Su Numunelerinin Alınması, Taşınması ve Laboratuvara
Gönderilmesi
Mik. Uzm. Umut BERBEROĞLU
Türkiye Halk Sağlığı Kurumu
Mikrobiyoloji Referans Laboratuvarları Daire Başkanlığı
Öğrenim hedefleri
Katılımcılar sunum sonunda;
Numune alımı ve taşınmasının önemini anlayacaklar
Numune kabul kriterleri için kullanılan referans dokümanları sıralayabilecekler
Numune alımı ve taşınmasında Mikrobiyolojik yönden analiz sonucunu olumsuz yönde etkileyecek unsurları sayabilecekler
Numune alım teknikleri hususunda temel ilkeleri sayabileceklerSenaryo 1
Çevre sağlığı teknisyeni, Umut köyü suyunun mikrobiyolojik su kalitesinin gösterilmesi için Muhtarın evinden numune almaya gider.- Toplam koliform, E.coli ve Enterokok analizleri için bir adet 100 mL’lik steril cam numune şişesine örnek alır,
- Şişeyi etiketler, serbest klorun 0.2 ppm olduğunu kayıt eder, - Soğuk zincirde 48 saatte laboratuvara ulaştırır,
Red nedeni ne(ler)dir
Ancak numuneleri laboratuvar kabul etmez!!!
Neden numune alınır?
Yasal gerekliliklere uygunluğu tespit etmek
Kirliliği tanımlamak için
Kirlilik kaynağını tespit etmek (Salgınlarda)
Değişimler Eğilimler
İnceleme (Analiz) yapmak Mikrobiyolojik
Kimyasal Fiziksel
Hangi amaç(lar)la analiz yapılır?
Analiz aşamaları?
Analiz öncesi (Pre-analitik) aşama
“su numunesinin alımından laboratuvarda analize alınmasına kadar geçen aşama”
Analiz aşaması (Analitik)
“su örneğinin laboratuvarda analize alındığı aşama”
Analiz sonrası (Post-analitik) aşama
“elde edilen sonuçların raporlandırıldığı aşama”
Analiz öncesi aşama
A n ali z
Olası hata kaynakları
Numune alımı Saklama-Taşıma Lab. kabulü
- Uygun şekilde alınmayan numune
- Numunenin uygun şekilde taşınmaması
Analiz öncesi aşamanın önemi!
Numune alımı, belli bir noktanın o andaki özelliğini doğru yansıtmalıdır
Bu nedenle, analize alınana kadar suyun özelliği değişmemelidir.
Analiz sürecinin güvenilirliğindekien zayıf
halkaanaliz öncesi aşamadır. (özellikle bizde)
Analiz öncesi aşamada yapılan hatalar, tüm analiz sürecindeki hatalarının büyük kısmını oluşturur,
Bu aşamada yapılan hatayı düzeltebilecek bir laboratuvar yoktur.Laboratuvar hatalarının sonuçları
Uygun olmayan halk sağlığı
faaliyetleri
Kaynakların boşa harcanması
Saptanamayan bulaşıcı hastalık
salgınları
HATA
Yaşanacak güven sorunu, medyatik problemler
Analiz öncesi aşama (devam)
Kötü koşullarda alınmış bir numunenin analiz edilmesi hiçbir anlam ifade etmez
Kalite gerekleri ve güvenilir sonuç için
laboratuvar, analizi olumsuz etkileyen unsurların uygunluğunu garanti altına almalıdır
Bu amaçla laboratuvar güncel Numune Kabul
Kriterlerini (NKK), ulusal/uluslar arası kurallara
göre oluşturmalıdır.
