G‹R‹fi
Sifilis etkeni, spiroket olan Treponema pallidum subsp. pallidum’dur. T.pallidum’un kolayca kültürü yap›lamad›¤›ndan (1) ve basit laboratuvar boyalar› ile boyanamad›¤›ndan dolay› (2), sifilizin de¤iflik
safhalar›nda infeksiyon tan›s›n› koyabilmek için kul-lan›lan laboratuvar metodlar› gelifltirilmifltir. Bunlar, dört kategoride toplanabilir: (i) direkt mikroskop in-celemesi; (ii) tarama amaçl› kullan›lan nontrepone-mal testler; (iii) do¤rulama amaçl› kullan›lan trepo-nemal testler; ve (iv) günümüzde araflt›rma amaçl› kullan›lan testlerdir. Lezyon mevcut ise T. palli-dum’un direkt tan›mlanmas›nda genellikle
karanl›k-Sifilizin Serolojik Tan›s›
(*) ‹stanbul Universitesi, ‹stanbul T›p Fakültesi, Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dal›, ‹stanbul Gülseren AKTAfi(*)
ÖZET
Sifiliz tan›s›n›n do¤ru ve h›zl› konulmas›nda, kullan›lan serolojik tan› testler önemli bir yeri vard›r. ‹nfeksiyonun serolojik ta-n›s› için önce Venereal Diseases Research Laboratory (VDRL) veya Rapid Plasma Reagin (RPR) gibi non-treponemal testler kullan›l›r. E¤er sonuç pozitif ise bu Treponema pallidum Hemagglutination Assay (TPHA) veya Fluorescent Treponemal An-tibody Absorption (FTA-ABS) gibi treponemal antijen ile haz›rlanm›fl spesifik bir treponemal test ile do¤rulan›r. VDRL ve TPHA testleri birbirlerini tamamlayan testlerdir ve bu iki testin birlikte kullan›m› infeksiyonun tüm safhalar›n›n tan›mlanma-s›nda veya infeksiyonun eliminasyonunda en do¤ru sonucu sa¤lar. Bunun için Avrupa’da VDRL ve TPHA testleri yayg›n fle-kilde tarama testleri olarak birlikte kullan›lmaktad›r. FTA-ABS testi genellikle tarama testlerinde pozitif sonuç vermifl örnek-lerde do¤rulama testi olarak kullan›lmaktad›r. Maalesef, VDRL ve TPHA testleri kolayl›kla otomatize edilemezler ve FTA-ABS testi ise yo¤un emek ve zaman gerektiren bir testtir. T.pallidum a karfl› oluflmufl antikorlar›n tan›mlanmas›nda kullan›lan Enz-yme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) testleri, kolayca otomatize edilebilmeleri, objektif olarak de¤erlendirmeye olanak sa¤lamalar› gibi baz› üstünlükleri sunmaktad›r. Western blot (WB) testi, FTA-ABS testi kadar duyarl› ve daha özgüldür. Bun-dan dolay› özellikle kesin tan›ya gidilemeyen serum örneklerinde FTA-ABS testine alternatif olarak kullan›labilecek di¤er bir do¤rulama testidir.
Anahtar Kelimeler: Sifiliz, serolojik tan›, do¤rulama testi. SUMMARY
Serological Diagnosis of Syphilis
Serological testing for syphilis is an important tool in the prompt and accurate diagnosis of the disease. Usually a non-trepo-nemal screening test like the Venereal Diseases Research Laboratory (VDRL) or the Rapid Plazma Reagin (RPR) test is ini-tially done to detect antibodies produced in response to infection with Treponema pallidum. If reactive, the non-treponemal test result is confirmed by a more specific, treponemal antigen-based test like Treponema pallidum Hemagglutination Assay (TPHA) or the Fluorescent Treponemal Antibody Absorption (FTA-ABS) test. The activities of the TPHA and VDRL tests are complementary and the combined use of the two tests provides an excellent screen for the detection or exclusion of syphilis at all stages. In Europe, a screening combination comprising the VDRL test and the TPHA test are widely used. The FTA-ABS test is often used as a confirmatory test in samples showing reactivity in other assays. Unfortunately, VDRL and TPHA test combinations don’t lend themselves readily to automation, and the FTA-ABS is laborious and time-consuming. The Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) for antibody to T.pallidum has been shown to offer several advantages over the cur-rent tests that can easily be automated and eliminate the subjectivity of visual reading. Western blot (WB) is as sensitive and more specific than the FTA-ABS test which makes it a useful additional confirmatory test or an alternative to the FTA-ABS test, particularly with problem sera.
Key Words: Syphilis, serodiagnosis, confirmatory test.
