn serumunda IgO re IgM yönünden dcgişik oranlarda scropo"jtiflik -tespit edilıııiş bunun y,ıııında IgG re IgM pozitif \'e neg.ıtif kontrol seruınları i IIO-12KU basamakları arasınıiı sııl:ıııdırıl:ırnk kontrol edilmiştir,
Tablo ı'den elde edilen IgG antikorlarıııın daAıhınıııa
göre ELlSA testinin duyıırhlık. öıgii1l0k I'e u~1Imluıu~u hesaplandı.
Buna göre:
GI'~ 100 11:'\100
"'"
ıga ])ıı)-.rı,hk"
. ---,
0°.91.6Gl" r)lk;: 11·1
"
Gl' ~ 100 11:'\1011
,,,,,
1~<;(JJ.gOI10k· 00\11 (,
(ıP • yp"" LI· i
"
UP.G:'\~ı: ıı·) 14
-,,---c::"-- - - - - ..
_ 009].3~h .. ),,,,,,,~.r;1oı i~ i~
...
1"" .. )",.,
01'1"'"'
Bu soııııçlara göre IgO duyarlılık % 91.6 \'e u~1Jnılılluk
0/. 93.3 ol~r:ık ıespit edildi. Ayrıc;ı muayene edilen 13 kan
serumıında IgG anlikorları ~'önünden II serum sero pozitif ( %7).). i serumd..-, ~i11a"cl "ı;w.ı1if. ) ı.ı.:runı ştıpheli. IgM
~'öniinden 2 serıını seropo7.iıif (% 13.3), 1 serum şilpheli.
i ı senım ise neg;ltifolarak tespil edildı.
Tablo i: Negatifre poriıir( IgG \'c IgM) konırolscnıınl:ınnın 1/10-12&0 sulandırııııı b.ı5.ıııı.ıkl:ırı arasıııd.1 bulunan
tesı sonuçları.
35
Toxo.,ı ... """;. .. ,,, Lg<:; "c 11.\1 SCVl)'cl.,nn;" tUSA
;Ic Olçiinı(l ,.., Bu T .. ıın T.", iç", 0".,,,;
T~blo 2: Toxoplasınn ~ntikorları yöniinden taramn 15 adet kaıı serııınuııuıı IgG ve IgM yöııiinden 1110-1280
sulandırma basamagına göre test sonuçları ( IgGllgM) .
. ,
., .,
., .,
.,
., .,
h,---j- " ,
. ,
.,
To.wplasmosis tropikal ı'e sııbtropik:ıl bölgelerde % 5-95 nisbetinde görülen ~'aygın bir, protoıocr enfeksiyoııdur (1,9.16).
Toxoplasnıosis'in tamsında en güı'enilir ınetot
dokulardan etkeni izole eııııekledir. Anc.1k bıı oldııkça
zor bir yöntemdir. Bunun için scrolojik testlerle (IFAT.
IHA. ELl5A. VlDAS. Snbiıı Feldıııcn \'S,) To.~oplasll1osis'e özgü kanda şekiilcilen ııııtikorları araşıırmanın tanı~'ı kolaylaştımc.ıgı beliniimektedir (.ı. 5.
ii. 15. 18).
To.~oplasnıosis'in tamsınd~ kıılıanılan' testlerin
öı.gii]](iğü. dııyarlıııgı I'e uyumlıılıığıı elde edilen
sonuçlıırııı çok iyi değerlendirilmesi gereksiz ıednl'ilcri önleyecekıir,
Birçok 3mşlırıcı (../, 6. 8, 12, 17) ELI SA ıestinin
özgiillük i·c duyarlılık :ıçısıııdaıı diğer testlerle birbirine
",ıralel i·c giil'enilir sonuçlıır ı'erdiğini onHya çıkarmış1lr.
Ancak To.~oplasmosis'li haS1al;ıra uygıılamıı hiçbir ıesıin
Toxo-lgG yönunden birbiriııe iisWn olmadığı ELl5A
ıesıinin diğer ıesılerc göre daha öıgiil olduğıı beliniimiştir.
Toxoplasmosis'li h,ısıal,uda ELISA'nın IgG
du)·~,rhhğı % 99.1 olarnk ıespit edilmiştir (6. 13), 36
Hası:ılığııı L1nısında Sabin Fcldman bo\',ı testinin birçok
araştırıcı wrafından öncrildigi görülmiişliir (1A.17).
