Kreatin kinaz MB (CK-MB) Test (Sadece in vitro Diagnostik kullanım için)
【Versiyon No】 1.0
【Yayın tarihi】 02/12/2009
【Kullanım amacı】
The ReLIATM CK-MB test, akut miyokard infarktüs (AMI) tanısına yardımcı olarak serum / plazma/ insan tam kanında CK-MB konsantrasyonunu ölçmek için tasarlanmış bir in vitro diagnostik testtir.
【Özet ve Açıklama】
Kreatin kinaz (CK), dimeric izoenzimlerin üç formu: CK-MB, CK-MM ve CK-BB’de kas ve beyin dokusunda esas olarak bulunan bir enzimdir. CK-MB, M ve B’in alt birimleri tarafından oluşur ve çoğunlukla kalp dokusunda en önemli miyokard markırlardan biri olarak bulunur.
Akut miyokard infarktüsünde (AMI), CK-MB konsantrasyonu göğüs ağrısının başlamasından sonra 3-8 saat içinde yükselir, 8-24 saat içinde pik yapar ve 48-72 saat içinde sınır çizgisine geri döner 15 Seri CK-MB ölçümlerinin paternleri tek bir ölçümden daha çok bilgilendiricidir. Çünkü tek bir CK-MB ölçümü, uygun zaman alındığında bile, kesinlikle AMI oluşumunu onaylamaz veya ekarte eder. Buna göre, acil servise kabulde ve aralıklı CK-MB’in ölçülebilir olması tavsiye edilmiştir. Örneğin, eğer trombolitik tedavi uygulanırsa, 6-9 saat zaman dilimi içinde 3 saat aralıklı ve ya 24 saat zaman dilimi içinde 6-8 saat aralıklı nospesifik EKG değişimleridir. 2,5
CK-MB’in AMI teşhisdeki klinik önemi ve trombolitik tedavi sırasında izleme reperfüzyonunda kullanılması yaygın olarak kabul görmüştür.
【Test prensibi 】
ReLIA™ CK-MB testi çift antikor sandaviç formatında çift yönlü lateral flow immunoassaydir.
Test sırasında stripi ıslatmak amacıyla Port 1’e buffer A eklenir. Port 2’ye numune eklendiğinde, numune içindeki analit konjugat pat üzerindeki anti CK-MB immunogold konjugat ile reaksiyona girer ve immunokompleks oluşturur sonra nitroselüloz bant üzerinde ilerler. İmmunogold kompleks test bandına ulaştığında önceden nitrselluloz üzerine sabitlenmiş anti CK-MB antikorları ile reakasiyona girer. Kandaki CK-MB miktarı arttıkça test bandına daha fazla immunogold kompleks bağlanır.
Test yapılırken kontrol konjugat, kolloid altın etiketli DNP-BSA, kromatografi tarafından numune ile nitroselüloz üzerine de akıtılacaktır. DNP-BSA altın kontrol band 1 ve kontrol band 2’in yerlerinde nitroselüloz üzerine kaplı anti-DNP antikor ile reaksiyona girer, sonra kontrol bantları için sabitlenir. Kolloidal altın kırmızı renk olduğu için, DNP–BSA altının immün kompleksi kontrol band 1’de anti-DNP’e bağlanır ve nitroselüloz üzerinde kontrol band 2 kırmızı renk olarak görünür. CK-MB yokluğunda, sadece kontrol band 1 ve kontrol band 2 vardır. CK-MB
Reaksiyon tamamlandığında, ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihaz (SSJ-2) bantların DR’sını (yansıma yoğunluğu) analiz eder ve RI ları (test ve kontrol bantlarının relative şiddeti) hesaplar. Sonra, cihaz içinde programlanan standart eğriye dayalı analitin konsantrasyonu cihaz tarafından belirlenir ve sonucu (ng/mL) görüntülenir.
Port 1
Port 2
CK-MB Control band 2
Test band
Control band 1 Test type
Port 2 Assay window
Barcode Port 1
C 2 C 1CK
-MB
【Sağlanan Kit Bileşenleri】
Test Kasetleri 20
Buffer-A 1 （3.5 mL）
Ürün eki 1 Buffer-A zararlı olmayan kimyasal bir reaktiftir.
【Gerekli fakat sağlanmayan materyaller】
1. Tek kullanımlık polipropilen pipet uçlu 40μL ve 120μL hacimli hassas pipettörler.
2. ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihazı (SSJ-2).