‹letiflim : Gülseren AKTAfi
alan mikroskop incelemesi ve direkt fluoresan anti-kor testleri kullan›l›r. Mikroskop incelemesinde mu-ayene maddesi hemen incelenmelidir; T. pallidum, normal genital florada bulunan ve morfolojik olarak benzer olan di¤er spiroketlerden ay›rt edilmelidir. Pozitif sonuç al›nmas›, sifilisin kesin göstergesidir (3).
‹nfeksiyonun taranmas›nda en yayg›n olarak kullan›-lan serolojik testler nontreponemal ve treponemal testlerdir. Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) veya Rapid Plasma Reagin (RPR) gibi non-treponemal (reagin) testler, hasarl› konak hücrelerin-den sal›nan lipoidal materyale ve treponemalardan sal›nan kardiolipine karfl› kona¤›n oluflturdu¤u im-munoglobulin M (IgM) ve IgG antikorlar›n› gösterir (3, 4). Nontreponemal testler infeksiyonun tan›s›nda kalitatif olarak tarama amaçl› veya tedavinin takibin-de kantitatif olarak kullan›l›rlar (3, 5, 6). Kolayl›kla bulunabilir, ucuz ve çok say›da örne¤in çal›fl›lmas›n-da rahatça uygulanabilir (3). Genellikle nontrepone-mal testlerin erken dönem sifiliz tan›s›nda duyarl› ol-du¤u düflünülmesine ra¤men (7, 8, 9), geç dönem si-filizde duyars›z olmalar› ve prozon olay› ile yalanc› negatif sonuçlar›n al›nma olas›l›¤›n›n olmas› (10, 11) dezavantajlar›d›r (3, 12, 13). Prozon reaksiyonu, an-tikorun yüksek titrede ve eksik oldu¤u durumda ve-ya normal antijen-antikor ba¤lanmas›n›n engellen-mesi ile meydana gelir ve yalanc› negatif sonuca yol açar (3). Testin kantitatif yap›lmas› yalanc› negatif sonuç veren prozon olay›n› önler (14). Yalanc› pozi-tif reaksiyonlar, alt› aydan k›sa süren akut yalanc› pozitif reaksiyonlar (3, 15) ve alt› aydan uzun süren kronik reaksiyonlar olarak iki guruba ayr›l›r. VDRL ve RPR gibi kardiolipin testlerinin tarama amaçl› kullan›lmas›n›n en ciddi sak›ncas› ve bu testi de¤er-siz k›lan özelli¤i, prozon olay›n›n meydana gelmesi-dir. Serumda fazla antikor bulunmas› durumunda, aglutinasyon engellenir ve böylece yanl›fl negatif so-nuç elde edilir. Ayr›ca, e¤er hastada HIV infeksiyo-nu varsa, spesifik olmayan aglutinasyonlar meydana gelebilir (16). Akut yalanc› pozitif reaksiyonlar›n ne-deni hepatit, infeksiyoz mononükleoz, viral pnömo-ni ve di¤er viral infeksiyonlar, s›tma, afl›lanm›fl ol-mak, hamilelik ve laboratuvar hatas› veya teknik ha-tad›r (3, 17, 18). Kronik yalanc› pozitif
reaksiyonla-r›n nedeni sistemik lupus eritematosus, kad›nlarda daha s›k görülen immunoglobulin anomalileri, nar-kotik ba¤›ml›l›¤›, yafllanma, lepra ve kanserlerdir. Nontreponemal testler ile nonspesifik ve yalanc› po-zitif sonuçlar al›nmas›ndan dolay› T. pallidumu (Nic-hol suflu) antijen olarak kullanan ve buna karfl› olu-flan antikorlar›n tespit edilmesine dayal› spesifik tre-ponemal testler gelifltirilmifltir. Bu testler hastal›¤›n bafllad›¤› ilk günler d›fl›nda, hastal›¤›n di¤er tüm saf-halar›nda yüksek duyarl›k gösterirler (3, 15) ve ayn› zamanda nontreponemal test ile negatif sonucun al›nd›¤› fakat geç dönem sifilizde oldu¤u gibi klinik olarak sifiliz bulgusu olan bir durumda do¤rulama amac›yla kullan›l›rlar (3). Günümüzde kullan›lan standart treponemal testler, Microhemaglutinasyon Assay (MHA-TP) veya mikroTreponema pallidum hemaglutinasyon