Türk ye'dek Yaban ve Kültüre Alınmış Ganoderma
luc dum'un Sulu Ekstraktlarının In V tro Bazı Enz m
İnh b tör Özell kler n n Karşılaştırılması
1 2 1* 1
Haluk ÖZPARLAK , S nan ALKAN , Gökhan ZENGİN , Abdurrahman AKTÜMSEK
1
Selçuk Ün vers tes , Fen Fakültes , B yoloj Bölümü, Konya, Türk ye
2
Selçuk Ün vers tes , Mantarcılık Uygulama ve Araştırma Merkez Müdürlüğü, Konya, Türk ye
Öz: Der hastalıkları, Alzhe mer ve d yabet de çeren küresel sağlık sorunlarının
tedav s nde en çok kabul gören stratej lerden b r s anahtar enz m nh b syonu teor s d r. Bu sebeple bu çalışmada Türk ye'dek yaban ve kültüre alınmış Ganoderma luc dum (Curt s) P. Karst'ın sulu ekstraktlarının kol nesteraz, t roz naz, α-am laz ve α-glukoz daza karşı enz m nh b tör potans yeller araştırılmıştır. In v tro enz m nh b tör potans yeller b r m kroplate okuyucuyla ölçülmüş ve ekstraktların bu enz mler üzer nde etk l olduğu bulunmuştur. Akt v teler standart eşdeğerler olarak değerlend r lm şt r. Genel olarak yaban G. luc dum, kültür örneğ ne kıyasla daha fazla enz m nh b tör potans yele sah pt r. Elde ed len sonuçlar
G. luc dum'un, öneml sağlık sorunlarının tedav s ç n doğal enz m nh b törler elde etmede
öneml b r kaynak olab leceğ n göstermekted r.
Anahtar Kel meler: Enz m , nh b syon, Ganoderma luc dum, Türk ye
In V tro Some Enzyme Inh b tory Propert es of Aqueous Extract of
W ld-Grown and Cultivated Ganoderma lucidum from Turkey: A
Comparative Study
Abstract: The key enzyme inhibitory theory is one of the most accepted strategies in
the treatment of global health problems including skin diseases, Alzheimer's disease and Diabetes mellitus. For this reason, the enzyme inhibitory potentials of water extracts of wild-grown and cultivated Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst from Turkey were investigated against cholinesterase, tyrosinase, α-amylase and α-glucosidase. The in vitro enzyme inhibitory potentials were measured with a microplate reader. The extracts were found to be effective on these enzymes. The activities were evaluated as standard equivalents. Generally, wild grown samples have more enzyme inhibitory potential as compared to cultivated samples. The results suggested that G. lucidum could be considered as a source of natural enzyme inhibitors for the treatment of major health problems.
Keywords: Enzyme, Inhibition, Ganoderma lucidum, Turkey G r ş
Yüz yıllardır b rçok meden yet tarafından özell kle de Ç n, Kore, Japonya g b Uzakdoğu ülkeler nde nsanlar tarafından yoğun b r şek lde kullanılan Ganoderma luc dum (Curt s) P. Karst, Re sh , L ng Zh ve Ölümsüzlük Mantarı g b s mlerle b l nmekted r. G. luc dum'un
uykusuz-luk, hals zl k, ştahsızlık, baş dönmes , s n r hastalıkları, kron k nefr t, eklem lt habı, gastr k ülser, kron k karac ğer lt habı, yüksek tans yon, mantar zeh rlenmeler , astım, yaşlı b reylerde bronş yal öksürük ve kolesterol sentez nh b s-yonu g b b rçok hastalığa y geld ğ b ld r l-mekted r.
Bunların yanı sıra G. luc dum karac ğer yetmezl ğ , çeş tl kanser türler , HIV, herpet k enfeks yonlar g b rahatsızlıkların tedav s nde de kullanılmakta ve mmunoloj k ve ant tümör özell kler nden dolayı her geçen gün b l m dünyasının daha çok lg s n çekmekte, çeş tl a r a ş t ı r m a l a r a t a b t u t u l m a k t a v e l a ç gel şt rmeye katkı sağlamaktadır. Japonya'da 2005 yılından t baren kanser ve d ğer b rçok h a s t a l ı ğ ı n t e d a v s n d e G . l u c d u m ' u n kullanımına Sağlık Bakanlığı tarafından resm olarak z n ver lm şt r (Hobbs, 1995; Borchers ve ark, 1999; Wasser ve We s, 1999; K m ve ark., 2004; Berger ve ark., 2004; Hu e ve D n, 2004).
