AGAR JEL İMMUNODİFUZYON TESTİAGAR GEL PRESİPİTASYON TESTİ VİROLOJİ -I

(1)

VİROLOJİ - I

AGAR JEL İMMUNODİFUZYON TESTİ

AGAR GEL PRESİPİTASYON TESTİ

• Prof.Dr. Yılmaz Akça

• Prof.Dr. Feray Alkan

• Prof.Dr. Aykut Özkul

• Prof.Dr. Seval Bilge-Dağalp

• Prof. Dr. M.Taner Karaoğlu

(2)

AGAR JEL İMMUNODİFUZYON TESTİ

AGAR GEL PRESİPİTASYON TESTİ

Tanım:Agar ile oluşturulan yarı katı ortamda antijen ve antikorun diffuze olmaları ve antijen ile

(3)

• TANIMLAR:

• Presipitinojen

: Agar jel testinde

kullanılan antijen

• Presipitin

: Ag ile birleşme

özelliğindeki antikor

• Presipitat

: Pozitif reaksiyonlarda

(4)

• Duyarlık

• AGID testi; genellikle nötralizasyon

ve KF testinden daha az duyarlıdır.

Ancak, retroviruslar ile oluşan

(5)

• Kullanım alanları

(6)

• Test için gerekenler

• Agar

• Serum (Amaca göre bilinen ya da şüpheli)

(7)

• Testin Uygulanışı

• Agar otoklav edildikten sonra petri kutularına aktarılır ve agarın donması için beklenilir.

• Özel delici kullanılarak, merkezde bir ve

bunun çevresinde merkeze eşit uzaklıkla 6 göz açılır.

• Amaca göre; bilinen ortaya şüpheli materyaller periferde olan gözlere ilave edilir ve 48-72

(8)

(9)

Agar Gel Immundiffuzyon Testi

Agar üzerinde antijen ve antikor için gözler açılır

(10)

(11)

Antijenler, jel içinde her yöne doğru difuzyona

uğrarlar

(12)

(13)

(14)

(15)

Eğer Ab konsantrasyonu yüksekse Presipitat Ag’e

yakın oluşur

Presipitat

Eğer Ag konsantrasyonu yüksekse

Eğer Ag konsantrasyonu yüksekse Presipitat Ab’a

(16)

2 Antijen İlave edilmiş göz 2 Antikor İlave edilmiş göz Her Ag-Ab birleşmesi için oluşmuş

(17)

Bir Ag İki Ag

Aynı Antikoru içeren gözler Farklı Antikoru içeren gözler Birleşmiş Presipitat

(=özdeş)

Birleşmemiş Presipitat (=özdeş değil)

İki Epitoplu Ag

(18)

(19)

(20)

(21)

In this test, two samples showed lines of identity with the positive control sera and were positive (+). Each of these positive samples show a second line of non-identity (arrowheads), indicating that

antibodies in the test serum are reacting with a non-viral antigen in the antigen preparation.

(22)

• Testin değerlendirilmesi

• Bilinen ve şüpheli materyalin yerleştirildiği gözler arasında presipitat oluşumu (+)

reaksiyon olarak değerlendirilir.

• Test, serumun antikor titresinin belirlenmesi

için kullanılacak ise, serumun bir seri (1/2,¼,1/8,...)

sulandırması hazırlanarak test uygulanır. Antikor titresi presipitat oluşumunun

görüldüğü son sulandırma basamağı olarak değerlendirilir.

• Amaca göre; bilinen ortaya şüpheli materyaller periferde olan gözlere ilave edilir ve 48-72

saat nemli ortamda inkubasyonu takiben ışık kaynağı karşısında sonuçlar değerlendirilir.