assay (TPHA) ve Flouresan Trepo-nemal Antikor-absorbsiyon (FTA-ABS) ile ‘FTA-ABS double staining’ testleridir ve genellikle, non-treponemal testlerle al›nan pozitif sonucu do¤rula-mak için kullan›l›r (19, 20). MHA-TP, TPHA testi-nin mikroplaklara uyarlanm›fl fleklidir (3, 21). T. pal-lidum (Nichol) suflunun ultrasonikasyonu ile elde edilen materyal ile hassaslaflt›r›lm›fl eritrositlerin an-tijen olarak kullan›ld›¤›, indirekt mikrohemagluti-nasyon yöntemine dayan›r ve e¤er hasta serumunda treponemal antikor varsa, dipte yayg›n flekilde çöken eritrositler mat (donuk) bir yüzey olufltururlar. Aglu-tine olmam›fl eritrositlerin dipte ortas›nda çok küçük boflluk olan veya olmayan keskin kenarl› dü¤me tar-z›nda çökmesi, negatif olarak de¤erlendirilir. Agluti-ne olmam›fl hücrelerin ortada küçük delikli dü¤me tarz›nda çökmesi bafllang›çta flüpheli (±) olarak de-¤erlendirilir, ve test tekrarlan›r. E¤er ayn› flekil olu-flursa, o zaman sonuç negatif olarak de¤erlendirilme-lidir. Hem test hemde kontrol çukurlar›nda agluti-nasyon oluflmas›, nonspesifik aglutiagluti-nasyonun varl›-¤›n› gösterir. Bu durumda test tekrar edilmelid›r. Ge-nel olarak sa¤l›kl› bir kiflide yalanc›-pozitif reaksi-yon nadiren görülür. Kantitatif nontreponemal test-lerin aksine, tedavi sonras›nda kantitatif MHA-TP testinin yap›lmas›n›n yarar› yoktur (3). Mikrohemag-lutinasyon tekni¤ine dayal› di¤er bir test, Treponema pallidum Partikül Aglutinasyon (TPPA) testidir. Bu-rada, patojen T. pallidum (Nichol) suflu ile
hassaslafl-t›r›lm›fl jelatin partikülleri kullan›lm›flt›r. TPHA tes-tine göre, TPPA’da daha az flüpheli (±) sonuçlar al›nd›¤› için okunmas› daha kolayd›r. TPHA testinde hassaslaflt›r›lmam›fl eritrositlerin aglutine olmas›yla meydana gelen heterofil (nonspesifik) reaksiyona rastlanmaz (3, 22, 23).
FTA-ABS testi, dolayl› fluoresan-antikor tekni¤ine dayan›r (3, 24, 25). T.pallidum subsp. pallidum (Nic-hol suflu) antijen olarak kullan›l›r. ‹fllemde hasta se-rumu sorbent çözeltisinde 1:5 oran›nda suland›r›l›r. Sorbent çözeltisi, patojen olmayan ‘Reiter türü Tre-ponema kültürlerinden elde edilen bir ekstraksiyon-dur, ve baz› hastalarda nonpatojenik treponemalara karfl› oluflmufl grup treponemal antikorlar›n› ortam-dan uzaklaflt›rmak ve böylece yalanc› (+) sonuç al›n-mas›n› engellemek için kullan›l›r. Daha sonra T. pal-lidum fixe edilmifl bir mikroskop lam› üzerine hasta serumu konur. E¤er serumda antikor varsa trepone-maya ba¤lan›r. Fluorescein isothiocyanate (FITC) iflaretli anti-human immunoglobulin ilave edilir. Bu, T. pallidum a ba¤lanm›fl hasta antikorlar› ile ba¤lan›r ve bir fluoresan mikroskop ile incelendi¤inde FITC boyal› spiroketler görülür (24). E¤er hasta serumun-da spesifik antikorlar yoksa fluoresan izlenmez. Bu durumda karanl›k alan incelemesi ile lam üzerin-de treponemalar izlenerek varl›¤›ndan emin olmak gerekir. Böylece negatif sonucun lam üzerinde tre-ponemalar›n olmad›¤›ndan de¤il, ama hasta seru-munda antikor olmad›¤›ndan dolay› oldu¤u gösteril-melidir (3). ‘FTA_ABS double- staining’ tekni¤i, standart FTA-ABS testinin bir modifikasyonudur (3,24). Bu teknikte tetramethylrhodamine isothioc-yanate ile iflaretli anti-human IgG ve z›t boya olarak