A Farmacopéia Americana USP [48] preconiza o uso de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção UV para determinação destes compostos em formulações farmacêuticas. No entanto, na literatura existem vários métodos descritos utilizando as mais variadas técnicas.
EMARA et al. [49] empregaram um método indireto para determinação espectrofotométrica de tetraciclina em medicamentos. O método é baseado na reação da tetraciclina com 2,2-difenil-1-picril-hidrazina, onde o decréscimo na intensidade da coloração violeta do reagente foi usada para determinar a concentração de tetraciclina. O procedimento envolve complexação do analito com cloreto de cálcio, extração com acetato de etila, seguido por evaporação a pressão reduzida e dissolução do analito em metanol. Posteriormente, uma alíquota é transferida para um balão volumétrico, adicionado tampão acetato pH 6, o reagente e aquecido a 60ºC por 12 minutos. A medida do decaimento de intensidade da cor violeta foi realizada em 520 nm e apresentou uma curva analítica com linearidade no intervalo de 2,5-15 μg mL-1.
KHALECK e MAHROUS [50] determinaram algumas tetraciclinas em preparações farmacêuticas por oxidação com solução de vanadato de amônio em ácido sulfúrico. As drogas foram aquecidas à ebulição com vanadato de amônio e ácido sulfúrico concentrado por 10 minutos, resfriado e a absorbância da cor desenvolvida foi medida em 750 nm. O método apresentou faixa linear no intervalo de 20-100 μg mL-1.
SULTAN et al. [51] propuseram um método para determinação de tetraciclinas em formulações farmacêuticas. O método é baseado na complexação das tetraciclinas com ferro (III) em ácido sulfúrico diluído com detecção espectrofotométrica em 423 nm. A curva analítica foi linear no intervalo de 10-200 μg mL-1.
SASTRY et al. [52] desenvolveram um método indireto para determinação de tetraciclina em formulações farmacêuticas. O mesmo é baseado na reatividade destes compostos com cloramina-T em meio ácido. O método envolve a adição de excesso de cloramina-T de concentração conhecida na presença de 0,25 mol L-1 de HCl e determinação da cloramina-T não reagida, pela medida do decréscimo da
absorbância do corante galocianina em 540 nm. A curva analítica apresentou uma curta faixa linear compreendendo o intervalo de 0,4-4,8 μg mL-1.
SULTAN [53] desenvolveu um método espectrofotométrico para determinação de tetraciclina em preparações farmacêuticas. O método é baseado na reação da tetraciclina com molibdato de sódio em ácido clorídrico com aquecimento durante 15 minutos em banho maria à 100 ºC. A absorbância do produto formado foi monitorada em 430 nm. O referido método apresentou curva analítica com linearidade no intervalo de 10-140 μg mL-1.
SAHA et al. [54] propuseram um método espectrofotométrico utilizando acetato de uranila como reagente para determinação de antibióticos do grupo das tetraciclinas em formulações farmacêuticas. O reagente forma complexo de coloração alaranjado com as drogas em meio de N,N-dimetilformamida e os produtos das reações são monitorados em 414 nm e 405 nm para tetraciclina e doxiciclina, respectivamente. A Lei de Beer’s é obedecida nas faixas de concentrações de 0-115 μg mL-1 e 0-135 μg mL-1, para tetraciclina e doxiciclina, respectivamente.
SALINAS et al. [55] desenvolveram um método usando espectrofotometria derivativa usando a primeira derivada para determinar simultaneamente doxiciclina e oxitetraciclina. O método foi aplicado em amostras farmacêuticas, urina e mel sem qualquer pré-tratamento das amostras. A oxitetraciclina foi determinada utilizando a primeira derivada em 344,5 nm e a doxiciclina em 351,5 nm utilizando-se o espectro da mistura dos dois compostos.
MAMANI et al. [56] desenvolveram um método usando eletroforese capilar e modelo experimental para determinação simultânea de tetraciclinas em formulações farmacêuticas. O método apresentou linearidade no intervalo de concentração de 10-250 μg mL-1 para determinação de tetraciclina e 10-100 μg mL-1para doxiciclina.
GIL et al. [57] desenvolveram um método para determinação de doxiciclina em amostras comerciais por eletroforese capilar. O método foi linear na faixa de concentração de 250-3000 μg mL-1 e o limite de quantificação foi de 1,2 μg mL-1com desvio padrão relativo de 12,6%.
PALAHARN et al. [58] propuseram um sistema de análise por injeção em fluxo com detecção amperométrica pulsada para análise de tetraciclina em formulações farmacêuticas.O método apresentou curva linear na faixa de concentração de 0,005- 0,6 mM.
MEDINA et al. [59] propuseram um sistema de análise em fluxo contínuo combinando o método de extração em fase sólida com detecção espectrofotométrica na região UV para determinação de tetraciclina, doxiciclina, oxiciclina e clorotetraciclina em formulações farmacêuticas.
Um sistema de análise por injeção em fluxo contínuo com detecção espectrofotométrica foi proposto por SOLICH et al. [60]. O método baseia-se na formação do corante iminoquinona, obtido pela reação das tetraciclinas com 4- aminofenazona e hexacianoferrato (III) com monitoramento em 520 nm. As curvas analíticas foram linear no intervalo de 1-20 μg mL-1 e 20-250 μg mL-1 para a tetraciclina e doxiciclina, respectivamente.
LIAWRUANGRARH et al. [61] propuseram um procedimento de análise em fluxo com detecção espectrofotométrica para determinação de tetraciclina em preparações farmacêuticas. O método é baseado na complexação da tetraciclina com alumínio (III), em meio tamponado (pH 7.0), sendo o complexo Al(III)-tetraciclina monitorado em 376 nm. O método foi linear no intervalo de 0,5-10,0 μg mL-1 e apresentou frequência analítica de 165 amostras h-1.
Um sistema de análise por injeção em fluxo com detecção quimiluminescente para determinação de tetraciclina em formulações comerciais foi proposto por Li et al. [62]. O método proposto é baseado na quimiluminescência da reação redox MnO4-TCs em meio ácido (HCl) na presença de solução micelar de éter octilfenilpoliglicol (OP). A curva de calibração de tetraciclina foi linear na faixa de 1- 1000 μg mL-1, com limite de detecção para tetraciclina, oxitetraciclina e clorotetraciclina 0,40, 0,52 e 0,60 μg mL-1, respectivamente.
WANGFUENGKANAGUL et al. [63] desenvolveram um método em fluxo com detecção amperométrica usando um eletrodo de diamante dopado com filme fino de boro para determinação de tetraciclinas. O método foi baseado na oxidação eletroquímica da tetraciclinas e apresentou limite de detecção de 10 nM e a faixa linear de calibração encontrada foi 0,1-50 mM e 0,5-50 mM para tetraciclina e doxiciclina, respectivamente.
ZHENG et al. [64] desenvolveram um método em fluxo para determinação de tetraciclinas em formulações farmacêuticas por quiluminescência. Neste método as tetraciclinas aumentam o sinal quiluminescente produzido pela reação do H2O2 com o reagente Br2 que é produzido “in situ” na superfície do eletrodo de platina por oxidação de KBr em meio ácido. O método apresentou curvas analíticas com
linearidade nas faixas de concentrações de 0,03-50 μg mL-1, 0,2-24 μg mL-1 e 0,1-50 μg mL-1para tetraciclina, oxitetraciclina e clorotetraciclina, respectivamente.