A.
D.
Veteriner Fakültesi Besin Konirolıı ve Teknol~jisi KürsüsüProf Dr. Zeki Tolg(~'P
ERZİNCAN TULUM PEYNİRLERİNDE
ENTERO-TOKSİIENİK STAFİLQKOK'LAR VE
SALMO-NELLA'LAR YÖNÜNDF.N ARA.ŞTIRMA
Ergün Özalp*
Şerif Kaymaz**
Enis Akşehirli
*
*
*
Studies
of enterotoxigenic
staphylococci
and
salmoneıla
on Erzincan
Tulum
cheese.
Summary:
26 Erzincan Tulum cheese samples were anali;:edjin
enterotoxigenic staphylococci and salmonella organİsms. kone~L
the samples contained any enlerotxigenic staphylococei and salmonella when they were examinedkY
the enrichment method. Bul, when the sc.mples were examiııeri for the presence of enterotoxin b)' frog lest, enlerotoxin was fouııd in one ~f the samples. This was also cOl!/i"rmed b)' Kitten test.The results Izas indicated tlzat there is a risk ol staph;ylowccal food poi-soning due to Erzincan Tulum clzeese.
Özet:
26 Erzincan tulum peyniri numunesi enteroloksijenik stafilakok-lar ve salmonellastafilakok-lar )'önünden denemeye alındı. Nunwnelerin Iziç birinde, zen-ginleştirme yöntemi ile stafilakok ve salmonella grubu bakteri üretilemedi. Yal-ıııZ bir Ilumunerie kurbağa tesli ile enlemtoksin varlığı saj)laııdı. Bu durum Kitten test ile de dolrulandı.Alınan neticeler, F.r;:.incaıı tır/um pe)Jnirlerinilı stafilakok.ıik :.:.ehirlen-meler yönünden tam bir güvence ('ermediğini göstermiştir.
*
Doç. Dr. A.Ü. Vet. Fak. Besin Koııtrolu ve Teknolojisi Kürsüsü. Ankara - Türkiye ** Dr. As. A.Ü. Veı. Fak. Hayvan Yetiştiriciligi ve Sağ. Bilimleri Uz. Yük. Ok. Besili Kontrolu ve Tekn0lojisi Bilim Dalı. Ankara - Türkiye.*** Vet. Hek. Yzl>. Vet. Fak. Hayvan Yetiş. ve Sağ. Bilinıler lh. 'Yük. Ok. Besin Konlo ve Tek. Bilim Dalı Uzman adayı, Ankara - Türkiye.
56 Eq;ün Ozalp-Şerif Kaymaz-Enis Akşehirli
Giriş
Erzincan
yöresinde
imal edilen tulum
peynirleri,
yurdumuzun
her yanında
ve özellikle büyük tüketim
merkezlerinde
fazla
miktar-da yoğaltılan
bir gıda maddesidir.
Bu çalışmamızda,
Erzincan
tu-lum
peynirlerinin
salmoneıla
ve
enterotoksijenik
stafilakok'larca
bakteriyel
gıda
zehirlenmelerine
ne
ölçüde
neden
olabilecekleri
üzerinde
durmaya
çalışılmıştır.
Yurdumuzda
beyaz
peynirlerden
ileri gelen
gıda
zehirlenme-lerinde
enterotoksijenik
stafilakokların
iştiraklerinin
%
7.5
iolduğu
bildiril~TŞtır
(5).
-Hindistan'da
micro-slide
gel-diffizyon
tekniği
ile yapılan
test-lerde, 20 cheddar
peynir numunesinden
2 sinde t~terotoksin
A ve~
B tesbit
edilmiş
ve az sayıda
numunede
bulunmalarına
-rağmen,
yeter
sayıda
enterotoksijenik
gıda
zehirlenmeleri ne neden
olabile-ceği
ileri
sürülmüştür
(I 2).
Yine
Hindistan'da
979 süt ve ürünleri
numunelerinden
265
inin koagulaz
pozitif stafilakok
kapsadığı
ve cheddar
peynirlerinin
%
3
ı.