Günümüz dünyasında pek çok sağlık sorununun tedav s nde en çok kabul gören stratej lerden b r s anahtar enz m nh b syonu teor s d r. Bu teor anahtar enz mler nh be ederek hastalık semptomlarının haf flet lmes temel ne dayanmaktadır. Bu sebeple çok sayıda enz m nh b törü olan sentet k laç üret lmekted r. Bununla b rl kte bu laçların etk nl kler n n sınırlı olması ve yan etk ler olması g b dezavantajları doğal enz m nh b törler n n önem n artırmakta-dır. Aset lkol nesteraz (AChE) ve büt r lkol n-esteraz (BChE) Alzhe mer hastalığı, t roz naz der hastalıkları, α-am laz ve α-glukoz daz se d abet hastalıklarıyla l şk l enz mlerd r ve bu hastalıkların tedav s nde bu enz mler nh be eden sentet k nh b törlerden faydalanılmaktadır. Ancak bunların yer ne doğal nh b törler n bel rlenmes ne yönel k çalışmalar her geçen gün daha çok lg odağı hal ne gelmekted r (Melzer, 1998; Tocco ve ark., 2009; Tund s ve ark. 2010).
B tk ler g b mantarlar da beslenmen n yanı sıra çerd kler b leş klerle nsan sağlığı açısından oldukça büyük öneme sah pt rler. Sentet k laçların yan etk ler n n fazla oluşu, doğal laçların daha ucuz ve kolay tem n ed lmes , günümüzde sentet k laçların yer ne doğal laçlarla tedav yöntemler n yaygınlaştır-maya başlamıştır. Bu durum mantarların da önem n her geçen gün artırmaktadır. Türk ye'de doğal olarak bazı bölgelerde yet şen, son
alternat flerle nsanlara sunulmaktadır. Bu çalışmayla nsanların yoğun şek lde tüket m ne sunulan G. luc dum'un Türk ye'dek yaban ve kültüre alınmış formlarının sulu ekstraktlarının, özell kle Alzhe mer, der hastalıkları ve d abetle l şk l olarak bazı enz m (kol nesteraz, t roz naz, α-am laz ve α-glukoz daz) nh b tör özell kler n n bel rlenmes ve karşılaştırılması amaçlanmıştır.
Materyal ve Metot
Mantar materyal ve ekstraktların hazırlanması
Kültüre alınmış G. luc dum örnekler kurutulmuş ve d l mlenm ş olarak t car b r şletmeden (GanoTürk-Seyhan, Adana) satın alınmıştır. Yaban G. luc dum örnekler Karabük-Yen ce (Kanyon g r ş , 41°08'16K, 032°21'51D, 456 m) lçes nden toplanmış (Şek l 1) ve teşh s ed lerek laboratuvarda özel kurutma dolapla-rında 40-45°C'de kurutulmuştur. Kuru örnekler değ rmende ayrı ayrı toz hal ne get r lm ş ve su ekstraktlarının hazırlanması ç n 10 g öğütülmüş mantar 300 ml kaynar b d st le suyla 15 dk karıştırılmıştır. Ardından örnekler l yof l ze ed lerek kullanılıncaya kadar buzdolabında +4°C'de muhafaza ed lm şt r.
