雞母珠毒蛋白之細胞生物學研究
中文摘要
雞母珠(Jequiriti Bean)為豆科(Leguminosae )相思樹(Abrus precatorius L.
)之種子,經Sepharose 4B 及 Sephadex G-100 chromatography 純化出兩種毒蛋 白,分別為Abrus agglutinin(AAG )及 Abrin 。為探討 AAG ,Abrin 及“當歸 龍薈丸”對免疫系統的影響,乃利用Rosette 檢測法,血球凝集試試驗及間接免 疫螢光染色法,分別測定抗原反應細胞數目,抗體力價及輔助性T 細胞/抑制 性T 細胞(TH/TS )之比值。結果顯示,三者對於小白鼠均有免疫增強作用 。 AAG 、Abrin 及“當歸龍薈丸”皆可提高小白鼠之抗原反應細胞數目及 TH/TS 比值,至於抗體力價,在本研究中未發現提高。為對雞母珠毒蛋白做進一步探討 乃嘗試製造抗Abrin 之單株抗體,以簡化 Abrin 及 AAG 之純化步驟,並提高 AAG 之純度。發現以 100ng Abrin 配合 Freund's 佐劑,間隔二週,連續腹 腔投予三次,再以1000ng Abrin 加強注射,血清中抗體力價經酵素免疫分析法
(ELISA )測定,可達 104 以上。將上鄉述免疫過之脾細胞與 NS-1 細胞株,利 用1ml 50%PEG(MW 1500)融合,可得到 440 %之融合率,經 ELISA 篩選 後,約有5 %融合細胞會分泌抗 Abrin 抗體。