【Uyarılar ve Önlemler】
1. Bu test in vitro diagnostik kullanım içindir.
2. Bu test sadece profesyonel kullanım içindir.
3. Yoğun hemolizli veya lipemi veya ciddi sarılıklı numunelerin kullanılmasına izin verilmez.
4. Zarar görmüş veya etiketi belli olmayan veya son kullanım tarihi geçmiş olan kasetleri kullanmayın.
5. Operatör, SSJ-2 cihazının ekran üzerindeki talimatlarını ve bu ürünün insörtlerini izlemelidir. Test bir kez başladığında durdurmayın. Aksi takdirde, teste devam edilemez.
Eğer teste yeniden başlanırsa, yeni bir kaset kullanılmalıdır.
6. Geçersiz sonuç veren numuneler tekrar test edilmelidir.
7. Her bir ürün için test tablosu güncellenmelidir. Aksi takdirde yeni lotlu kasetler cihaz tarafından kabul edilmeyecektir.
8. Kaset sadece tek bir kullanım içindir. Kullanılan kasetler ve numuneler potansiyel olarak biyo-tehlikeli madde olarak ele alınmalıdır.
9. Folyo torbasındaki kurutucuyu yemeyin.
10. Her örnek için tek kullanımlık pipet uçları ve numune şişeleri kullanın. Pipet uçları ve numune şişeleri tek kullanımlık olmalıdır.
11. ReLIA ™ CK-MB test sonucu koroner hastalığının yüksek olasılıklı mutlak kanıtı olarak kullanılmamalıdır. CK-MB düzeyi klinik bulgular ve diğer tanısal testler ile birlikte yorumlanmalıdır.
【Kit saklama ve ürün raf ömrü】
1. Kuru bir yerde oda sıcaklığında (15-30°C or 59 – 86°F) saklayın. Direk güneş ışığına maruz bırakmayın.
2. Raf ömrü 18 aydır. (son kullanım tarihi için üretici tarihi)
【Örnek için gerekenler】
1. Sadece serum veya heparinize ve EDTA.. K2 plazma / tam kan test edilebilir.
2. Numuneler uygun bir kan toplama cihazında toplanmalıdır. Kontamine olmuş numuneler kullanılmamalıdır.
3. Numuneler toplandıktan sonra hemen test edilmelidir. Serum veya plazma numuneleri hemolizi önlemek için en kısa sürede toplandıktan sonra ayrılmalıdır. Hemolizi yoğun olan numuneler kullanılmamalıdır.
4. Eğer hemen test edilmezse, tam kan numuneleri 2-8 °C de en fazla 24 saat süreyle saklanabilir.
5. Eğer buzdolabında 2-8°C 'de muhafaza edilirse, serum / plazma numuneleri 3 gün saklanabilir. Uzun depolama için, serum / plazma numunelerini –20°C altında saklayın.
Analit bozulması numunelerin donma çözülme döngüsünün min. sayısına bağlıdır.
6. Kullanmadan önce oda sıcaklığında (20-26°C) ulaşması için numuneleri bekletin.
7. Yoğun hemoliz veya lipemi veya bilirubin yüksek düzeyli numunelerin kullanılmasına izin verilmez.
【Test prosedürü】
Dikkat: Lütfen dikkatle ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihazının (SSJ-2) kullanım kılavuzununu ve testin ürün eklerini okuyun.
1. Numuneler kullanıma başlamadan önce oda sıcaklığına getirilir.
2. ReLIA™ cihazına (SSJ-2) bağlı bilgisayarı açın, sonra cihazı açın ve kullanım kılavuzunda açıklanan ReLIA ™ yazılımını başlatın.
3. ReLIA™ CK-MB test kasetlerini folyo paketlerinden çıkarın. Kaset tepsisini çıkarmak için testi çalıştırmak istiyorsanız bilgisayar ekranında modül simgesini tıklayın (veya modülün düğmesine basın). Sonra, tepsi içine kaseti yerleştirin.
