biyoteknoloji

(1)

BİYOTEKNOLOJİ NEDİR?

Canlılar aracılığı ile ürün ve

hizmet üretmektir

(2)

Reprodüktif Biyoteknolojinin

Amacı

Canlılarda

in vivo

ve

in vitro

koşullarda gen kaynaklarının uzun süreli

korunması ve daha fazla sayıda yavru elde etmek

(3)

Beklenen Faydalar

• Yaşam içinde damızlıklardan daha fazla yavru elde edebilme

• Zorunlu kesime giden damızlıklardan kesim sonrası damızlık olarak

faydalanabilme

• Gen transferi ile biyoreaktör üretimi, klonlama gibi BİYOTEKNOLOJİK

(4)

EMBRİYOLARLA İLGİLİ REPRODÜKTİF BİYOTEKNOLOJİ KONULARI  EMBRİYOLARIN DONDURULMASI  KİMERİSMUS  İDENTİK İKİZLİK

 EMBRİYOLARIN İN VİTRO ÜRETİMİ  CİNSİYET TAYİNİ

 GEN TRANSFERİ

(5)

SPERMA ÜRETİMİ VE

SUNİ TOHUMLAMA

(6)

(7)

NORMAL VE DEFORME SPERMATOZOON

(8)

SIVI AZOT BUHARINDA

(9)

(10)

(11)

(12)

(13)

(14)

(15)

(16)

(17)

(18)

(19)

SIĞIRLARDA

(20)

SIĞIRLARDA EMBRİYO TRANSFERİ NE AMAÇLA YAPILIR?

• Kıymetli damızlıklardan daha fazla yavru elde edebilmek

• Eldeki sürünün ıslahında ve safkan damızlıklara dönüştürülmesinde

yararlanmak

• Hayvan ıslahı çalışmalarına hız kazandırmak • Cinsiyeti önceden belirlenmiş embriyoların

transferi ile doğrudan damızlık olarak kullanılabilecek dişi yavru elde etmek

(21)

SIĞIRLARDA EMBRİYO TRANSFERİ UYGULAMASININ AŞAMALARI

• Verici (Donor) ve Alıcı (Recipient) hayvanların seçimi

• Alıcı ve Verici ineklerin östrus senkronizasyonu • Vericilerde süperovulasyon [multiple ovulasyon

(MOET)]

• Vericilerde uterus yıkaması ile embriyoların elde edilmesi

• Elde edilmiş embriyolardan sağlıklı, transfer edilebilir olanların seçilmesi ve transfer için hazırlanması

• Embriyoların alıcı hayvanların uteruslarına transfer edilmesi

(22)

SÜPEROVULASYON AMACIYLA KULLANILAN HORMONLAR

FSH

PMSG

HMG

(23)

ALICI VE VERİCİ HAYVANLARDAKİ ÖSTRUS SENKRONİZASYONU

VERİCİLERDEKİ PROSTAGLANDİN ENJEKSİYON GÜNLERİ

ALICILARDAKİ PROSTAGLANDİN ENJEKSİYON GÜNLERİ

0. gün 11. Gün sabah

Östrus takibi ve tohumlama

0. gün _{veya 12. gün sabah}11. Gün akşam

Östrus takibi

48. saat

(24)

YIKAMA ÖNCESİ OVARYUM KONTROLU

(25)

DOĞAL ÖSTRUSTA GELİŞMİŞ BİR FOLLİKÜL VE SİKLİK KORPUS LUTEUM

(26)

SİKLUSUN 6. GÜNÜNDE GELİŞMEKTE OLAN KORPUS LUTEUM

(27)

SÜPEROVULASYON OLUŞTURULMUŞ BİR İNEKTE OVARYUM REAKSİYONU

(28)

SÜPEROVULASYON OLUŞTURULMUŞ İNEKTE OVARYUMUN GÖRÜNÜMÜ

(29)

SÜPEROVULASYON OLUŞTURULMUŞ İNEKTE OVARYUMLARIN

(30)

(31)

YIKAMA KATETERİNİN YÖNLENDİRİLMESİ

(32)

YIKAMA KATETERİNİN UTERUS İÇİNE YERLEŞTİRİLMESİ

(33)

YIKAMA KATETERİNİN UTERUS İÇİNE YERLEŞTİRİLMESİ

(34)

UTERUS YIKAMA SIVISININ TOPLANMASI

(35)