Anç~k bıı ıestin kullanılmasını rulin olamk sıııırı~)'an fııktör gerek pasajların )'~pılnmsı ı'e gerekse prepcratların
dcgerlendirilmesinde noresmı InikrQskob.1 olaıı
gereksinimdir. Ayrıca hasıalard.1 özellikle IgG sınıfı anlikorları ölçmesi bir de/~1\·anlajd)r. Çünkii bıı duruııı
klinik S,1nı;lnın s,1pt;lnmasında giiçlük yaratmakta ve yüksek IgG ıiırasyonl~rının yıllarca sürmesi sonucunda hala p.1),lIlııı anmıısına sebep olıııakwdır,
To.~opıasmosis·in wnısında serolojinin önemi çok btiyOk olmasına r;ıgmen mııijcn hazırlama I'C teknik donml1m ~'eıersizliği gibi kriıerler gö~ önüne alındıgında.
ELlSA melodun"'ı ö/.el hnırlanmış killerden
~'lIrarıanllrnasl bu ıestiıı bir avantajı olarak göril]ebilir, Fakal kiılerin ]Xıhalı oluşu d:ı bir de%.1Iaıııajdır.
To.\oplasillosis'e karşı IgG nmikorlarının kanda daha )iiksck ( % 5-95) !gM anıikorbrının ise daha diişiik (%
5-55) gÖrüldii~ii. özellikle IgM anıikorlarının ~kuı
enfeksiyonlarda. IgG aIHikorlarının ise daha çok Imenı
cnfcksi)'onlarda ~iikseld;ği belinihnekledir (7. 8. 10. ii.
12.1../.16.18). Bu I'eriler bizim elde elliğiıniı bulgular ile ( 19G= % 73.3. [gM'" <y,. LU. 19 Duyarlılık- % 91.6.
IgG u)uınlııluk= % 93.3) uyum içcrisindedir.
Y.f.O. Ve1.fak..Derg.t99~. 6(ı.~):H_37
SOIlUÇ olarıık;
1-ELlSA testi ilc klinik belini göstermeyen kadınl,ırııı kan seruınlarında [gG seropoıitifliği % 73.3. IgM % 13.3. IgG duyarlılık= % 91.6, IgG özgiilliik=% 9\.6 IgG uyuıııluluk ise % 93.3 olarak tespit edildi
2-ELlSA tesıinin To.xoplasmosis'in tanısında özellikle IgG tayininde daha duyarlı. uyuııılu ve özgül olduğu saptandı.
3-Aıııijen ve konjugaı hazırlnma gibi işleınıerin olmaması kullanım ve 7.anıan açısından avantaj fakat kiılerin pahalı oluşu ise bir dezavantaj olduğu tespit edildi.
~-Akut koııgenital enfeksiyonların tespitinde ELI SA testi ilc scropozitif bulunan serumların diğer b;ışka testlerle desteklenmesinin sonuç açısından daha güvcn vcrici olacağı kanaatine varıldı.
l.Atııııtllş, K (1975): Abort Yopan "c Yapmal'm Koyunlam Ait FöWStııede Gebe Olma)'an KO)1ınlardıı Toxoplasnın Enfcksiyonu Yonflnd<:ıı Arnşlmıwlar. A.O. VetFak.
Protoozaloji "c T.AM.Kflrsllsa Doktora TL"Zi, Ankara 1. Batıkçı,E.,Arıkaıı,E.,Meıe,O .. Oai\,M.N( 199~}: Anne
adaylarıııda ToxoplaSlna Seropoıitilligi. Tllr.P"rasito1.Dcrg. 3-
~, 16,32·36.
3. Balıkçı,E.,Arıkmı,E.,Mcıe,O .. Dng,M.N(1992): Yeni
dOJ!1ı1ll ,·ap.111 aıınc "c bebeklcrindc To.~oplasın" scrııp07.itillit;i . . Tilr.PnnısitoI.Dcrg. 3-4, 16,37-42.
4.Çôpıü,N., Ö7J,;oya,E.,BııMr,C., Tuııao~I\I,M., Gıı'·cncr.E (1994): Toxoplasınosis taııısıııd<ı Sabin Fcldıııan Dy~ Test ile EIA IgM. EIA 19O soııuçlarının kı)"aslaıııııası.
Tllr.Parnsito1.Oerg. 4, 18, 3!)1·3!)~
5 .])oğan,N .,Akgıın, Y .. ,Altıntil.~,K( i 989) Toxoplasnıo;;is'in taııısıııd.1 .2 farklı EIA vc Snbin Feldıııan tesllcrinin
k.1rşılaştınlıııasl. 6.Ulusal Paraıito!. Kong. Bildiri öZetlcri 26·
~9 E)'IIII, IwtııbııL.
6.Eriş,F.N.,Acar,N.S (1994): To~opla."!ınu t.1I11slIId" IFAI i·c ELlSA k;ırşıJaştımııısl. Tllrk Pnmsito1.Dcrg. 1. 18.26·.'2.