FITC-iflaretli anti- T. pallidum konjuge kullan›l›r. Bu teknikte z›t boya, hasta serumunda T. pallidum anti-koru saptanmad›¤› durumlarda, treponemalar› karan-l›k-alan inceleme ile görme gere¤ini elimine etmek için kullan›l›r. Böylece spesifik antikoru ile ba¤lan-mam›fl organizmalar›n z›t boya ile boyanmas›, nega-tif sonucun hasta serumunda spesifik antikorlar›n yoklu¤undan dolay› oldu¤unun gösterilmesini sa¤-lar. Her iki FTA-ABS testinde sonuçlar: pozitif, dü-flük düzeyde pozitif (1+) veya atipik fluoresan izlen-di (3, 24, 25) olarak rapor eizlen-dilir. 1+ sonuç veren ör-nek yeniden test edilmeli, e¤er sifiliz hikayesi ve
kli-nik göstergesi yoksa sonuç flüpheli (±) olarak düflü-nülmeli ve 1-2 hafta sonra ikinci bir örnek al›narak tekrar edilmelidir. Sistemik lupus eritematosus ve di-¤er otoimmun hastal›¤› olanlarda, atipik boyanma (yuvarlak, top fleklinde fluoresan) izlendi¤i için bu-nun bildirilmeside önerilmektedir (3). FTA-ABS gi-bi subjektif olarak de¤erlendirilen gi-bir testte pozitiflik derecesinin bildirilmesi önemlidir ve testin kullan›m› üzerinde önemli bir etkiye sahiptir. fiüpheli reaksi-yonlar s›k görülür. Amerika Birleflik Devletleri’nde bunlar›n bildirilmemesi tavsiye edilirken (20, 26), bir baflka çal›flmada (27), FTA-ABS testindeki flüp-heli sonuçlar, hastan›n sifiliz hikayesine ve yap›lan di¤er testlerin sonucuna göre de¤erlendirilmifltir. FTA-ABS testlerinde pekçok hata nedeni vard›r. Çünkü birçok ay›raç içerirler her bir ay›raç di¤erine uygun olmal›d›r. Konjugeler uygun flekilde titre edil-mifl, ve kit, pozitif, düflük düzeyde pozitif, negatif ve nonspesifik boyanma kontrolleri ve sorbenti içerme-li, lamlarda antijen varl›¤›ndan emin olunmal›d›r. Ayr›ca, uygun filtreleri olan mikroskopla, uygun or-tamda çal›fl›lmal›d›r (3). FTA-ABS, infeksiyonun 3. haftas›ndan itibaren pozitifleflir. Duyarl›l›¤› kesin ol-mamakla beraber %92 ile 99 aras›nda de¤iflir (28). Primer infeksiyonda duyarl›l›k %86 ile %100 aras›n-da de¤iflirken, tüm sekonder vakalararas›n-da ve geç dönem infeksiyonlar›n %96-100 ünde reaksiyon pozitif so-nuç verir (20). Normal insanlarda yalanc›-pozitive reaksiyon %1 civar›ndad›r (3, 13). Yap›lan çal›flma-lar, yalanc› pozitif FTA-ABS reaksiyonlar›n›n, art-m›fl gamma globulin veya antinüklear antikor sevi-yelerine sahip hastalarda, otoimmun hemolitik ane-mili hastalarda, Lyme ve pek çok akut ve kronik has-tal›klarda, genital herpes simplex ve tip 1 diabetes mellitus lu hastalarda, hamilelik, yafll›l›k ve normal toplumda yalanc› pozitif sonuçlar bildirilmifltir (10, 29, 30, 31, 32, 33, 34). E¤er sadece FTA-ABS testin-de pozitif sonuç al›nm›flsa, bu dikkatle testin- de¤erlendiril-melidir. Bu durumdaki 43 hastan›n de¤erlendirilme-si sonucunda sadece 3 ü primer veya geçirilmifl de¤erlendirilme- sifi-lizli iken, 21 (%49) i Lyme hastal›¤›n›n klinik ve/ve-ya serolojik bulgular›na, 7(%16)’si genital herpes simplex infeksiyonu ve 12(%28)’si çeflitli hastal›k-lar› olan hastalard›r. Ayn› çal›flmada Lyme hastal›¤› olan kontrol hastalar›n %43 ünde FTA-ABS pozitif sonuç vermifltir (20, 34). (Ayr›ca piyasada ticari
ola-rak sat›lan çeflitli FTA-ABS kitlerinin olmas› stan-dardizasyon gere¤ini artt›rmaktad›r (20).
