Boyalar
Mikroteknikte kullanılan boyalar üç gruba ayrılır.
1. Nötr boyalar 2. Asidik boyalar 3. Bazik boyalar
Nötr boyalar iyonik olmayan boyalardır.
Bunlar suda çözünen renkli organik bileşiklerdir.
Boyalar
Asidik boyalarda boya suda çözündüğü zaman, boyanın asıl renkli kısmı, molekülün anyon kısmıdır.
Diğer deyimle (—) yüklü köküdür. Kısaca renkli organik bir asidin, asit kökü, renkli kısmıdır.
Onun için asidik boyalara sadece anyonik boyalar da denir.
Boyalar
Bazik boyalarda ise, boya suda çözündüğü zaman boyanın asıl rengini organik baz kökü, (+) teşkil eder.
Bu çeşit boyalara kısaca katvonik boyalar da denir.
Boyalar
İşte, nötr, asidik ve bazik bu üç grup boyanın hücreleri teşkil eden çeşitli kısımların değişik derecelerde
kendilerine bağlaması, boyanmış kesitlerin bazı kısımlarının diğer kısımlardan ayrıntılı görünmesine, böylece daha iyi fark edilmelerine yardım eder ki, boyama amacı da budur.
Boyalar
Bazı araştırıcılar boyaları, dokuyu boyamasının sonucuna göre ikiye ayırırlar:
• 1. Hücrenin belli kısımlarını boyayanlar (Progressiv Boyalar):
• Az yoğun çözeltiler kullanılır. Doku veya hücre bu tip boyalarda uzun zaman kalsa bile, boya sadece belli bölgeleri boyar.
• 2. Hücrenin bir çok kısımlarını boyayanlar (Regressiv Boyalar):
• Doku veya hücrenin birçok bölgelerini boyar.
Önemli Boyalar
Bu boya Hematoxylin camperchianum L. ağacının iç kısımlarındaki odundan ekstre edilerek, renksiz
kristaller halinde elde edilir.
Çok iyi bir hücre boyasıdır. Fakat önce okside edilmiş olması gerekir. Bu amaçla hazırlanmış çözelti haftalarca kendi haline bırakılarak, uzun zamanda olgunlaşması yani okside olması beklenir.
Okside olmuş Hematoksiline Hematein de denir ve rengi koyu kırmızı veya kahverengi olur.
Hematoxylin (Hematoksilen)
Boyalar
• Hematoksilen ile boyamadan önce protein ile
boyanın birbirini iyi tutması için kesit bazı metal tuzları çözeltisinden birisine batırılır ki, bu işi gören tuzlara boyacılıkta Mordan denir.
• Mikroteknikte kullanılan mordanlar genellikle sülfat tuzları ve bunların şaplarıdır.
• Potasyum şapı
• Amonyum şapı
• Demir şapı
• Krom şapı
Boyalar
• Hematoksilin'in araştırıcılar tarafından önerilen çeşitli karışımları vardır. Bunlar genel olarak iki gruba
ayrılabilir.
• 1. Mordanı da aynı Hematoksilin çözeltisi içerisine karıştırılmış olanlar. Bununla boyanacak kesitler, doğrudan doğruya boya içine alınır.
• (Ehrlich Hematoksilini)
• 2. Mordanı ve Hematoksilini ayrı ayrı olan karışımlar.
Bunlarda boyanacak kesitler, önce mordan içine alınır, sonra buradan çıkarılıp Hematoksilin ile boyanır.
• (Heidenhain Hematoksilin)