57 sinde
enterotoksijenik
stafilakok
bulunetuğu
açıklanmıştır
(I 3).
Federal
Almanya'da,
30 peynir
numunesinden
22 sinde,
2-26
kişinin hastalanmalarına
neden
olan stafilakok
enterotoksini
serolo-jik ve biyoloserolo-jik
testlerle
pozitif olarak
tesbit edilmiştir
(I 5).
Tahran
ve yöresinde, taze İran peynirleri
üzerinde yapılan
araş-tırmada,
79 numunenin
13 ünde
iOx
i03jgr.dan
az, 48 inde
iOx
i03
IOOxI03jgr., 15 inde IOOxI0
3--SOOxI03jgr. ve 3 ünde 500xI03jgr dan
daha çok koagulaz pozitif stafilakok bulunduğ!Lbildirilmektedir
(I I).
Emmental
peynirleri
üzerinde
yapılan
bir
çalışmada,
peynir
sütüne
50.000-
i00.000 jml.
patojen
stafilakok
ilave
edilmiş
ve
durum
fabrikasyon
boyunca
takip
edilmiştir.
Stafilakokların
sayısı
ısıtma
anında
süratle
düşmüştür.
Laktik
bakterilerin
gelişmesiyle
yeni bir azalma
dikkati
çekmiştir.
24 saat sonunda
çok az sayıda
stafilakok kaldığı saptanmıştır.
Stafilakokların
tam olarak yok olması
oldukça
uzun
zaman
almaktadır.
Ancak
stafilakokların
peynirde
toksin yapacak şekilde gelişme gösteremedikleri
ileri sürülmüştür
(6).
Kantal
peynirleri
üzerinde
yapılan
bir çalışmada
ise L3_Q..
stafi-1Yw.k~u
izole edilmi~, bunlardan
80inin kmlgulaz p'Q?jJif olduğu
saptanmıştır
(8).
Erzincan Tulum PeynirIerinde Enterotoksijenik Stafilokok'lar ve Salmonella'lar... 57
::;; ı.
5x
ı
Objgr
Staphylococcus
aures bulunduran
ticari
cheddar
peynirlerinde
!?NAase
Sçkillendiği
halde,
enterotoksin
meydana
gelmedi ği ileri
sürülmüştür
(2l).
Peynirlerde
Staphylacoccus
aureus'un
gelişmesi
ile
DNAase
ve
Enterotoksin
A şekillenmesi
arasındaki
ilgi araştırılmış
ve peyniri n
imal
durumu,
örneğin
kullanılan
sütün
çiğ veya ısıtılmış
olması,
laktik
starterin
tipi,
starterin
aktivitesinin
DNAase
şekillenmesini
etkilediği
görülmüştür.
Yine Staplrylacoccus aureus ile D~Aasc
miktar-ları arasında
yakın
bir ilgi olduğu
saptanmıştır.
DNAase
şekillen-mesine neden olan faktörler
Enterotoksin
A nın meydana
gelmesini
de etkiler.
Canlı StaphylacocC1ls aureus populasyonu
peyniri n
olgunlaş-ması esnasında
azalırken,
DN Aase ve Enterotoksin
A uzun süre (4.
4 oC de
3 yıl)
dayanabilirler
(7).
Yurdumuzda
peynirlerde
salmonellalar
üzerinde
yeterli
çalış-maya
rastlanmamaktadır.
Ancak
kolostrum-süt
karJ!~lmını 24 saat
oda derecesinde
beklettikten
sonra içen 4 aileden
24 kişide
zehirlen-me görülmüş,
bunlardan
3 çocuk ölmüştür.
Hastalardan
ve
kolost-rumdan
S. typhumurium
var. copenhague izole edilmiştir
(22).
tran'da
Aralık
ı
972-Mayıs
1973 tarihihleri
arasında,
36
Tah-ran parekendecisinden
alınan
ı
42 adet tuzsuz taze peynir
numunc-sinden 8 inde
(%
5.6) salmoneıla
hulunmuş
ve bunlardan,
Salmoneıla
newport,
Salmoneıla
derby, Salmoneıla
upsala,
Sqlmonella
ty(Jhimurium,
Salmoneıla paratyphi B ve Salmoneıla pamtyphi
C izole edilmiştir
(9).