(Dikkat: Kullanımdan hemen önce ReLIA ™ CK-MB test kasetleri koruyucu folyo paketinde kapalı tutun. Kasetler açıldığında 1 saat içinde kullanılmalıdır. Eğer sıcaklık 30°C den yüksekse ya da yüksek nem koşulları altında ise bir kez folyo paketi açıldığında hemen kullanılmalıdır)
4. Numune hakkındaki giriş bilgileri için yazılım istemlerini izleyin, sonra "onayla’’yı tıklayın.
(Dikkat: Test tam kansa, bilgisayar ekranında ‘’tam kan" seçeneğini seçin.)
5. Kaset tepsisi otomatik olarak dışarı açıldığında, bilgisayar port 1’e 40μL buffer-A eklemesi için operatörü uyaracaktır.
6. 40 saniye sonra, kaset tepsisi cihazdan dışarı doğru açılacak ve bilgisayar 100μL serum / plazma veya port 1’e 120μL tam kan numunesi eklemek için operatörü uyaracaktır. Sonra, Kaset tepsisi 20 dakika inkübasyon süresi için cihazın içine geri çekilir.
7. Test tamamlandığında, cihaz otomatik olarak sonucu yorumlayacak ve ekranda sonuçlar görüntülenecektir.
【Atık】
Biyo-tehlikeli maddelerinin atıkları kurumun uygulamalarına göre atılmalıdır. Tüm malzemeler güvenli ve kabul edilebilir bir şekilde ve tüm federal, eyalet ve yerel gereksinimlere uyularak atılmalıdır.
【Beklenen değer】
Tespit Aralığı: 1-50ng/mL.
418 sağlıklı bireyin yüzde 99.5’inde CK-MB konsantrasyonu 6 ng/mL ‘den düşük bulunmuştur.
【Klinik önem】
ReLIA™ CK-MB diagnostik, AMI hastalar için cut off değerini 6ng/mL olarak belirlenmiştir.
Diğer in vitro diagnostik testlerde olduğu gibi, her laboratuar hastanın CK-MB sonuçlarını diagnostik değerlendirmek için kendi referans aralığını belirlemelidir.
【Sonuçların yorumlanması】
1. ReLIA Immunoassay Diagnostik Cihaz (SSJ-2), otomotik olarak CK-MB düzeylerini hesaplar ve “ng/mL” olarak ekranda CK-MB konsantrasyonunu gösterir.
2. Test son kullanım tarihini aştığında, cihaz direk olarak ‘’Test Süresi‘’ bildirecek ve kaseti reddedecektir.
3. Kontrol bant 1 ve kontrol bant 2 sonuçları ürün özelliklerine uymadığında, cihaz
‘’Geçersiz’’ raporu verecektir.
【Prosedürün limitleri】
1. Trigliserit/kolesterol, bilirubin veya hemoglobin (hemolizden kaynaklanan)’in yüksek konsantrasyonları nitroselüloz üzerinde kolloidal altın konjugat ve numunenin kromatografisini etkileyebilir ve hatalı sonuçlara neden olabilir. Bu nedenle, ciddi lipemili (trigliseritin konsantrasyonu > 15mmol / L veya kolesterolun konsantrasyonu > 4 mg / mL) ya da yoğun hemolizli (hemoglobinin konsantrasyonu > 6g / L ) ya da ciddi sarılıklı (bilirubinin konsantrasyonu > 4 mg / ml) numunelerin test edilmesine izin vermez.
2. Antikor-antijen reaksiyonları çalıştıran immunotestlerin belli sınırlamaları vardır. Bu testin sonucunu CK-MB’in konsantrasyonunu sadece tam kan / serum / plazmada gösterir ve klinik diagnostik için tek kriter olarak kullanılmamalıdır.
【Performans özellikleri】
1. Duyarlılığı: Ürünün 3 lotu ve lot başına 20 kez çoğaltılması sonuçlarıyla hesaplanan ReLIA TM CK-MB testinin fonksiyonel duyarlılığı 1.0 ng / ml dir.
2. Özgüllüğü : CK-BB (100 ng / ml) ve CK-MM (100 ng / ml)’in çapraz-reaktivitesi test edildi ve tespit edilen CK-MB düzeyi <2.5 ng / ml di.
3. Hassasiyet: Lot hassasiyeti içinde, konsantrasyon başına 10 test.
CK-MB (ng/mL) Ortalama SD CV
6 6.08 0.40 6.58%
20 19.28 1.39 7.21%
4. Lineerlik: Bir CK-MB standartı seri olarak 50 den 1ng/mL’e dilute edildi. Her konsantrasyon üç kez test edildi. Regresyon çizgisinin korelasyon katsayısı ≥ 0.99 dur.