Son y›llarda sifilizin laboratuar tan›s›nda kullan›l-mak üzere ELISA kullanarak bir çok alternatif test gelifltirilmifltir (35, 36, 37, 38, 39, 40). Bunlar›n bir k›sm›nda spesifik T. pallidum rekombinant antijen-leri kullan›lm›flt›r (7, 8, 11, 27, 41). Nontreponemal test olan VISUWELL Reagin testi bir indirekt ELI-SA testidir. Sonuçlar spektrofotometrik olarak oku-nur. Di¤er nonspesifik testler gibi bu test ile de has-tan›n tedavisinden sonra negatif sonuç al›n›r. VDRL nin aksine, pek çok serum örne¤i ayn› anda taranabi-lir. Yap›lan çal›flmalar (42, 16), testin duyarl›¤›n› ve özgüllü¤ünü %97 olarak bildirmektedir. Bu testin dezavantajlar› ise daha çok zaman ve donan›m ge-rektirmesi ve en önemlisi, tedavinin etkisinin de¤er-lendirilmesinde hasta serumunun son titre noktas›n›n kantitatif olarak ölçülememesi olarak bildirilmifltir. Enzimimmu-noassay (EIA)’lerin en önemli avantaj-lar› büyük say›da materyal ile çal›flabilme olana¤›n› sunmas› ve otomasyona olanak vermesidir. Sonuçlar spektrofotometre ile elde edilir. Böylece objektif de-¤erlendirmeye olanak sa¤lar. Halbuki, FTA-abs, TPHA ve TPPA da test sonuçlar› subjektif olarak okunur (3, 43).
Moleküler klonlaman›n geliflmesi, spesifik T. palli-dum antijenlerinin (rekombinant antijenler) tavflan testisi art›klar› olmadan üretilmesini mümkün k›l-m›flt›r. Sifiliz infeksiyonunun serolojik tan›mlanma-s›nda, rekombinant antijenlerin önemi 1989 y›l›nda gündeme geldi¤i halde, ticari kitlerin geliflmesi ve kullan›ma girmesi yavafl olmufltur (27).
TPHA, FTA-ABS testlerinden baflka, özellikle prob-lemli serum örneklerinde do¤rulama testi olarak kul-lan›labilen di¤er bir test Western blot (WB) testidir. Bu test, FTA-ABS testi kadar duyarl›d›r ve özgüllü-¤ü daha yüksektir (44). Bu yöntemde nitroselüloz fle-rit üzerine fikse edilmifl antijen bantlardaki de¤iflim de¤erlendirilir (45). Baz› araflt›r›c›lar WB test sonuç-lar›n› de¤erlendirirken en az 4 ana antijenden (ki bunlar 15.5 (TpN 15.5), 17 (TpN 17), 44.5 (TpN 44.5), ve 47 (TpN 47) kD) 3’ünün gösterilmesi duru-munda sonucun pozitif olarak de¤erlendirilmesini düflünmektedirler (20, 45) ve 1 veya 2 antijenin
po-zitif oldu¤u durumlarda s›ras›yla negatif ve flüpheli olarak de¤erlendirilmesini önermektedirler (45). Bu-nunla birlikte bu 4 ana antijen tek tek ele al›nd›¤›nda TpN 15 antijeninin treponemal infeksiyonun en do¤-ru göstericisi oldu¤u görülmüfltür (44). Bundan dola-y› mevcut veya geçirilmifl bir treponemal infeksiyo-nun tan›s›nda en duyarl› ve özgül kriter ana antijen-lerden TpN 15 in ve di¤er iki ana antijenin positif ol-mas› olarak görülmüfltür (44). Ayr›ca yap›lan çal›fl-malarda, IgM Western blot testinin spesifik IgM var-l›¤›n›n gösterilmesinin esas oldu¤u konjenital sifiliz tan›s›nda ve reinfeksiyonun belirlenmesinde çok de-¤erli bir test oldu¤u gösterilmifltir (46, 47, 48). Bu sonuçlar testin FTA-ABS testinden daha üstün oldu-¤unu göstermektedir. Basitçe uygulanabilir olmas› ve objektif olarak de¤erlendirilebilmesi di¤er üstün-lükleridir (45). Aglutinasyon testlerinin aksine, WB sonuçlar›n›n de¤erlendirilmesi FTA-ABS testlerinin aksine kifliye göre de¤iflmez. Bu da WB testini üstün k›lan nedenlerden biridir (10).
Sistemik lupus eritematosus ve di¤er otoimmun has-tal›¤› olan hastalarda subjektif laboratuvar de¤erlen-dirmesi ve yalanc› pozitif sonuçlar s›kl›kla görülür (3, 49). Yap›lan bir çal›flmada, sistemik lupus erite-matosus ve di¤er otoimmun hastal›klar› olan hasta-larda gold standart test olarak WB kullan›lm›fl ve si-filiz tan›s›n›n do¤rulu¤u araflt›r›lm›flt›r. Bu çal›flma-n›n sonucunda, FTA-ABS nin sistemik lupus erite-matosus ve di¤er otoimmun hastal›¤› olan hastalar-da, sifiliz tan›s› için yeterli bir do¤rulama testi olma-d›¤› gösterilmifltir. Negatif FTA-ABS sonucu, sifiliz infeksiyonunu düflündürmeyebilir. Fakat pozitif bir FTA-ABS sonucu bu pozisyonda sifiliz infeksiyonu-nu do¤rulamaz. Soinfeksiyonu-nuç olarak, bu çal›flmada, WB ›n sifiliz için uygun bir do¤rulama testi oldu¤u ve sifi-lizin immunolojik cevab›n› bu tür hastalarda kesin olarak gösterebilmek için gerekli olabilece¤i vurgu-lanm›flt›r (50).
