雞母珠毒蛋白之細胞生物學研究
中文摘要
雞母珠（Jequiriti Bean）為豆科（Leguminosae ）相思樹（Abrus precatorius L. ）之種子，經 Sepharose 4B 及 Sephadex G-100 chromatography 純化出兩種毒蛋 白，分別為 Abrus agglutinin（AAG ）及 Abrin 。為探討 AAG ，Abrin 及“當 歸龍薈丸”對免疫系統的影響，乃利用 Rosette 檢測法，血球凝集試試驗及間接 免疫螢光染色法，分別測定抗原反應細胞數目，抗體力價及輔助性 T 細胞／抑 制性 T 細胞（TH/TS ）之比值。結果顯示，三者對於小白鼠均有免疫增強作用。 AAG 、Abrin 及“當歸龍薈丸”皆可提高小白鼠之抗原反應細胞數目及 TH/TS 比值，至於抗體力價，在本研究中未發現提高。為對雞母珠毒蛋白做進一步探討， 乃嘗試製造抗 Abrin 之單株抗體，以簡化 Abrin 及 AAG 之純化步驟，並提高 AAG 之純度。發現以 100ng Abrin 配合 Freund's 佐劑，間隔二週，連續腹 腔投予三次，再以 1000ng Abrin 加強注射，血清中抗體力價經酵素免疫分析法 （ELISA ）測定，可達 104 以上。將上鄉述免疫過之脾細胞與 NS-1 細胞株， 利用 1ml 50％PEG(MW 1500)融合，可得到 440 ％之融合率，經 ELISA 篩選 後，約有 5 ％融合細胞會分泌抗 Abrin 抗體。
