Sunulantezkapsamındaeldeedilenbulgularvesonuçözetleriaşağıdaki şekildesunulmuştur.
Çalışmanın ilk kısımındaAuNP’lerinin senteziyapılmıştır.Hazırlanan nanopartiküllerin Zeta Size potansiyel analizlerine bakılmıştır. Grafikler incelendiğindeisesentezlenenAuNP’ünyüzeyyüküanalizsonuçlarınabakıldığında -2.97mV’lukvenegatifyüzeyyüklerinesahipolduklarıgörülmektedir.Nanopartikül +siRNA’larınise;1µLsiRNA+1µLAuNP’nin-8.78mV’luk,1µLsiRNA+2µL AuNP’nin-6,09mV’luk,1µLsiRNA+4µLAuNP’nin-5.23mV’luk,1µLsiRNA+
8µLAuNP’nin-4.83mV’luk,1µLsiRNA +16µLAuNP’nin-7.04mV’luk,1µL siRNA+32µLAuNP’nin-5.43mV’lukgibidahanegatifbiryüzeyesahipoldukları görülmektedir.Böyleliklezetapotansiyelanaliziilenegatifyüzeyyükünesahipolan nanopartiküllerinnegatifyükesahipolansiRNAileetkileşimegirerekbağlanmaları bağlanmagerçekleşmiştir.AgarozjelelektroforezindeyalnızcasiRNA konulan kuyucuktakiilerlemeninyalnızcaAuNPkonulankuyucuğagöre;siRNA’nınmolekül ağırlağınınAuNP’egöredahaazolmasındandolayıfazlailerlediğigözlemlenmiştir. YalnızcaAuNPvesiRNA+AuNPkompleklerininbiraradakonulduğukuyucuklar daiseAuNP’nünmolekülerağırlığınındahafazlaolmasındandolayıjeldekiyürüme hızını siRNA’ya göre azalttığı gözlemlenmiştir. Eşit miktarlarda konulan preparatların agarozjelelektroforezdekiyürümelerindebüyük orandafarklılık görülmesedehücrelerüzerindekianlamlıetkileridiğerdeneylerdegözlemlenmiştir. GerçekzamanlıhücreanalizinebakıldığındaAuNPvesiRNA +AuNP kompleksinindozlarıarttıkçahücreproliferasyongrafilerindebunabağlıazalma gözlemlenmiştir.SonuçolarakenyüksekantiproliferatiketkisiRNA + AuNP kompleksindegerçekleşmektedir.BununsebebiBcl-2genifadesininsusturulmasıdır. Antiapoptotik olan Bcl-2 proteininin baskılanması tümör hücrelerinin poliferasyonununinhibeedilmesinenedenolur.Busayedetümörünbüyümesive
bölünmesiniengellemişolmaktayız.
Yaptığımız çalışmadan elde ettiğimiz sonuçlar litaratürdeki benzer çalışmalarladaparalellikgöstermektedir.Bunlardanbazıları;
2014yılındaShehataDrazvearkadaşlarınınyaptığıçalışmamanyetik hedeflendirmeyaklaşımıhedefalınarakyapılmıştır.BuçalışmadaShehataDrazve arkadaşlarımanyetiksiRNAtaşıyıcınabağlıveyataşıyıcayaenkapsüleedilmişolan terapötikbirajanındışarıdanmanyetikalanileintravenözenjeksiyonuuygulanması iletümördokusunayönelmeyapmasısağlanmıştır.[42]
2015yılındaMykhaylykvearkadaşlarınınyapmışolduklarıçalışmada hedeflenentümörhücresindekimanyetiknanopartikülünsiRNAsalınımıüzerindeki etkileriniincelemişlerdir.HedefhücreleresiRNA salınımınınvemanyetikalan uygulandığındaverdiğicevabındahaiyiolduğugörülmüştür.[43]
Apoptotikvenekrotikindekslerikiliboyamametoduylasaptandı.Elde edilensonuçlarabakıldığındakompleksyapınınsafAuNPuygulanangrubunDLD hücrelerikontrolgrubunagöreüzerindekiapoptotikvenekrotiketkisinindahafazla olduğunugöstermiştir.siRNA,AuNP’lertarafındanhedeflendirildiğindendolayıpH yavaşlamasınahattadurmasınavebu sayedetümörhücrepoliferasyonununda inkübasyonunanedenolacaktır.BuyüzdensiRNA’nınhücreyebaşarılıbirşekilde verilmesisusturmaişlemininetkilibirşekildegerçekleşmesinisağlamaktadır.[
kolorektal kanser hücrelerinde siRNA’nın inaktivasyon gerçekleştirdiği gözlemlenmiş ve Bcl-2’nin bu hücre poliferasyonunda antiapoptotik bir mekanizmayıdüzenleyenbirgenolabileceğigözterilmiştir.[48]
Sonuçolarak;AuNPileaktarılansiRNA’ınkansertedavisindeolasıbirgen terapiyöntemolabileceğifikriuyanmaktadır.