EMBRİYOLARIN SEDİMENTASYONU SONRASI ÜST YIKAMA SIVISININ

AYRILMASI

(36)

ÇÖKELTİYİ İÇEREN YIKAMA SIVISININ SAAT CAMLARINA AKTARILMASI

(37)

FİLTRE KULLANILARAK EMBRİYOLARIN YIKAMA SIVISINDAN KAZANILMASI

Embriyo filtresi

(38)

GENİŞLEMİŞ (EXPANDED) BLASTOSİST VE MORULA AŞAMASINDAKİ SIĞIR

(39)

HATCHING (ZONADAN ÇIKAN)

BLASTOSİST VE DİĞER AŞAMALARDAKİ EMBRİYOLAR

zonadan çıkan (Hatching) blastosistler

(40)

(41)

(42)

TÜRKİYE’DE İLK EMBRİYO TRANSFERİ UYGULANAN İNEK

(43)

TÜRKİYE’DE EMBRİYO TRANSFERİNDEN DOĞAN İLK BUZAĞI

(44)

EBMRİYO TRANSFER UYGULAMASINDAN DOĞAN BUZAĞILAR

(TİGEM İNANLI İŞLETMESİ, MURATLI-TEKİRDAĞ-1987)

(45)

(TİGEM İNANLI İŞLETMESİ, MURATLI-TEKİRDAĞ-1987)

(46)

EBMRİYO TRANSFER UYGULAMASINDAN DOĞAN BUZAĞI (ırklar arası transfer)

(47)

(48)

EBMRİYO TRANSFER UYGULAMASINDAN DOĞAN BUZAĞI

(ırklar arası transfer)

(49)

ZİGOT AŞAMASINDAKİ BİR

EMBRİYO

(50)

(51)

DÖRT BLASTOMERLİ BİR

EMBRİYO

(52)

GELİŞİMİNİN 8 BLASTOMER VE MORULA AŞAMASINDAKİ

(53)

GELİŞİMİNİN HATCHİNG (ZONADAN ÇIKAN) BLASTOSİST AŞAMASINDA BİR

(54)

ZONADAN ÇIKMIŞ (HATCHED) BİR BLASTOSİST

(55)

ZONADAN ÇIKMIŞ (HATCHED) BİR BLASTOSİST VE BOŞ ZONA

(56)

BLASTOSİST AŞAMASINDAKİ SIĞIR EMBRİYOSU

(57)

GENİŞLEMİŞ (EXPANDED) BLASTOSİST AŞAMASINDA SIĞIR EMBRİYOSU

(58)

(59)

EMBRİYOLARA MİKROCERRAHİ YÖNTEMİNİN UYGULANIŞI

(60)

(61)

(62)

(63)

(64)

(65)

(66)

Ovaryumlar kesimden itibaren en fazla 2 saat içinde laboratuara ulaştırılır.

PBS

İn Vitro Maturasyon

(67)

İn vitro embryo üretimi için

ovaryumdan aspirasyonla oosit elde

edilmesi

(68)

İn Vitro Olgunlaşma

%5 CO2’li 38,5°C’lik İnkübatör

%100 Neme Doyurulmuş Ortam

İn Vitro olgunlaşma 24 saat

TCM 199

(69)

SPERMA HAZIRLIĞI

 15 dakika 1500 g’de santrifüj

Dip kısımdaki sperma peleti üzerine 3 ml HSOF

konulur 6 dakika 600 g’de ikinci kez santrifüj Dipteki sperma peletinde konsantrasyon tayini

(70)

FERTİLİZASYON

%5 CO2’li 39°C’lik İnkübatör

İn Vitro Fertilizasyon 19-21 saat

Motil Spermatozoon

0,8 x106 _{/ ml (final konsantrasyon)}

BSOF Medyumu

Östrus koyun serumu

(71)

İN VİTRO KÜLTÜR

%5 CO2,, %5 O2 , %90 N2 li 38,5°C’lik İnkübatör

SOF + 4 mg/ml BSA

(72)

Olgunlaşma için uygun primer

oositler

(73)

Olgunlaşma sonrası oositlerin

görünümü

(74)

İn vitro kültürde blastosist aşamasına gelmiş embriyo

(75)

(76)

ICSI (İNTRA SİTOPLAZMİK SPERM ENJEKSİYONU) UYGULAMASI

(77)

(78)

GENETİK MATERYALİN

(79)