7.0m,K. ,Dağ, M.N.,SIL<ıy,A., Mete, M.,Mcıc,O (1'J9-l)·
D.O Tıp Fakllltcsiniıı de~işik bö1ılııılcriııe !xışvılr.:Jn I'e
Toxoplasnıa ön tanısı kOlmııış haslillardn To.xoplnsııı<ı alılikorlarıııın dagılınn .. Ttır.Parıısito1.Dcrg. 4, 18, 395-397
S.Otın,li., Tanyllkscl,M.,Altıııtnş.K., Bn)"s,1Jlar,M., Antcr,U (1994): Kan donorlerinde mıti-ToxoplMnw gondii antikorlarının insid.1I1SI. Tllr.Parasitol.~. 4, 18, 403-40fl.
9.HaZlroglu,R., Altınsaot,M.S., Atasevcr,A., Akın,H.G.
(1989): Kedilerde öldülilca (Fatal) Toxoplasıııosis. 6.Ulıısal Pııraziıo!. Kongresi Bildiri ôıetlcri, ~6-29 EYllil,lstanblı1.
10.KI1ıçtıırgay,K.,oaral.O .. O<'lkınnok,F.,Törc.O.,Oarcgclıli.
O.,Karaca,A.R.(1989).ı::LlSA \"c 1.FAT il<: l>Opıll;ıs"oıula ToxoplaSlmı. antikor araştırınası . 6.Ulıısal Pııraziıol. Koıı~rcsı
Bildiri Ozcıleri, 26-29 Eyloı, htmıhııl
ı I.Nikklıolı,H.,Ozcnn.K( 1989). Adm\a'illı S1lgllklı kişilcrlle
Dolaylı Flores,11l Aı\tikıır Tekııigi (OFAT) ile r";';Op!usınil
gondii IgG ve IgM antikodarının d.1gllıınl .. 6.Ulus,,1 !'am7jtoL.
Kongresi Bildiri özetleri, 26·29 Evlül,lstanbul
12.Po)T'&,O., Gt'Ikoglıı, M.: Ö"ı.ç.:lik. $(1992): Duşnk,
öl(ld~uın ve erkeıı dogııın olgulımııdn ToxoplaSlnu I~G i·c IgM
T'''<>pla,,,,,,,,i.·oo IgG w IgM Sel'i~·d..,.iııiıı ELlSA it~ Ötç''''''1. \."
au
T ,,>,in Ton, i~ino. ....
"i mıtikorlarının ELlSA y<ınıcıniyle ara.ştınlına'ı. Tür.Par;ısiıoL.Ocrg. J4, 16,43·50.
i 3.Poyr.J7~Ö.. Oökogllı,M. .özçelik,S.
Toxoplıısnıosis tanısında iLLA ve EUSA
karşılaştırılması. Tar.ParasitoL.Dcrg. 3-4, 16,59-64
(1992):
testleriniıı
14. T an)llksel,M. ,Onn,H.,Olıys,ıllar ,M.N .,Erdal,N.( i 99-1):
Behcct hostııhi\ı olaıı hastalarol1 mııi·Toxoplasnıo aıııikorlarının araşıınlınası. Tnr.ParasitoL.Oerg. 4, 18, 398-401.
15. Tan)i1ksel,M .Gtııı,H.J·lazncdmoglıı,T.,Bııbür,C .Bay!>.ıll
nr.M .. l3.aşustaoglu,A.(ı99~): Toxopı~sınosis tanısında serolojik
ıesllcrin k~rşI13şıırıllııas1. Tilr.PilmsitoL.Oerg. 3, 18. ~66-276
16.T\lnccr.E.I .. B~ykml,M.,Ak\"OI.G.( 1993): Konya ve
çCl"fesiııdc Toksopla7Jnw. hışkıı!ıı kışilerin serumlarınd.1 Toxopl:ısım, gondii")"c karş' olıı~ııınılmı antikorlamı
~wştırılın~sı. Tilr.Pamsito!.Dcrg. 3-4.17.11-15
17.Ural. O .. Ccııgiz,A.T. ,Alııntaş,K.,NaZlrogln,A (1992)
Aknı lösemi ve L~~ıtoıl\;ılı hı.stabrd.1 To.~opıasll1a IgO
antikıırl:;ırının [USA i';:: Sı-T ile ka~ılaştırılnmsı Ttır.J>amsiıol.D<.'1"g.l-l, 16,51·511.
iS. Yalçın, A.N.,Topçu,S., OlÇelik,S., Poyraz,O. (1993):
HcınoJiyalizc giren kronik böbrek yctınır.clikti hnstnlarda
Tıı~"plasıııa TgO ve I~M anlikorlarınııı EUSA ilc araştırılıımsı Tllr.Pilf<ısitoI.Dcrg. 2, 17, 15-19.