KAYNAKLAR
[1]Reddy,L.,Odhav,B.,Bhoola,K.D.,Naturalproductsforcancerprevention:a globalperspective,Pharmacology&Therapeutics,99(1),1-13,2003.
[2]Adami,H.O.,Hunter,D.,Trichopoulos,D.,TextbookofCancerEpidemiology, OxfordUniversityPress,NewYork,1stEdition,301-334,2002.
[3]Atıcı,E.,Tıptarihindekanservelösemi,TurkOnkolojyDergisi,22(4),197-204, 2007.
[4]O.İşler,PrimerProstatKanserineBağlıKaspaz-2GenEkspresyonlarının İncelenmesi.YüksekLisansTezi.SelçukÜniversitesi,Konya2012.
[5]Anonim,Colloidalgold,Wikiwand
http://www.wikiwand.com/en/Colloidal_gold#/Toxicity_and_hazards_in_synthesis ErişimTarihi:(27Aralık2015)
[6] Erdemoğlu,M.,KolloitlerYüzeyYüküZetaPotansiyel.İnönüÜniversitesi, Malatya
https://www.inonu.edu.tr/uploads/contentfile/642/files/Colloids_Surface_Zeta%20Po tential_M_Erdemoglu.pdf(29Aralık2016)
[7]Terzioğlu,G.,Keskin,A.Ü.,YanıkkayaDemirel,G.,HücreProliferasyonu Ölçüm Yöntemlerive ÇeşitliTicariproliferasyon Kitlerinin Karşılaştırılması. YeditepeÜniversitesi.Aralık2013.
[8]Ö.GürsoyÇalan,NöronalHücreHatlarındaAMİLOİDβPeptidinOluşturduğu HasardaNörosteroidkerinRolü.UzmanlıkTezi.DokuzEylülÜniversitesi,İzmir 2010.
[9]KeN,WangX,XuX,AbassiYA.ThexCELLigencesystemforreal-timeand label-freemonitoringofcellviability.ACEABiosciencesInc.,SanDiego,CA,USA 2011.
[13]KalınBağırsakKanseri,TürkiyeHalkSağlığıKurumuKanserDaireBaşkanlığı http://kanser.gov.tr/kanser/kanser-turleri/45-kalin-bagirsak-kanseri.html
(ErişimTarihi:24Kasım2016)
[14]Levin,B.,Liebarman,D.A.,McFarland,B.,Andrews,K.S.,Brooks,D.,Bond, J.,Dash,C.,Giardiello,F.M.,Glick,S.,Johnson,D.,Johnson,C.D.,Levin,T.R., Pickhardt,P.J.,Rex,D.K.,Smith,R.A.,Thorson,A.,Winawer,S.J.,Amerikan KanserDerneğiKolorektalKanserDanışmaGrubu,USMulti-SocietyTaskForce, American College of Radiology Kolon Kanseri Komitesi. American GastroenterologicalAssociation,PublishedOnline:February13,2008
[15] Tarhan, Ö.R., Kolon ve Rektum Kanseri (Kolorektal Adenokanser) http://www.turkcerrahi.com/wp-content/uploads/kolon-ve-rektum-kanseri.pdf
(ErişimTarihi:15Kasım2016)
[16]BağırsakKolonKanseri,TürkiyeKanserleSavaşVakfı
http://www.kanservakfi.com/bagirsak-kolon-kanseri-104.html (Erişim Tarihi:29 Aralık2016)
[17]Böyük,A.,Karsinoid Tümörlerve Karsinoid Sendrom (Nöraendokrin Tümörler).