Cekoslovakya'da
koyun sütünden
yapılmış
2
ı
Bryndza
peyniri-nin 7 sinde, koyun sütünden
yapılmış 957 Lump peynirinin
46 sında
ve inek sütünden
yapılmış
54 peynir numunesinin
4 Ünde ,Salmoneıla
.~ agona,Esbit
edilmiştir.
Bir peynir
mayası fabrikasından
temin edilen
57 rennet
numunesinden
ı
2 sinde Salmoneıla agona bulunuşu
kon
ta-minasyon
kaynağının
bu
fabrikanın
olduğunu
göstermiştir
(ı4).
Materyal ve Metot
Materyalolarak
Erzincan'dan
ve Ankara
piyasasından
temin
edilen
26 Erzincan
tulum
peyniri
numunesi
kullanıldı.
a. Salmonellaların
araştırılması:
Tulum
peynirierinin
yarı sert peynirler
grubunda,
su miktarı
oldukça düşük bir gıda maddesi olması nedeniyle, içinde çok az
sayı-da salmoneıla
grubu
bakterileri
bulundurabilme
olasılığından
dolayı
Sıl Ergıiıı Özalp-Şerif Kayıııaz--Eııi, Akşchirli
saat inkuIJasyondan sonra buyyon kültürü santrifüje edildi. Üstteki buyyon döküHü. Scdimentli tüpe Tetrathionate Broth doldurularak yeniden 37°C de i 8-20 saat inkııbasyona bırakıldı. Bu zenginlcştir-mc i~Icrninden sonra selektif katı besi yerlerine ekim yapıldı (ı).
İzOJa.;YOil için Difeo'nun Bismuth Sulfite Agar ve SS Agar besi yerleri kullanıldı (2,3).
h. Enlerotokfl)enik stafllakoklrmn araştırılması:
i O gr peynir numunesi stafilakok zenginlqtirme besi yerine ekiidi. 44°C de 48 saat inkiibe edildi. Phenol-red li besi yerinin sarıya dönüştüğü numunelerden bakteriyoskapi yapıldı. Kok kümeleri görülenlerden Chapman'll1 modifiye ettiği :'I1annitol Salt Agar besi yerine sathi ekim yapılarak tek kolonileriıı düşmesi sağlandı. 44 vC de 48 saat inkubasyondaıı sonra besi yeriniıı rengini sarartan, sarı renkli koloniler ayrılarak pigment, hemoliz v(~ jelatinaz oluşturan, maııııiti fermente eden ve tavşan kam pla::ı:masıııı koagule eden suşlar arandı (4,17,18,20).
c. Tulmn peynirieriııde enteroloksin araNması:
Takriben 20 gr. kadar peynir numunesi bir havanda, steril kum ilave edilerek, azar azar steril serum fizyolojik karıştırılmak suretiyle, aseptik koşullarda ezildi. Bir süre maserasyona bırakıldıkan sonra önce süzgeç ka,ğıdından ve sonra Seitz süzgecinden süzüldü. Filtrat kaynar su banyosunda 20 -30 dakika tııtııldu ve soğutulduktan sonra kurbağa testine tabi tutuklu. Kurbağa testi miisbet olan nurnuncler-de, 6--8 haftalık kedi yavruları üzerinde Kitten test uygulandı (17,
18,20).
d. ısıtma kontrolu:
2 gr peynir numunesi 8 ını distilc su içinde ezilerek süt benzeri bir sıvı elde edildi. Bu sıvıda Fischer Metodu ile fosfataz anzimi aran-dı (16,19).
Bulgular
a. ;\'umııne!crin hiç. birinde salmoneıla grubu bakterilcr üremcdi. b. Hiç biı' numunede enterotoksijenik stafilakok üremedi. c. Bir numlll1cde kurbağa test ilc enterotoksin olduğu saptandı. Ayrıca bu mımıınede uygulanan Kitten test ilc netice teyid edildi. d. l\'ul1llll1clerin tümünde fosfataz test negatif olarak saptandı.