Sifiliz infeksiyonu önemli bir medikal ve sosyal problemdir (51, 52). Prevalens› ülkelere göre de¤ifl-mektedir. ‹nfeksiyonun tan›s›nda ve kontrolünde, se-rolojik testler önemlidir. Son y›llarda Avrupa’da ba-riz bir azalma görülmesine ra¤men, Eski Rusya’n›n da¤›lmas›ndan sonra oluflan yeni cumhuriyetlerde önemli oranda art›fl bildirilmektedir (53). Sifiliz
in-feksiyonunun düflük seviyelerde oldu¤u ülkelerde rastlanan son sifiliz vakalar› daha çok geç-dönem ol-gular fleklindedir. Bundan dolay› infeksiyonun her dönemini tespit edebilen tan› stratejilerinin olmas› gerekmektedir. Bunun için, Avrupa’da y›llardan be-ri, mikroflokülasyon testi olan (3), kardiolipin VDRL ve Treponema pallidum’un Nichol suflunun ekstraksiyon ürünlerinin kullan›ld›¤› TPHA gibi tre-ponemal antijen testleri ve son y›llarda EIA testleri kullan›lmaktad›r (12, 35, 54). Halbuki Amerika Bir-leflik Devletleri’nde, RPR veya VDRL tarama testi olarak önerilmektedir (40, 41). Test, geç dönem sifi-liz infeksiyonunu gösteremez (10). Baz› grup hasta-larda, tarama testi olarak treponemal antijen testleri önerilirken (55), Amerika Birleflik Devletleri’nde TPHA veya EIA testleri gibi treponemal antijen test-leri, tarama testi olarak kan bankalar›nda kullan›lma-s›na ra¤men hastane laboratuvarlar›nda kullan›lmas› önerilmemektedir (3). Bugünkü treponemal testlerin kullan›m›ndaki esas engeller, bu testlerin yabani tip (mutasyona u¤ramam›fl) T. pallidum dan elde edilen iyi tan›mlanamam›fl antijenlerinin kar›fl›m›ndan oluflmas›d›r.
KAYNAKLAR
1. Fieldsteel, AH, Cox DL, Moeckli A: Cultivation of vi-rulent Treponema pallidum in tissue culture. Infect Immun 32:908 (1981).
2. Swisher BL: Modified Steiner procedure for microwa-ve staining of spirochetes and nonfilamentous bacteria. J. Histotechnol 10:241 (1987).
3. Larsen SA, Steiner BM, Rudolph AH: Laboratory di-agnosis and interpretation of tests for syphilis. Clin Micro-biol Rev 8 (Suppl 1):1 (1995).
4. Tramont EC: Treponema pallidum (Syphilis). ‘’G L Mandell, J E Bennett, R Dolin (eds): Principles and Prac-tice of Infectious Diseases’’, p2474, Churchill Livingsto-ne, New York (2000)
5. Romanowski B, Sutherland R, Fick FH, Mooney D, Love EJ: Serologic response to treatment of infectious syphilis. Ann Intern Med 114:1005 (1991).
6. Brown ST, Zaidi A, Larsen SA, Reynold GH: Serolo-gical response to syphilis treatment. A new analysis of old data. JAMA 253:1296 (1985).
7. Bernard C, de Moerloose P, Tr emblet C, Reber G,
Didierjean L: Biological true and false serological tests for syphilis: their relationship with anticardiolipin antibo-dies. Dermatologica 180:151 (1990).
8. Young H, Penn CW: Syphilis, yaws and pinta. ‘’G R Smith, C S F Easman (eds): Topley and Wilson’s Princi-pals of Bacteriology, Virology and Immunology’’, p588, Kent: Edward Arnold (1990).
9. Fischer GS, Kleger B, Colativa MT: Reactivity of Da-de rapid plasma reagin card test with low-titre sera. J Clin Microbiol 19:435 (1984).
10. Nandwani R, Evans D T P : Are you sure it’s syphi-lis? A review of false positive serology, Int J STD AIDS 6:241 (1995).
11. Catterall RD: Systemic disease and the biological fal-se positive reaction. Br J Vener Dis 1972; 48:1-12. Reprin-ted Genitourin Med 69:469 (1993).