http://www.dicle.edu.tr/Contents/ec318c96-2878-426b-aaba-797b1bafa5ef.pdf (ErişimTarihi:23Aralık2016)
[18]KolorektalKanserÖnleme ve Erken Teşhis,American CancerSociety https://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&hl=tr&prev=search&ru rl=translate.google.com.tr&sl=en&u=http://www.cancer.org/cancer/colonandrectumc ancer/moreinformation/colonandrectumcancerearlydetection/colorectal-cancer-earl y-detection-risk-factors-for-crc&usg=ALkJrhhFB9CPOiO4N94d-2hs_10Ov8hSKA (ErişimTarihi:16Kasım2016)
[19]Bolaman,A.Z.,HodgkinLenfoma,Etiyoloji,Tanı,Patogenez,Klinik,Prognoz veTedavi,AdnanMenderesÜniversitesi,TürkiyeHematolojiDerneği,HematoLog 2013.
[20]Şakalar,Ç.,İzgi,K.,Canatan,H.,KanserİmmünTerapiveMonoklonal Antikorlar.105-110.Ed:Kaplan,M.,Özcan,M.,FıratÜniversitesiSağlıkBilimleri TıpDergisi,Cilt27,Sayı2.Erciyes,2013
[21]Winawer,S.J.,etal.,Riskofcolorectalcancerinthefamiliesofpatientswith adenomatouspolyps.NationalPolypStudyWorkgroup.NEnglJMed,1996.334(2): p.82-7.
[22] M.S.Pepeler,KolorektalKanserlerdeVitaminD ReseptörEkspresyonunun KolorektalKanserlerdeEvreİleİlişkisivePrognozÜzerineEtkisi.TıptaUzmanlık Tezi.AnkaraÜniversitesi,Ankara,2011
[23]Uchikado,Y.,etal.,SlugExpressionintheE-cadherinpreservedtumorsis relatedtoprognosisinpatientswithesophagealsquamouscellcarcinoma.Clin CancerRes,2005.11(3):p.1174-80.
[24]KalınBağırsakKanseri,SağlıkBakanlığıKanserDaireBaşkanlığı http://kanser.gov.tr/kanser/kanser-turleri/45-kalin-bagirsak-kanseri.html ErişimTarihi:(15Aralık2016)
[25]Anonim,KolonKanseri.AnadoluSağlıkMerkeziKanserveYaşam.
http://kanserveyasam.org/kanser-hakkinda/kanser-turleri/adan-zye-kanser SessizleştirilmesiveTedaviEdiciUygulamaları.41-44.UludağÜniversitesiTıp FakültesiDergisi,2007
[31]Bodur,E.,Demirpençe,E.,KodlanmayaRNA’larveGenSusturumu.82-89.
HacettepeTıpDergisi,2010.
[32]StefaniG,SlackFJ.Smallnon-codingRNAsinanimaldevelopment.NatRev MolCellBiol2008;9:219-30.
[33]LeeRC,Feinbaum RL,AmbrosV (1993)."TheC.elegansheterochronic gene lin-4 encodessmallRNAswithantisensecomplementaritytolin-14.". Cell 75:
843–854.
[34]Yılmaz,M.B.,Kalp Yetersizliğinde YeniBirUfuk:MikroRNA.Kalp YetersizliğiElektronikHaberBülteniSayı:2.2012.
[35]Phillips,T.,WhatIsThissiRNA and How IsItUsed? Biotech and PharmaceuticalIndustries.
https://www.thebalance.com/what-is-sirna-and-how-is-it-used-375598 (Erişim Tarihi:29Kasım2016)
[36]FerlayJ,SoerjomataramI,DikshitR,EserS,MathersC,RebeloM,ParkinDM, FormanD,BrayF.Cancerincidenceandmortalityworldwide:Sources,methodsand majorpatternsinGLOBOCAN2012.InternationalJournalofCancer2015;136: 359-386.