Ant kol nesteraz akt v tes
Kol nesteraz nh b tör akt v te Elmann ve ark. (1961)'nın metoduna göre 96 kuyucuklu m kroplatede ölçülerek bel rlenm şt r. M kroplate kuyucuklarına 2 mg/ml konsantrasyondak 50 µl mantar ekstraktı, 125 µl DTNB [5,5-D th o-b s(2-n trobes(2-nzo k) as t], 25 µl Tr s-HCl tampos(2-nus(2-nda (pH=8.0) hazırlanmış AChE veya BChE enz m çözelt s lave ed lm şt r. Ardından karışım oda sıcaklığında 15 dak ka beklet lm ş sonra 25 µl aset lt yokol n yodür (ATCI) veya but r lt yokol n yodür (BTCI) eklenm şt r. Aynı şek lde, AChE veya BChE enz m çözelt s olmadan hazırlanmış reaks yon reakt fler ne örnek çözelt s lave ed lerek kör hazırlanmıştır. Oda sıcaklığında 10 dak ka süreyle nkübe ed ld kten sonra örnekle-r n ve köörnekle-rleörnekle-r n absoörnekle-rbanslaörnekle-rı m körnekle-roplate okuyu-cuda 405 nm'de kayded lm şt r. Körler n bansları örneklerden çıkarılarak gerçek absor-banslara ulaşılmıştır. Kol nesteraz nh b tör akt v teler g ekstraktta galantam ne eşdeğer (mgGALAE/g) olarak sunulmuştur.
Ant t roz naz akt v tes
T roz naz nh b tör akt v te L-DOPA'nın substrat olarak kullanıldığı dopachrome yöntem yle bel rlenm şt r (Orhan ve ark., 2014). M kroplate kuyucuklarına 2 mg/ml konsantras-yondak 25 µl mantar ekstraktı, 40 µl t roz naz çözelt s ve 100 µl fosfat tamponu (pH=6.8) lave ed lm şt r. Bu karışım 15 dak ka süreyle 25ºC'de beklet ld kten sonra 40 µl L-DOPA eklenm şt r. Aynı şek lde, t roz naz enz m çözelt s olmadan hazırlanmış reaks yon reakt fler ne örnek çözelt s eklenerek kör hazırlanmıştır. Örnekler n ve körler n absorbansları 10 dak ka oda sıcaklığında nkübe ed ld kten sonra m kroplate okuyucuda 492 nm'de kayded lm şt r. Körler n absorbansları örneklerden çıkarılarak gerçek absorbanslara ulaşılmıştır. T roz naz nh b tör akt v teler g ekstraktta koj k as te eşdeğer (mgKAE/g) olarak sunulmuştur.
Ant glukoz daz akt v tes
α-glukoz daz nh b tör akt v te Palan samy ve ark. (2011)'na göre bel rlenm şt r. M kroplate kuyucuklarına 2 mg/ml konsantrasyondak 50 µl mantar ekstraktı, 50 µl glutatyon, fosfat tamponunda çözünmüş 50 µl α-glukoz daz çözelt s le 50 µl PNPG (4-p-n trofen l-α-D-glukop ranoz d) lave ed lerek 10 dak ka süreyle 37ºC'de nkübe ed lm şt r. Aynı şek lde, α-glukoz daz enz m çözelt s konmadan hazırlan-mış reaks yon reakt fler ne örnek çözelt s eklenerek kör hazırlanmıştır. Reaks yon 0.2 M 50 µl sodyum karbonat laves yle tamamlan-mıştır. Örnekler n ve körler n absorbansları m kroplate okuyucuda 400 nm'de kayded lm şt r. Körler n absorbansları örneklerden çıkarılarak gerçek absorbanslara ulaşılmıştır. α-glukoz daz nh b tör akt v teler g ekstraktta akarboza eşdeğer (mmolAKAE/g) olarak sunulmuştur.
Ant am laz akt v tes
α-am laz nh b tör akt v te Caraway-Somogy yot/potasyum yodür (IKI) yöntem yle bel rlenm şt r (Zeng n ve ark., 2014). M kroplate kuyucuklarına 2 mg/ml konsantrasyondak 25 µl mantar ekstraktı ve fosfat tamponunda (pH=6.9 ve 6 mM sodyum klorür) hazırlanmış 50 µl α-am laz çözelt s eklenerek, 10 dak ka süreyle 37ºC'de nkübe ed lm şt r. Ardından bu örneklere %0.05'l k 50 µl n şasta çözelt s eklenm şt r. Aynı şek lde, α-am laz enz m çözelt s olmadan hazırlanmış reaks yon reakt fler ne örnek çözel-t s lave ed lerek kör hazırlanmış ve karışım 10 dak ka süreyle 37ºC'de nkübe ed lm şt r. 1 M 25 µl HCI eklenerek reaks yon durdurulmuş ve ardından 100 µl yot-potasyum yodür çözelt s lave ed lm şt r. Örnekler n ve körler n absor-bansları m kroplate okuyucuda 630 nm'de kayded lm şt r. Körler n absorbansları örnekler-den çıkarılarak gerçek absorbanslara ulaşılmış-tır. α-am laz nh b tör akt v teler g ekstraktta akarboza eşdeğer (mmolAKAE/g) olarak sunulmuştur.