12. Young H: Syphilis: new diagnostic directions. Int J STD AIDS 3:391 (1992).
13. Luger AFH: Searological diagnosis of syphilis: cur-rent methods. ‘’ H Young, A McMillan (eds): Immunolo-gical Diagnosis of Sexually Transmitted Diseases’’, p249, Marcel Dekker, New York (1988).
14. A¤acfidan A: Treponema pallidum: etken, laboratuar tan›s› ve tan›da karfl›lafl›lan sorunlar. ‘’A A¤açfidan, Ö An¤ (eds): Cinsel Temasla Bulaflan Hastal›klar’’, p141, Faik Ofset Bas›m, ‹stanbul (199).
15. Jaffe HW, Musher DM: Management of the reactive syphilis serology. ‘’ KK Holmes, P A Mårdh, P F Sparling, P J Wiesner, W Cates, S M Lemon, W E Stamm (eds): Se-xually Transmitted Disease’’, p953, McGraw-Hill Infor-mation Services Co., New York (1990).
16. Pedersen NS, Orum O, Mouritsen S: Enzyme-lin-ked immunosorbent assay for detection of antibodies to venereal disease research laboratory (VDRL) antigen in syphilis. J Clin Microbiol 25:1711 (1987).
17. Rudolph AH, Larsen SA: Laboratory diagnosis of syphilis, unit 16-22A. ‘’ D J Demis (ed): Clinical Derma-tology’’, J B Lippincott Co., Philadelphia (1993). 18. Sparling PF. Diagnosis and treatment of syphilis. N Engl J Med 284:642 (1971).
19. Mugo R, Roca J, To r J, Pigem C, Rodriguez R, Ege-a J M, VlEge-ahov D, Muñoz A.: Syphilis in injecting drug users: clues for high-risk sexual behaviour in female IDUs. Int J STD AIDS 8:225 (1997).
20. Young H: Syphilis: new diagnostic directions. Int J STD AIDS 3:391 (1992).
ta-n›, Türkiye’de durum ve tedavi. 1. Ulusal Cinsel Yolla Bu-laflan Hastal›klar Sempozyumu Kitab›, s. 45 (2004). 22. Aktas G, Young H, Moyes A, Badur S: Evaluation of the Serodia Treponema pallidum Particle Agglutination, the Murex Syphilis ICE and the Enzywell TP tests for se-rodiagnosis of syphilis. Int J STD&AIDS (2004 ?) (bask›-da).
23. Pope V, Fears MB, Morrill WE, Castro A, Kikkert SE. Comparison of the Serodia Treponema pallidum par-ticle agglutination, Captia Syphilis-G, and SpiroTek Rea-gin II tests with standard test techniques for diagnosis of syphilis. J Clin Microbiol. 38:2543 (2000).
24. Hunter EF: Fluorescent treponemal antibody-absorp-tion (FTA-ABS) test. ‘’S A Larsen, E F Hunter, S J Kraus (eds): A Manual of Tests For Syphilis’’, p129, American Public Health Association, Washington, D C (2000). 25. Hunter EF: Fluorescent treponemal antibody-absorp-tion double staining (FTA-ABS DS) test. ‘’S A Larsen, E F Hunter, S J Kraus (eds): A Manual of Tests For Syphi-lis’’, p141, American Public Health Association, Was-hington, D C (2000).
26. Larsen SA, Farshy CE, Pender BJ, Adams MR, Pet-tit DE, Hambie EA: Staining intensities in the fluorescent treponemal antibody-absorption (FTA-Abs) test: associati-on with the diagnosis of syphilis. Sex Transm Dis 13:221 (1986).
27. Young H, Moyes A, de Ste Croix I, McMillan A: A new recombinant antigen latex agglutination test (Syphilis Fast) for the rapid serological diagnosis of syphilis. Int J STD AIDS 9:196 (1998).
28. Hunter E F, Russell H, Farshy CE, Sampson JS, Larsen SA: Evaluation of sera from patients with Lyme disease in the fluorescent treponemal antibody-absorption test for syphilis. Sex Transm Dis 13:232 (1986).
29. CH McKenna, AL Schroeter, Kierland RR: The flu-orescent treponemal antibody absorbed (FTA-ABS) test beading phenomenon in connective tissue diseases. Mayo Clin. Proc 48:545 (1973).
30. Wright JT, Cremer AW, Ridgway GL: False positi-ve FTA-ABS results in patients with genital herpes. Br J Vener Dis 51:329 (1975).
31. Matthews HM, Yang TK, Jenkin HM: Unique lipid composition of Treponema pallidum (Nichols virulent strain). Infect. Immun 24:713 (1979).