[37]SiegelR,MaJ,ZouZ,JemalA.Cancerstatistics,2014.CA CancerJClin 2014;64:9-29.
[38]Nurilli,F.,UçmakVural,G.VeAras,Ö.,TeranostikPlatformlardaMoleküler GörüntülemeYöntemleri.NükleerTıpSeminerleri2015;2:120-7,2015
[39]Moselhy,J.,Evaluation ofcopolymersofN-isopropylacrylamideand 2-dimethyl(aminoethyl)methacrylatein nonviraland adenoviralvectorsforgene delivery to nasopharyngealcarcinoma,InernationalJournalofNanomedicine, 2(3),461-478,2007.
[40]Chen,C.J,Wang,J.C.,Zhao,E.Y.,Gao,L.Y.,Feng,Q.,Liu,X.Y.,Zhao,Z.X., Ma,X.F.,Hou,W.J,Zhang,L.R.,Lu,W.L.,Zhang,Q.,Self-assemblycationic nanoparticlesbasedoncholesterol-graftedbioreduciblepoly(amidoamine)forsiRNA delivery,Biomaterials,34(21),5303-5316,2013.
[41]Caffrey,D.R.,Zhao,J.,Song,Z.,Schaffer,M.E.,Haney,S.A.,Subramanian, R.R.,Seymour,A.B.,Hughes,J.D.,siRNA off-targeteffectscanbereducedat concentrationsthatmatchtheirindividualpotency,PlosOne,6(7),2011.
[42]Draz,MS.,Fang,B.A.,Zhang,P.,Hu,Z.,Gu,S.,Weng,K.C.,Gray,J.W.,Chen, F.F.,Nanoparticle-mediatedsystemicdeliveryofsiRNAfortreatmentofcancersand viralinfections,Theranostics,4(9),872–892,2014.
[43]Mykhaylyk,O.,Sanchez-Antequera,Y.,Vlaskou,D.,Cerda,M.B.,Bokharaei, M.,Hammerschmid,E.,Anton,M.,Plank,C.,Magneticnanoparticleandmagnetic fieldassistedsiRNAdeliveryinvitro,MethodsMolBiol,1218,53-106,2015.
[44]Moselhy,J.,Vira,T.,Liu,F.F.,Wu,X.Y.,Characterizationofcomplexationof poly (N-isopropylacrylamide-co-2-(dimethylamino) ethyl methacrylate) thermoresponsivecationicnanogelswithsalmonsperm DNA,InternationalJournal ofNanomedicine,:4,153–164,2009.
[45]Chono,S.,Li,S.D.,Conwell,C.C.,Huang,L.,An efficientand low immunostimulatorynanoparticleformulationforsystemicsiRNA deliverytothe tumor,JournalControlRelease,131(1):64-69,2008.
[46]Gao,Y.,Liu,X.L.,Li,X.R.,ResearchprogressonsiRNA deliverywith nonviralcarriers,InternationalJournalofNanomedicine,6,1017-1025,2011.
[47]Kim,C.,Shah,B.P.,Subramaniam,P.,Lee,K.B.,Synergisticinductionof apoptosisinbraincancercellsbytargetedcodeliveryofsiRNAandanticancerdrugs, Pharmaceutics,8(5),1955–1961,2011.
[48]Jiang,M.,Milner,J.,Bcl-2constitutivelysuppressesp53-dependentapoptosisin colorectalcancercells,GenesDevelopment,17(7),832–837,2003.
[49]Anonim,KanserleDansDerneğiYayınları,2013.
https://kanser.org/saglik/userfiles/file/KolonKanseri06.pdf (Erişim Tarihi:12Ekim 2016)
[50]Campbell,F.W.,ComptonR.G.,Theuseofnanoparticlesinelectroanalysis:an updatedreview,Analyticalandbioanalyticalchemistry,DOI :10. 1007/s00216-009-3063-7,2010.