El'zilıp."JI TilIlim Pp".irlpriıııl" Eııtp.l'nlııhijeııik S,,,filııkok'1:ır VP S"lıııc;ııell,I;,r... 50
Tartışma ve Sonuç
Peynirlcrden ileri gelen bakteriyel gıda zehirlenmelerine yada peynirlerde zelıirlenme etkenlerine oldııkça sık rastlanmaktadır. Yurdumuzda üretilen tulum peynirIeri üzerinde bakteriyel gıda zehirlenmeleri açısından bir yayıııa rastlanmamıştır. Erzincan'dan ve Ankara piyasasından temin edilen 26 EninclI1 tutum peyniri numunesinde enterotoksijenik stal'ilakoklar ve salmoneılalar yönün-den bir araştırmanın yararlı olabileceği dü~ünccsiyle bu çalışma yapılmıştır.
Denemeye alınan numunelerin tümünde fosfataz anziminin negatif oluşu, peyııir imalinde kullanılan sütün ya da pıhtıııın, pas-törizasyon derecesini karşılıyahilecek ısı derecesinde ısıtıldığını gös-termektedir. Bu nedenle de Erzincan tu!um peynirierinin, süt ve ürünleriyle insanlara geçebilerek hastalık etkenlerinin, imalat süre-since veya imalat sonrası hir bulaşma olmadığı takdirde, insan sağ-lığı açısından yeterli güvenreye sahip olduğu görülmektedir.
Değişik peynil' çqitlecinde enterotoksijenik stafilakokların (5,
8,10,11,13,15,17) ve salmoneılaların (9,14) I>ulunmasına karşılık Erzincan tulum peynirlerinde bulunmayışLırı, bir ölçüde uygulanan bu ısıtma işlemleriyle yakından ilgilidir. Ayrıca, tulum peynirlcrinin teknol~jisi gereği, 90 i20 günlük olgunlaşma süreci de bu hususta etkili olmaktadır.
Bir numunede enterolOksin buluşu, peynır imal edilen sütte enterotoksinin şekillenmiş olmasıyla yanıtlanahilir. Zira, imalat anında sütle en terotoksijeni k stafilakoklar olsa dalıi, bu nları n peynir-de enterotoksin şekiııendirebilmelcri mümkün görülmemektedir (6,
2 I).
Ayrıca ~ekillenen entemloksinin çok uzun süre peynirde aktif olarak kalabildiği (7) de bir gerçektir.
Du
durıım Erzincan tulum peynirierinin stafilakoksik zehirlenıneler yönünden güvencc vermc-diğini göstermektedir.Literatür
1-- Anon (ı 957): Aleat h)'gieııe, FAO "grieultur::ıl Studics No: 34 Also as World Health Organisation: Monograph Series ~o: 23, Rome
2- Anon (I 967): Standart ınet/zods for the exaınination of daİı)' prodııcls, Twclftlı Edition, A.P.H.A. Ine., :'\ew-york.
Ergün Ozalp-Şcrif Kaymaz-Enis Akşchirli
3- Anon (1968):
Difco
suplementaryliterature,
Difco
Lahoratorics,
Dctroi t- Michigan.
4- Anon (1976):
The oxoid manual of culture media, ingrdients and other
laboratory service, Third
editian,
Puhlished
by Oxoid
Limited,
Basİngstoke.
5- Alkış, N. ve Tuna, I. (1964):
Gıda maddelerimizin
durumu ve
bakter£yel gıda zehirlenmeleri.
T.i.T.B.
Derg. XXIV
(3) 260-269. 6-Baumgartner,
H.- Kastlı,
P.-Weber,
P. (1968):L'ttat
de
Staplrylococcus aureus dans le lait et au caurs de la fabrication
du fromage
Emmental.
Schwcn.
Miklızcit.
l\o:75, "As guated"
Lelait
L
(493-494) 190,1970.