Bulgular ve Tartışma
Günümüzde küresel boyutlara ulaşan sağlık problemler ve bunların tedav ler ne yönel k yaklaşımlar b l m dünyasının en lg l çek c konularındandır. Alzhe mer, d yabet ve der hastalıklarının toplumdak görülme sıklıklarının 21. Yüzyılın başında artış göster-mes bu hastalıkların tedav ler ç n yen stratej ler gerekl hale get rm şt r. Bu stratej ler arasında en çok kabul gören anahtar enz mler n nh b syonudur. Bu teor bel rt len hastalıkların p a t o l o j l e r n d e r o l o y n a y a n e n z m l e r n (Alzhe mer ç n AChE, BChE; D abet ç n α-am laz ve α-glukoz daz; der hastalıkları ç n t roz naz) nh be ed lmes ve hastalıkların gözlenen patoloj ler nde azalmayı kapsar. Alzhe mer hastalığının f zyoloj s ne bakıldığında nöron ve akson kaybı le aset lkol n sev yes nde azalma söz konusudur. Bundan dolayı aset lkol n sev yes n artırmak Alzhem er tedav s nde öneml d r. Aset lkol n düzey n arttırmanın b r d ğer yolu se aset lkol n yıkan kol nesteraz enz mler n n baskılanmasıdır. AChE ve BChE farklı genlerle kodlanan ancak özell kle substrat seç c l kler ve bazı katal t k mekan zmalarındak farklılıkları sebeb yle b rb r nden ayrılan yaygın dağılımlı enz mlerd r (Howes ve ark., 2003). Yapılan araştırmalarda, kol nesteraz nh b s-yonuna bağlı aset lkol n düzey ndek artışların, Alzhe mer hastalığının erken dönemler ndek b l nç kayıplarını y leşt reb leceğ bel rt lmekted r ve bu amaçla Alzhe mer tedav s nde galatam n, f zost gm n g b sentet k kol nesteraz nh b törler gel şt r lm şt r. Yapılan araştırmalarda bu sentet k nh b törler n çeş tl toks k etk ler olması ve kısa ömürlü olmaları kl n k anlamda kullanımlarının sınırlandırılmalarına yol açmıştır (Melzer, 1998).
T roz naz bakır çeren b r enz m olup melan n sentez n n en öneml enz m d r. Bu şlev yle t roz naz der ve saç reng n n oluşmasın-da görev alır. T roz naz enz m ayrıca fenol k b leş kler n oks dasyonunu katal zleyerek meyve ve sebzelerde koyulaşmadan sorumludur. T roz naz nh b syonu der hastalıklarında
s t r a t e j d r. Ay r ı c a s a d e c e d e r m a t o l o j k bozuklukların tedav s nde değ l esmerleşmen n engellenmes yle gıda renkler n n korunmasında kullanılmaktadır. H drok non, arbut n ve koj k as t b l nen t roz naz nh b törler d r. Bu nh b törler beyazlatıcı ajanlar olarak kozmet k alanında kullanılmaktadır. Ancak bu b leş kler n yan etk ler göz ardı ed lememekted r (Cooksey ve ark., 1997; Br gant ve ark., 2003; K m ve Uyama, 2005; Solano ve ark. 2006).
α-am laz ve α-glukoz daz enz mler karboh drat s nd r m nde görev alan anahtar enz mlerd r. N şasta, dekstr n ve maltoz α-am laz tarafından h drol ze ed l r. α-glukoz daz
se nce barsakda d sakkar tler ve ol gosak-kar tler glukoz monomerler ne h drol ze eder. Bu sebeple α-am laz ve α-glukoz daz enz mler n n nh b syonu artan kan glukoz sev yes n n azaltılmasında öneml b r stratej d r. Akarboz ve m gl tol g b glukoz sev yes n düşüren nh b tör laçların yer ne doğal nh b törler n önem dünya sağlık örgütü (WHO) tarafından yapılan öner den sonra daha da artmaktadır (Laube, 2002; S ngh ve ark., 2010).