【Referanslar】
1. Adams, JE, Schechtman, KB, Landt Y, et al., Comparable detection of acute myocardial infarction by creatine kinase MB isoenzyme and cardiac troponin I. Clin Chem; 1994;
40:1291-1295.
2. Apple, FS and Preese, LM, Creatine kinase-MB: detection of myocardial infarction and monitoring reperfusion. J Clin Immunoassay; 1994; 17: 24-29.
3. Bhayana, V, Cohoe, S, Leung, FY, et al., Diagnostic evaluation of creatine kinase-2 mass and creatine kinase-3 and -2 isoform ratios in early diagnosis of acute myocardial infarction. Clin Chem; 1993; 39: 488-495.
4. Bruns, DE Diagnosis of acute myocardial infarction when skeletal muscle damage is present: a caveat regarding use of creatine kinase isoenzymes. Clin Chem; 1989; 35: 705.
5. Gibler, WB, Lewis, LM, Erb, RE, et al., Early detection of acute myocardial infarction in
patients presenting with chest pain and nondiagnostic ECGs; serial CK-MB sampling in the emergency department. Ann Emerg Med; 1990; 19: 1359-1366.
6. Henderson, AR, Stark, JA, McQueen MJ, et al., Is determination of creatine kinase-2 after electrophoretic separation accurate? Clin Chem; 1994; 40: 177-183.
7. Kallner,A, Sylven, C, Brodin, U, et al., Early diagnosis of acute myocardial infarction; a comparison between chemical predictors. Scan J Clin Lab Invest; 1989; 49: 633-639.
8. Kiyasu, YJ, Current status of detecting CK-MB for patient management. Am Clin Prod Rev;
1985; 4:29-31.
9. Lang, H and Wuerzburg, U. Creatine kinase, an enzyme of many forms. Clin Chem; 1982;
28: 1439-1347.
10. Lee, KN, Csako, G, Bernhardt, P. and Elin RJ, Relevance of macro creatine kinase type 1 and type 2 isoenzymes to laboratory and clinical data. Clin Chem; 1994; 40:
1278-1283.
11. Lee, TH, Rouan, GW, Weisberg, MC, et al. Sensitivity of routine clinical criteria for diagnosing myocardial infarction within 24 hours of hospitalization. Ann Intern Med; 1987;
106: 181-186
12. Panteghini, M, Creatine kinase MB isoforms. J Clin Immunoassay; 1994; 17: 30-34.
13. Thompson, WG, Mahr, RG, Yohannan, WS and Pincus, MR, Use of creatine kinase MB isoenzyme for diagnosing myocardial infarction when total creatine kinase activity is high.
Clin Chem; 1988; 34: 2208-2210.
14. Vaidya, HC, Creatine kinase-MB. Clin Chem News; 1988; 14:11-12.
15. Wong, SS, Strategic utilization of cardiac markers for the diagnosis of acute myocardial infarction. Ann Clin Lab Sci; 1996; 26: 301-312
16. National committee for Clinical Laboratory standards, Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, 1998.
Merkez: ReLIA Diagnostic Systems, Inc.
Adres: 1700 Owens Street
San Francisco, CA 94158, USA Tel: 1-415-554-8170
Fax: 1-415-864-6078
Website: www.reliadiagnostics.com
ReLIA Biotechnologies (Shenzhen), Inc.
Address: 4th Floor in Building 7, Nanshui Industry Village,
5th Industrial Road, Shekou, 518067 Shenzhen, P. R. CHINA Tel: 86-755-26699789
Fax: 86-755-26810363 Website: www.reliachina.com
Wellkang Ltd t/a Wellkang Tech Consulting Address: Suite B, 29 Harley Street, LONDON W1G 9QR,
England, United Kingdom Tel: 44 -20-79934346, 88168300 Fax: 44 -20-76811874
Website: http://www.ce-marking.org/
Sembol Açıklama Üretici
Yetkili temsilci
In Vitro Diagnostik Medikal Cihaz
Lot Kodu
Yıl-Ay-Gün formatında son kullanım tarihler
Sıcaklık Sınırı
CE Mark
Katalog numarası
Kullanım sonrası potansiyel biyolojik zarar içerir
Tekrar kullanmayın
Üretim Tarihi
<n> sayısında yeterli testler içerir
