胺類藥物之新光學衍生劑 AFGIT 之開發及分割應用
目前已有多種光學分割衍生劑被用於分割混旋性胺類化合物,其中 以 GITC (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-β-D-glucopyranosylisothiocyanate) 最炳 ` 用,即利用其結構中之 isothiocyanate 與具有 amine 官能基之混旋性 化合物形成 thioureas ,這些衍生物通常可 於 HPLC 中得到很好的分離 度,並可利用最普遍的 UV 偵測器檢測
,但其缺點是本身僅有微弱的發 色團,在低濃度的檢品中,常 因其靈敏度不夠而無法偵測到。為改進此 缺點,本實驗室曾合成 一種具有螢光的光學衍生劑 CGIT [6-O-(4'-me-
thylcoumarin-7'-methoxycarbonyl)-2,3,4-tri-O-acetyl-α-D- glucopyranosisothiocyanate] ,且經實驗可與一級或二級的混旋性胺類 或胺基酸反應後 進行光學分割,其靈敏度比 GITC 衍生物強 10~36 倍。
現本研究擬合成 另一種螢光性的光學衍生劑 AFGIT [6-(9'- aminofluorenyl)-2,3,4-tri-O- acetyl- -D-glucunopyranosyl
isothiocyanate] ,即利用葡萄糖醛酸內酯 (glucuronolactone) 作起始 物,其在 50% 甲醇溶液中經 NaOH 開環形成 sodium glucuronate
,在 p-toluenesulfonic acid 催化下進行乙醯化反應後形 成 1,2,3,4- tetra-O-acetyl- -D-glucuronic acid ,然後與具螢光性的 9-
aminofluorene 接合,再與 HBr 反應生成 acetobromoglucuronic acid 衍生 物,再與 silver isothiocyanate 反應後,便可合成 AFGIT . AFGIT 可與一 級及二級混旋性胺類化合物於室溫下在氰甲烷中反應一小時生成衍生 物,而胺基酸可在 50% 的氰甲烷水溶液及三乙胺的鹼性條件下於室溫 反應一小時生成衍生物。 AFGIT 與多種混旋性的一級及二級胺類或胺 基酸反應,生成 diastereoisomeric 的 thiourea 衍生物,這些衍生物可利 用 HPLC 逆相層析管分離,用螢光偵測器檢測 ( 激發波長: 270 nm ,發 散波長: 310 nm) ,以 55~70% 的甲醇 -0.1% 磷酸水溶液可分離胺基酸,
60% 的氰甲烷 -0.1% 磷酸水溶液可分離 adrenergic β-blockers ,氰甲烷:
甲醇: 0.1% 磷酸水溶液 (40 : 20 : 40) 可分離 phenethylamines ,均可得 到 很好的分離度 (α) ,如十二種混旋胺基酸之 AFGIT 衍生物的分離度 α= 1.04~1.71 ,四種混旋 adrenergic β-blockers 之 AFGIT 衍生
物的分離度 也均在 1.1 以上,以及四種混旋 phenethylamines 之 AFGIT 衍生物,包 括國內濫用的甲基安非他命,分離度 α
在 1.05~1.15 之間,且利用 DL- alanine 分別與 AFGIT 及 GITC 反應 成衍生物後,測得 AFGIT-L-alanine 之靈敏度比 GITC 高約十八 倍。結論,本研究所開發之新光學衍生劑 AFGIT 能有效的分離 混旋性胺類藥物或胺基酸,並且增加它們的偵測 靈敏度。
Development new chiral derivatizing agent,A FGIT for amine drugs