Bu bağlamda bahsed len enz mler n nh b syonlarına yönel k nh b törler n gel şt r l-mes büyük önem arz etmekted r. Mantarların bu noktada doğal enz m nh b törler n n b r kaynağı o l a b l e c e ğ ç e ş t l ç a l ı ş m a l a r d a o r t a y a konulmuştur (Şek l 2) (Afr n ve ark., 2016; Ghe b ve ark., 2016).
Çalışmamızda G. luc dum'un kültür ve yaban örnekler n n su ekstraklarının enz m nh b tör özell kler spektrofotometr k yöntemler kullanılarak bel rlenm ş ve sonuçlar Tablo 1'de sunulmuştur. Sonuçlara genel olarak bakıl-dığında yaban toplanan G. luc dum ekstraktının kültür ortamından elde ed len G. luc dum'a kıyasla daha güçlü nh b tör özell klere sah p olduğu görülmekted r. Enz m nh b tör etk nl ğ AChE ve α-am lazda her k G. luc dum ekstraktı ç n b rb rler ne oldukça yakın ken, BChE ve t roz naz üzer ne olan nh b tör etk ler arasında öneml farklılıklar gözlenm şt r.
Parametreler Kültür Form Yaban Form Aset lkol nesteraz nh b syonu (mgGALAE/g ekstrakt) 0.92±0.01* 1.02±0.01
But r lkol nesteraz nh b syonu (mgGALAE/g ekstrakt) 0.30±0.04 1.29±0.37
T roz naz nh b syonu (mgKAE/g ekstrakt) 0.59±0.01 9.04±0.01
α-am laz nh b syonu (mmolACAE/g ekstrakt) 0.14±0.01 0.18±0.01
α-glukoz daz nh b syonu (mmolACAE/g ekstrakt) 0.60±0.04 1.11±0.01
Tablo 1. G. luc dum'un Türk ye'dek yaban ve kültüre alınmış formlarının sulu ekstraktlarının enz m
nh b tör özell kler
*Üç paralel ölçümün ortalaması±standart sapma. GALAE: Galantam n eş değer ; KAE: Koj k as t eşdeğer ; ACAE: Akarboz eş değer
Yeni nesil ilaçların geliştirilmesi için doğal kaynaklar
Zeng n ve ark. (2015) Ganoderma
applanatum ve Ganoderma res naceum
ekstraktlarının b yoloj k ve k myasal özell kler n araştırdıkları çalışmalarında enz m nh b tör özell kler rapor etm şlerd r. Çalışmalarında genel olarak metanol ekstraktı su ekstraktlarına kıyasla daha yüksek etk nl k gösterm şt r. Su ekstraktlarına bakıldığında G. applanatum'un AChE, BChE ve α-glukoz daz üzer ne nh b tör etk nl ğ sırasıyla şu şek lded r: 1.58 mgGALAE/g ekstrakt, 0.70 mgGALAE/g ekstrakt ve 0.53 mmolACAE/g ekstrakt. G. res naceum'un sulu ekstraktlarının AChE, BChE ve α-glukoz daz üzer ne nh b tör etk nl ğ sırası se şu şek lde tesp t ed lm şt r: 0.62 mgGALAE/g ekstrakt, 1.35 mgGALAE/g ekstrakt ve 0.78 mmolACAE/g ekstrakt. Bununla b rl kte t roz naz ve α-am laz ü z e r n e h e r h a n g b r n h b t ö r e t k gözlemem şlerd r. Çalışmamızda se hem y a b a n h e m d e k ü l t ü r G . l u c d u m s u ekstraktlarının çalışılan tüm enz mlere karşı
nh b tör akt v te serg led ğ tesp t ed lm şt r. Y ne çeş tl çalışmalarda G. luc dum'dan elde ed len akt f b leşenler n öneml derecede nh b tör özell kler serg led kler rapor ed lm şt r. Bu çalışmaların büyük çoğunluğu kol nesteraz ve nöroprotekt f etk üzer ne yoğunlaşmıştır.