32. Robertson DHH, McMillan A, Young H: Clinical Practice in Sexually Transmitted Diseases. P 118, 2nd ed Churchill Livingstone Inc., Edinburgh (1989).
33. Nakashima AK, Rolfs RT, Flock ML, Kilmarx P,
G reenspan JR: Epidemiology of syphilis in the United States, 1941-1943. Sex Transm Dis 23:16 (1996). 34. Carlsson B, Hanson HS, Wasserman J, Brauner A: Evaluation of the fluorescent treponemal antibody-absorp-tion (FTA-ABS) test specificity. Acta Derm Venereol (Stockh) 71:306 (1999).
35. Lefevre J-C, Bertrand M-A, Bauriaud R: Evaluati-on of the Captia Enzyme Immunoassays for detectiEvaluati-on of Immunoglobulins G and M to Treponema pallidum in Syphilis. J Clin Microbiol 28:1704 (1990).
36. Young H, Moyes A, McMillan A, Patterson J: Enz-yme immunoassay for anti-treponemal IgG: Screening or confirmatory test? J Clin Pathol 45:37 (1992).
37. Young H, A. Moyes A, McMillan A, Patterson J: Enzyme immunoassay for anti-treponemal IgG: screening or confirmatory test? J Clin Pathol 45:37 (1992). 38. Nayar R, Campos JM: Evaluation of the DCL Syphi-lis-G enzyme immunoassay test kit for the serologic diag-nosis of syphilis. Am J Clin Pathol 99:282 (1993). 39. Reisner BS, Mann LM, Tholcken CA, Waite RT, Woods GL: Use of the Treponema pallidum-specific cap-tia syphilis IgG assay in conjunction with the rapid plasma reagin to test for syphilis. J Clin Microbiol 35:1141 (1997).
40. Schmidt BL, Edjlalipour M, Luger A: Comparative evaluation of nine different enzyme-linked immunosor-bent assays for determination of antibodies against Trepo-nema pallidum in patients with primary syphilis. J Clin Microbiol 38(Suppl 3):1279 (2000).
41. Young H, Moyes A, Seagar L, McMillan A: Novel re-combinant-antigen enzyme immunoassay for serological diagnosis of syphilis. J Clin Microbiol 36:913 (1998). 42. White, TJ, Fuller SA: Visuwell Reagin, a non-trepo-nemal enzyme-linked immunosorbent assay for the serodi-agnosis of syphilis. J Clin Microbiol 27:2300 (1989). 43. MacLean SK, Bord_n J: False-positive rapid plasma reagin tests and anti-cardiolipin antibodies, To the Editor. J Infect Dis 172(Suppl 3):905 (1995).
44. Backhouse JL, Nesteroff SI: Treponema pallidum western blot: comparison with the FTA-ABS test as a con-firmatory test for syphilis, Diagn Microbiol Infect Dis 39:9 (2001).
45. Byrne RE, Laska S, Bell M, Larson D, Phillips J, Todd J: Evaluation of a Treponema pallidum western im-munoblot assay as a confirmatory test for syphilis. J Clin Microbiol 30:115 (1992).
blotting (immunoblotting) technique in diagnosis of con-genital syphilis. J Clin Microbiol 32:629 (1994).
47. Lewis LL, Taber LH, Baughn RE: Evaluation of im-munoglobulin M western blot analysis in the diagnosis of congenital syphilis. J Clin Microbiol 28:296 (1990). 48. Schmidt BL, Luger A, Duschet P, Seifert W, Gschnait F: Spezifische IgM-teste in der syphilis-diagno-se. Hautarzt 45:685 (1994).
49. Shore RN, Faricelli JA: Borderline and reactive FTA-ABS results in lupus erythematosus. Arch Dermatol 113:37 (1977).
50. Murphy FT, George R, Kubota K, Fears M, Pope V, Howard RS, Dennis GJ: The use of Western blotting as the confirmatory test for syphilis in patients with rheuma-tic disease. J Rheumatol 26:2448 (1999).
51.Drusin LM: Syphilis makes a comeback. Int J STD AIDS 7:7 (1996).
52. Tramont EC: Syphilis in adults: from Christopher Co-lumbus to Sir Alexander Fleming to AIDS. Clin Infect Dis 21:1361 (1995).
53. Linglof T: Rapid increase of syphilis and gonorrhoea in parts of the former USSR. Sex Transm Dis 22:160 (1995).
54. World Health Organization. Treponemal infections. Technical report series 674. Genova: World Health Orga-nization (1982).
55. Reeves RR, Pinkofsky HB, Kennedy KK: Unreliab-lity of current screening tests for syphilis in chronic psychiatric patients. Am J Psychiatry 153:1487 (1996).