NKK uygunluğu, ilgili Referanslar
ISO 5667-1
: Numune alım programlarının oluşturulmasına ve numune alım tekniklerine ilişkin için genel rehber ISO 5667-3
: Su numunelerinin saklanması ve taşınma kuralları ISO 5667-4
: Doğal ve yapay göllerden numune alımlarına ilişkin genel rehber ISO 5667-6
: Nehir ve akarsulardan numune alımına ilişkin rehber ISO 5667-9
: Deniz sularından numune alımına ilişkin rehber ISO 5667-16
: Mikrobiyolojik analizler bakımından su numunesi alımına ilişkin rehberNKK uygunluğu, ilgili Referanslar (II)
ISO 19458
: Su kalitesi – mikrobiyolojik analizler için numune alımı
Kullanılan Standart metotlar;- TS EN ISO 9308-1: Escherichia coli ve Koliform bakterilerin araştırılması ve sayımı – Bölüm 1: Membran filtreleme yöntemi
- TS EN ISO 7899-2: Bağırsak enterokoklarının araştırılması ve sayımı Bölüm 2: Membran filtreleme yöntemi
Ulusal Mevzuatlar:Ör: Yüzme Suyu Kalitesi Yönetmeliği (76/160/AB), 2006/7/EC
Laboratuvarın istediği özellikler Ör: THSK, 2014 Fiyat Kitapçığı vb.Analizi etkileyen ana unsurlar
Numune alım noktasının seçimi (temsil özelliği)
Numuneyi alan kişi (yetkinlik, güvenilirlik)
Şişenin yapısı-içeriği
Numunenin taşınma şekli ve süresi
Numune alım noktasının seçimi
Örneklem bölgesini temsil etmeli ve her türlü değişikliğin hesaba katıldığı bir nokta olmalıdır (Aksi halde yönetsel eksiklikler oluşur).
ISO 5667-1 ve ISO 5667-2’ye uygunluk
Su değişkenlik hesaba katılmalıdır
- Yüzey, yüzey altı - dağıtım ağındaki tüm noktalar aynı değil - Tankın çıkışı ve girişinden alınan su v.b
Dezenfektanların reaksiyonlarını tamamladığı
kararlı noktalar seçilmelidir.
Numune alan kişi
Yeterli eğitim düzeyi (hijyen nosyonu, alım tekniği bilgisi)
Numune noktasını bilmeli/tanımalı,
Numunenin ne için istendiğini ve hangi parametrelere bakılacağını bilmeli,
Elleri temiz (dezenfekte edilmiş) olmalı,
Faaliyet, diğer kişiler için tehlike arz etmemelidir
Şişeler yapısı-içeriği
Kimyasal ve Mikrobiyolojik analizler için ayrı şişeler kullanılmalıdır.
Şişelerin yapısı,
- Cam, tekrar kullanılabilir
- Plastik (PP,PE,PS), tek kullanımlık
Şişeler kapak ile birlikte temiz ve steril olmalıdır,
- Hazır olarak alınan şişelerin mutlaka sterilizasyonsertifikası
- Dış kısım, poşet veya folyoya sarılı olabilir yada kullanım esnasında %70 Etanol veya % 70 isopropanol ile silinebilir
Kullanılan şişeler (devam)
Şişenin hacmi,
Tüm parametrelerin yapılması için uygun olmalı
- E.coli ve enterokoklar için 250 mL - Salmonella için 1-5 L - Parazit virüsler için 1-100 L
Kimyasal madde içeriği,
Dezenfektan nötralizasyonu için,
100 mL’lik şişeye 0.1 mL Na-Tiyosülfat
pentahidrat(18mg/mL) 5 ppm serbest kloru inaktive eder
Senaryo 2
Umut 2104 noktasından alınan su numunesi,mikrobiyolojik analiz için hem 30 dk’lık mesafedeki köyün il halk sağlığı laboratuvarına hem de araçla 10 saat
mesafedeki Ankara Halk Sağlığı Laboratuvarına
gönderiliyor. İl HSL sonuçlarına göre yüksek düzeyde kirli çıkan numune, Ankara HSL’da temiz bulunuyor.
Bunun üzerine başlatılan incelemede;- Numunenin serbest klor miktarının 0.1 ppm olduğu, - Numunelerin 500 mL steril ancak Na-tiyosülfatsız
şişelere alındığı anlaşılıyor.
Bu farklı laboratuvar
sonuçlarına ne sebep olmuş olabilir?