Örneğ n Lee ver ark. (2011) G. luc dum'dan kol nesteraz nh b tör etk ler oldukça yüksek olan tr terpeno dler zole etm şlerd r. Y ne yapılan çeş tl çalışmalarda G. luc dum'un α-am laz ve α-glukoz daz enz mler üzer ne güçlü akt v teler serg led kler rapor ed lm şt r (K m ve Nho, 2004; Santhoshkumar ve Nagarajan, 2014). Ayrıca ülkem zde halk arasında G.
luc dum'un kapsül, çay ve kahve g b ürünler n n
tüket m n n özell kle d yabet hastalarına y geld ğ fade ed lmekted r. Bu noktadan hareketle, G. luc dum'un enz m nh b tör potans yel açısından oldukça öneml b r konumda olduğu söyleneb l r. Ayrıca ek olarak b rçok mantarın enz mler n doğal b r kaynağı olarak kullanılab leceğ rapor ed lm ş ve bu durum mantarların tıbb açıdan potans yeller n ortaya koymuştur.
Çalışmamızın sonuçlarına göre G.
luc dum, doğal enz m nh b törler n kaynağı
olarak yen laçların d zaynında oldukça öneml b r potans yele sah pt r. Bununla b rl kte yapılacak yen çalışmalarla ülkem zdek yaban ve kültür G. luc dum'un akt f b leşenler n n zolasyonu ve bunların olası toks k özell kler n n araştırılması gerekmekted r.
Kaynaklar
Afr n S., Rak b M.A., K m B.H., K m, J.O., Ha Y.L, Er taden ne from ed ble mushrooms nh b ts act v ty of
ang otens n convert ng enzyme n v tro. Journal of Agr cultural and Food Chem stry, 64: 2263-2268
(2016).
Berger A., Re n D., Kratky E., Monnard I., Hajjaj H., Me r m I., P guet-Welsch C., Hauser J., Mace K., N ederberger P., Cholesterol-lower ng propert es of Ganoderma luc dum n v tro, ex v vo, and n
hamsters and m n p gs, L p ds n Health and D sease, 3: 1-12 (2004).
Borchers A.T., Stern J.S., Hackman R.M., Keen C.L., Gershw n M.E., Mushrooms, tumors and mmun ty, Proceed ngs of The Soc ety for Exper mental B ology and Med c ne, 221: 281-293 (1999).
Br gant S., Camera E., P cardo M., Chem cal and nstrumental approaches to treat hyperp gmentat on, P gment Cell & Melanoma Research, 16: 101-110 (2003).
Cooksey C.J., Garratt P.J., Land E.J., Pavel S., Ramsden C.A., R ley P.A., Sm t N.P., Ev dence of the
nd rect format on of the catechol c ntermed ate substrate respons ble for the autoact vat on k net cs of tyros nase, The Journal of B olog cal Chem stry, 272: 26226-26235 (1997).
Ellman G.L., Courtney, K.D., Andres, V., Featherstone, R.M., A new and rap d color metr c determ nat on of
Ghe b N., Zavareh S.H., Behbahan G.R., Haghbeen K., S rat -sabet M., Ilghar D., Cheg n K.G.,
Comprehens ve k net c and structural stud es of d fferent flavono ds nh b t ng d phenolase act v ty of mushroom tyros nase, Appl ed B ochem stry and M crob ology, 52: 304-310 (2016).
Hobbs C., Med c nal Mushrooms: An Explorat on of Trad t on, Heal ng and Culture, Botan ca Press, Santa Cruz, CA. (1995).
Howes M.J.R., Houghton P.J., Perry N.S.L., Plants w th trad t onal uses and act v t es, relevant to the
management of Alzhe mer's d sease and other cogn t ve d sorders, Phytotheraphy Research, 17:
1-18 (2003).
Hu e W.C., D n X., Chromatograph c and electrophoret c methods for L nghz pharmacolog cally act ve
components, Journal of Chromatography B, 812: 241-257 (2004).