[51]Kolorektalkanserönlemeveteşhis.AmericanCancerSociety.
http://www.cancer.org/cancer/colonandrectumcancer/moreinformation/colonandrectu mcancerearlydetection/colorectal-cancer-early-detection-genetic-tests-screeni ng-prevention&usg=ALkJrhiShYYTXb84hVmX08179gz-Uh9Ixg
[52]Anonim,KanserHücreleriileNormalHücrelerArasındakiFark
https://limenya.com/kanser-hucreleri-ile-normal-hucreler-arasindaki-fark/(Erişim Tarihi:8Kasım2016)
[53]Dobrucalı,A.,Epidemiyoloji
http://www.drahmetdobrucali.com/hastaliklar/kalin-barsak-kanseri-kolon-kanseri -kolorektal-kanser/(ErişimTarihi:2Ocak2017)
[54]Tharu,R.,Shroff,S.,ChemotherapyDrugs.MeDINDIA2016.
[55]Akbudak,S.,n@nobülten17,5-9.e-dergiHacettepeÜniversitesiNanoteknoloji veNanotıpAnabilimDalı,Ankara,2013.
[56]Bayram,C.,n@nobülten17,20-24.e-dergiHacettepeÜniversitesi NanoteknolojiveNanotıpAnabilimDalı,Ankara,2013.
[57]“Dual-PorosityHollowNanoparticlesfortheImmunoprotectionandDeliveryof NonhumanEnzymes.”InancOrtac,etal. NanoLett.,2014,14(6),pp
3023–3032. DOI:10.1021/nl404360k
[58]Alkilany,A.M.,Murphy,C.J.,Toxcityandcellularuptakeofgold
nanoparticles:whatwehavelearnedsofar?,JounalOfNanoparticleResearch2010.
[59]Gürmen,S.,Ebin,B.,TMMOBMetalurjiMühendisleriOdasıMetalurjiDergisi 150.Sayı,32,İstanbulTeknikÜniversitesi,İstanbul.2006.
[60]Zhong,W.,“NanomaterialsinFluorescence-BasedBiosensing”,AnalBioanal Chemistry,2009.
[61]Durak,H.,OnkolojideKişiselleştirilmişTedaviveTeranostikYaklaşımlar, NükleerTıpSeminerleri.,2015;2:80-4,DOI:10.4274/nts.014
[62]Özdoğan,M.,4.EvredeKanserNedir,MetastazNeDemektir,KanserNeden MetastazYapar?
http://www.drozdogan.com/4-evre-kanser-nedir-metastaz-ne-demektir-kanser- neden-metastaz-yapar/(ErişimTarihi:25Kasım2016)
[63]Sperling,R.A.,Gil,P.R.,Zhang,F.,Zanella,M.veParak,W.J.,“Biological ApplicationsofGoldNanoparticles”,ChemicalSociety,24Nisan2008
[64]Ghosh,P.,Han,G.,De,M.,Kim,C.K.,Rotello,V.M.,“GoldNanoparticlesin DeliveryApplications”,AdvancedDrugDeliveryReviews,12Mart2008.
[65]Mehrabadi,Ş.F.,Fischer,W.,Haag,R.,Dendriticandlipid-basedcarriersfor gene/siRNA delivery(areview),Solidstate&Materialsscience,310-322,2012.
[66]Jiangyu,W.,Weizhe,H.,Ziying,H.,DendrimersasCarriersforsiRNA DeliveryandGeneSilencing:AReview,2013.
[67]Vikas,V.,Preeti,S.,REVIEW ONNON-VIRALDELIVERYSYSTEMSFOR siRNA,İnternationalJournalofPharmaceuticalScienceAndResearch;Jhansi ,294-301,2014.
[68]Yazdı,F.,Salehi,R.,Mirzaei,H.,SiRNAandepigeneticaberrationsinovarian cancer,Cancersurveysandtheraputicsmagazine,Mumbai,2016.
[69]Resnier,P.,Montier,T.,Mathieu,V.,Benoit,J.P.,Passirani,C.,Areviewofthe currentstatusofsiRNAnanomedicinesinthetreatmentofcancer,Biomaterials, 6429-6443,2013.