Numunenin taşınma şekli/süresi
Numune, güneş ışınlarından korunur
Şişelerinen kısa sürede
laboratuvara götürülmesi esastır
Numunenin alınması ve incelenmesi arasındaki saklama süresi kullanılan standarda/mevzuata uygun olmalıdır- Soğuk zincir’de ((5±3)°C) en fazla 24 saat
- Soğuk zincir’de ((5±3)°C) en fazla 12 saat (TKS vb)
Taşıma esnasında su numuneleri donmamalıdır(uygun miktarda buz aküsü)
Taşıma sırasında dökülme/sızmaNumune alımının izlenebilirliği/tutanak
Numune alma işleminintarih ve saati
Numune alan kişininkimlik bilgileri
Numune alınanyerinin/noktanın tanımlanması
(musluk, sürekli akan su v.b)
Çevrede veya su yüzeyindeki anormal değişiklikler
Alım noktasınındezenfekte
edilme biçimi (alev, alkol)
Çalışılması istenen parametreler, ilgili yönetmelik ve ekleri
Yerinde ölçümlerin sonuçlarıNumunelerin laboratuvara kabulü
Lab. numune kabul kriterlerine sahip olmalıdır
* Alan personel bilgileri
* Taşıma şekli-süre,
sıcaklık
* Numune miktarı
* şişenin şekli ve dış görünümü * şişe etiketi ile tutanak ile uyum * Çalışılması istenen parametreler
Numune alım teknikleri
Yüzme sularından numune alımı (kıyıdan ve bot ile)
Musluktan numune alımı (rutin ve salgın incelemesi)
Ambalajlı sulardan numune alımı
Yüzme sularından numune alımı
Gerekli tüm malzemeler hazırlanır (tutanak, kalem, şişe, dezenfektan, taşıma kabı, buz aküsü, emici kağıt vb)
Eller yıkanır/dezenfekte edilir
Numune şişeleri etiketlenir, kod numarası ve/veya isim
Numune alım tutanağı doldurulurTarih, saat, numune alan kişinin kimlik bilgileri, şişe sayısı, numune alım yeri
ve noktası, gözlemler, ölçüm sonuçları ve referansları v.b
Yüzücülere mümkün olan en yakın yerden ve yüzücülere tehlike oluşturmadan işlemler yapılmalıdırYüzme sularından numune alımı
(Denize girerek)
1 m derinliğe ulaşılır, aksi halde bu not edilir
Yüzeyin 30 cm altından numune alınır - Şişe suya daldırılır- Şişeler 1/10’luk boşluk bırakılır doldurulur - Tercihen kapak aynı derinlikte kapatılır
Eller hiçbir zaman kapak ve şişenin iç kısmına temas etmemelidir
Şişeler kurulanır ve taşıma kabına konurYüzme suyundan numune alımı
(Kayık/Bot ile numune alımı)
Tekne sınır çizgisinin arkasında ve akıntı ve rüzgara karşı konumlandırılır, motor durdurulur
Numune alım noktaları şamandıralarda işaretlenebilir.
Numune alımını, teknenin ön bölümünden ya da yanlardan yapılır (El veya numune alma aparatı ile)
1/10 boşluk bırakılır ve elle iç kısımlara değmeden kapak kapatılır.
Şişeler kurulanır ve taşıma kabına konurMusluktan numune alımı
Eller yıkanır/dezenfekte edilir
Numune şişeleri etiketlenir, kod numarası ve/veya isim
Numune alım tutanağı doldurulur Filtre ve musluk ağızlığı gibi aparatlar çıkarılır
Musluk ağzı dezenfekte edilir, alkol veya alev
Çeşme açılır, ~30 sn akıtılır, kapatılmaz
Şişeyi 1/10 boşluk kalacak şekilde doldur
Dikkatlice şişenin kapağı kapatılırMusluk ağzı dezenfekte edilir Musluk ~30 sn açık tutulur Alev yanında kapak açılır Musluk ağzı dezenfekte edilir
Salgın durumlarında musluktan numune alımı
Eller yıkanır/dezenfekte edilir
Numune şişeleri etiketlenir, kod numarası ve/veya isim
Numune alım tutanağı doldurulur
Filtre ve musluk ağızlığı gibiaparatlar çıkarılmaz
Musluk ağzıdezenfekte edilmez
, alkol veya alev
Çeşme açılır,~30 sn akıtılmaz
, hemen numune alınır. Şişeyi 1/10 boşluk kalacak şekilde doldur
Dikkatlice şişenin kapağı kapatılır
Ambalajlı sulardan numune alımı
Ambalajlı bir ürün son kullanma tarihine kadar ilk üretildiği andaki kalitesini belirlenen kurallar
çerçevesinde (mevzuat, standart vb) korumak durumundadır
(Pastörize Süt, Peynir, Su vb)
Ambalajlı sulardan numune alımı II
Ambalajlamayı takiben (Ruhsat, denetim izlemesi vb) veya piyasa denetimi için numune alımı- Genel numune alma-taşıma kurallarına uyulur (Gerekli fiziki kontrol, etiket kontrolü, kapak kontrolü vb)
-
Soğuk zincirde 12 saat (TKS için)
- Çalışılacak parametrelere göre su miktarı belirlenir (genellikle 2 L)
- İlgili tutanak doldurulur