K m H.W., Sh m M.J., K m B.K., Ganoderma luc dum (Curt.:Fr.) P. KARST. (Aphyllophoromycet deae)
nh b ts prol ferat on of human per pheral blood lymphocytes by block ng nterleuk n–2 secret ons,
Internat onal Journal of Med c nal Mushrooms, 2: 313-321 (2004).
Kim Y.J., Uyama H., Tyrosinase inhibitors from natural and synthetic sources: structure, inhibition
mechanism and perspective for the future, Cellular and Molecular Life Sciences, 62(15): 1707-23
(2005).
K m S.D., Nho H.J., Isolat on and character zat on of α-Glucos dase nh b tor from the fungus Ganoderma
luc dum, Journal of M crob ology, 42: 223-227 (2004).
Laube H., Acarbose: An update of ts therapeut c use n d abetes treatment, Cl n cal Drug Invest gat on, 22: 141-156 (2002).
Lee I., Ahn B., Cho J., Hattor M., M n B., Bae K., Select ve chol nesterase nh b t on by lanostane
tr terpenes from fru t ng bod es of Ganoderma luc dum, B oorgan c & Med c nal Chem stry Letters,
21: 6603-6607 (2011).
Melzer D., New drug treatment for alzhe mer's d seases: lessons for healthcare pol cy, Br t sh Med cal Journal, 316: 762-764 (1998).
Orhan D.D., Senol F.S., Hosbas S., Orhan I.E., Assessment of chol nesterase and tyros nase nh b tory and
ant ox dant propert es of V scum album L. samples collected from d fferent host plants and ts two pr nc pal substances, Industr al Crops and Products, 62: 341-349 (2014).
Palan samy U.D., L ng L.T., Manaharan T., Appleton D., Rap d solat on of geran n from Nephel um
lappaceum r nd waste and ts ant -hyperglycem c act v ty, Food Chem stry, 127: 21-27 (2011).
Santhoshkumar S., Nagarajan N., In v tro ant ox dant and ant d abet c act v ty of methanol extract of w ld
mushroom Ganoderma luc dum (Curt s) P. Karst, Internat onal Journal of B osc ences and
Nanosc ences, 1: 77-85 (2014).
S ngh J., Darto s, A., Kaur, L., Starch d gest b l ty n food matr x: A rev ew, Trends n Food Sc ence & Technology, 21: 168-180 (2010).
Solano F., Br gant S., P cardo M., Ghanem G., Hypop gment ng agents: an updated rev ew on b olog cal,
chem cal and cl n cal aspects, P gment Cell & Melanoma Research, 19: 550-571 (2006).
Tocco G., Fa s A., Mel G., Begala M., Podda G., Fadda M B., Corda M., Attanas O.A., F l ppone P., Berretta S., Peg- mmob l zat on of cardol and soluble polymer-supported synthes s of some cardol–coumar n
der vat ves: prel m nary evaluat on of the r nh b tory act v ty on mushroom tyros nase, B oorgan c &
Med c nal Chem stry Letters, 19: 36-39 (2009).
Tund s R., Lo zzo M.R., Men ch n F., Natural products as alpha-amylase and alpha-glucos dase nh b tors
and the r hypoglycaem c potent al n the treatment of d abetes: An update, M n -Rev ews n Med c nal
Wasser S.P., We s A.L., Therapeut c effects of substances occurr ng n h gher bas d omycetes
mushrooms: a modern perspect ve, Cr t cal Rev ews n Immunology, 19: 65-96 (1999).
Zeng n G., Sar kurkcu C., Aktumsek A., Ceylan R., S der t s Galat ca Bornm.: A source of mult funct onal
agents for the management of ox dat ve damage, Alzhe mer's and d abetes mell tus, Journal of
Funct onal Foods, 11: 538-547 (2014).
Zeng n G., Sar kurkcu C., Gunes E., Uysal A., Ceylan R., Uysal S., Güngor H., Aktumsek A., Two
Ganoderma spec es: prof l ng of phenol c compounds by HPLC–DAD, ant ox dant, ant m crob al and nh b tory act v t es on key enzymes l nked to d abetes mell tus, Alzhe mer's d sease and sk n d sorders, Food Funct on, 6: 2794-2802 (2015).