7-
Cords,
B.R.-Tatini
S.R. (1973):Applicability
of heal stable
de-sox)'rihonuclease assa)' for
assessment of staph)'lacoccal growth and the
likC)' presence
~f
enterotoxin in cheese, Journal
of Dairy Scicncc,
56
(12) 1512-1519.
8-
Devoyod,
J.J.
et Millet, L.
(1974):La floı'e microbienne du
fro-mage de cantal fabriqut
tlpartir de la it cru, ll. Les staph)'locoques, LIV,
(538) 528-536.9-
Farkhondeh,
A.Ghazvinian,
R.et Lachal, Ph. (I
974):Con-tamination par les salmonella du fromage
iranien frais,
non sale, mis
en vente dans la region de TiMran.
Le Lait, LIV
(535-536) 302-304.10-
Feghali,
A. (1953):Enqutte
et recherches recentes sur l'intoxication
par lefromage
dans le proche et moven orient. Le Lait, XXXIII
(323-324) 139-152.
1
1-Ghazvinian, R. -Farkondeh, A. -Lachal, Ph. et
Kohnec-hahri, M.
(1975):Dtnobrement
des germes totaux et dttermination
du taux de contamination en staph)'locoques coagulase-positive du fromage
iranien frais,
non sa le, mis en vente dans l'agglomeration
de TtMran,
Le
Lait,
LV
(541-542) 95-10012-
Ghosh,
S.S.-Laxinıinarayana,
H. (1973):Detectionı of
prifor-med enterotoxins
~r
staph)'lococci in dairy products emplO)'ing serological
metod. Indian Journalaf
Experimental
Biology,
11 (5) 457,"As
quated"
Dairy
Sc.
Abs. 37 (4) 180, 1975.13-
Ghosh,
S.S.-Laxinıinarayana,
H. (1974):Incidence and
disribu-tion of staplrylococci in milk and milk products, Indian
Journal,
of
Animal
Health,
13 (2)ı
17-120,"As guated"
Dairy Sc. Abs.
Erzincan Tulum Peynirlerinde Enterotok,ijenik Slafilokok'Jar ve Salmonella'lar... 61
14-
Grieger, C. -Havrila,J.
-Hromada, R. -Pakanova,M.
-PerL. R. Verdon, F. (1976):Rennet as asource of salmonella in
dai'ly"products,
Folia Microbiologica, 21 (3) 242, "As quated" Dairy Sc. Abs. 38 (12) 831, 1976.i5- Millier, F.J. (1974):
rood poisoning ji"om staphylococcal
enteroto-xins in cheese,
XIX. Int. Dairy Congr. lE, 552, "As quated" Dairy Sc. Abs. 37 (5) 253, 1975.16- Özalp, E. (I 97 I):
Ankara piyasasında satılan kahvaltılık
tereya/llarm
hijyenik kalitesi üzerinde araştırmalar.
A.Ü.
Vet. Fak. Yay. 167i
265, A.Ü. Vet. ve Zir. Fak. Basımevi, Ankara.17- Özer.
1.
(I 962):Stafilaokoksik
gıda zehirlenmeleri,
T. Vet. Hek. Der. Derg. 32 (186- 187) 99- 11ı.
18- Riemann, H. (I 969):
Food-born iıifections and intoxications,
Aca-demic Press, New-york and London.19- Schonberg, F.
b
(1956):Milchkunde
und milckhygine,
Verlag M. und H. Schaper, Hanover.20- Tanner, F.W. and Tanner, L.P. (I 953):
Food-born infections
and intoxications,
Second Edition, The Garrard Press, Pu bIishel's, Champaing, Illinois.21- Tatini, S.R -Soo,
H.M.
Cords, B.R -Bennet, RW. (1975):Heath-stable
nuclease for assessment of staphylococcal growth on likely
precence of enterotoxins in foods.
Journal of Foad Sciencc 40 (2)325-356, "As quated" Dairy Sc. Abs. 37 (9) 536, 1975. 22- Yazıcıoğlu, A. -Aksoycan, N.- Tuna, İ. (1960): S.
typhi-murim var. copenhaguc ile meydana gelen bir gıda zehirlen-mesi olayı. T.1.T.B. Dcrg. XX (3) 444.-446.