Mono-6-Deoksi-6-Azido-Β-CD’i 3-Aminopropilsilikaya İmmobilizasyonu

3.2.4.1. Saf Paklitaksel Standardı Çalışması Sonuçları

Kolonda toplamda 3 adet 10’ar ml fraksiyon ve 10 ml CH₃OH yıkaması gerçekleştirilerek toplama işlemi yapılmıştır. Yürütücü faz olarak CH₃CN/H2O (1:1)

elüenti kullanılmıştır. Kolona 40µL 10 ppm’ lik paklitaksel standardı enjekte edilmiştir. Toplanan her fraksiyon evapore edilip elde edilen katı 2 ml CH₃OH çözeltisi ile çözdürülüp akabinde 0.20 µm filtreden süzülerek viallenmiştir.

Çizelge 3.6. Saf paklitaksel standardı çalışması geri kazanım (ppm) değerleri.

10-DAB III Bakkatin III Sefalomannin Paklitaksel CH₃CN/H2O 1.fraksiyon 0,2841 - 0,0973 0,1310 CH₃CN/H2O 2.fraksiyon 0,2528 - 0,1683 - CH₃CN/H2O 3.fraksiyon 0,1102 - 0,1870 - CH₃OH Yıkama 0,1154 0,0322 - -

Şekil 3.128. PTX standardı 1.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.129. PTX standardı 1.fraksiyonu (siyah) ve PTX standardı 2.fraksiyonu (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.130. PTX standardı 2.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.131. PTX standardı 2.fraksiyonu (siyah) ve PTX standardı 3.fraksiyonun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.132. PTX standardı 3.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.133. PTX standardı 3.fraksiyonu (siyah) ve CH₃OH(kırmızı) yıkamasının hplc kromatoğramı.

Şekil 3.134. PTX standardı CH₃OH yıkaması (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

3.2.4.2. Taksan Standardı Karışım Çalışması Sonuçları

Kolonda toplamda 3 adet 10’ar ml fraksiyon ve 10 ml CH₃OH yıkaması gerçekleştirilerek toplama işlemi yapılmıştır. Yürütücü faz olarak CH₃CN/H2O (1:1)

elüenti kullanılmıştır. Kolona 40µL 10 ppm’lik taksan standardı enjekte edilmiştir. Toplanan her fraksiyon evapore edilip elde edilen katı 2 ml CH₃OH çözeltisi ile çözdürülüp akabinde 0.20 µm filtreden süzülerek viallenmiştir.

Çizelge 3.7. Taksan standardı çalışması geri kazanım (ppm) değerleri.

10-DAB III Bakkatin III Sefalomannin Paklitaksel CH₃CN/H2O 1.fraksiyon 0,3774 0,2574 0,1226 0,1453 CH₃CN/H2O 2.fraksiyon 0,1616 0,0561 0,0577 - CH₃CN/H2O 3.fraksiyon 0,1545 0,0726 - - CH₃OH Yıkama 0,0938 0,0475 - -

Şekil 3.135. Taksan standardı 1.fraksiyonun (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.136. Taksan standardı 1.fraksiyonunun (siyah) ve taksan standardı 2.fraksiyonunun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.137. Taksan standardı 2.fraksiyonunun (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.138. Taksan standardı 2.fraksiyonunun (siyah) ve 3.fraksiyonunun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.139. Taksan standardı 3.fraksiyonunun (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.140. Taksan standardı 3.fraksiyonunun (siyah) ve CH₃OH yıkamasının (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.141. Taksan standardı CH₃OH yıkaması (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

3.2.4.3. Sert Kabuk Ekstraktı Çalışması Sonuçları

Kolonda toplamda 3 adet 10’ar ml fraksiyon ve 10 ml CH₃OH yıkaması gerçekleştirilerek toplama işlemi yapılmıştır. Yürütücü faz olarak CH₃CN/H2O (1:1)

elüenti kullanılmıştır. Kolona 40µL sert kabuk ekstraktı enjekte edilmiştir. Toplanan her fraksiyon evapore edilip elde edilen katı 2 ml CH₃OH çözeltisi ile çözdürülüp akabinde 0.20 µm filtreden süzülerek viallenmiştir.

Çizelge 3.8. Sert kabuk ekstraktı çalışması geri kazanım (ppm) değerleri.

10-DAB III Bakkatin III Sefalomannin Paklitaksel CH₃CN/H2O 1.fraksiyon 0,3449 0,0947 - - CH₃CN/H2O 2.fraksiyon 0,5117 0,0657 0,0736 0,0221 CH₃CN/H2O 3.fraksiyon 0,0701 0,0468 - - CH₃OH Yıkama 0,2088 0,0633 0,0286 0,0221

Şekil 3.142. Sert kabuk ekstraktı stok (siyah) ve sert kabuk ekstraktı 1.fraksiyon (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.143. Sert kabuk ekstraktı 1.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.144. Sert kabuk ekstraktı 1.fraksiyonu (siyah) ve 2.fraksiyonunun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.145. Sert kabuk ekstraktı 2.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.146. Sert kabuk ekstraktı 2.fraksiyonu (siyah) ve 3.fraksiyonunun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.147. Sert kabuk ekstraktı 3.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.148. Sert kabuk ekstraktı 3.fraksiyonu (siyah) ve CH₃OH yıkamasının (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.149. Sert kabuk ekstraktı CH₃OH yıkamasının (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

3.2.5. 3-Aminopropil Silikaya β-Siklodekstrin İmmobilize (13) Kolon Adsorbanı Çalışma Sonuçları

3.2.5.1. Saf Paklitaksel Standardı Çalışması Sonuçları

Kolonda toplamda 3 adet 10’ar ml fraksiyon ve 10 ml CH₃OH yıkaması gerçekleştirilerek toplama işlemi yapılmıştır. Yürütücü faz olarak CH₃CN/H2O (1:1)

elüenti kullanılmıştır. Kolona 40µL 10 ppm’lik paklitaksel standardı enjekte edilmiştir. Toplanan her fraksiyon evapore edilip elde edilen katı 2 ml CH₃OH çözeltisi ile çözdürülüp akabinde 0.20 µm filtreden süzülerek viallenmiştir.

Çizelge 3.9. Saf paklitaksel standardı çalışması geri kazanım (ppm) değerleri.

10-DAB III Bakkatin III Sefalomannin Paklitaksel CH₃CN/H2O 1.fraksiyon 0,1533 - - - CH₃CN/H2O 2.fraksiyon 2,8315 - - 2,1883 CH₃CN/H2O 3.fraksiyon - 0,0632 - 1,7886 CH₃OH Yıkama 0,6536 0,0831 - 2,0722

Şekil 3.150. PTX standardı 1.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.151. PTX standardı 1.fraksiyonu (siyah) ve PTX standardı 2.fraksiyonu (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.152. PTX standardı 2.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.153. PTX standardı 2.fraksiyonu (siyah) ve PTX standardı 3.fraksiyonun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.154. PTX standardı 3.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.155. PTX standardı 3.fraksiyonu (siyah) ve CH₃OH yıkamasının (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.156. PTX standardı CH₃OH yıkaması (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

3.2.5.2. Taksan Standardı Karışım Çalışması Sonuçları

Kolonda toplamda 3 adet 10’ ar ml fraksiyon ve 10 ml CH₃OH yıkaması gerçekleştirilerek toplama işlemi yapılmıştır. Yürütücü faz olarak CH₃CN/H2O (1:1)

elüenti kullanılmıştır. Kolona 40µL 10 ppm’lik taksan standardı enjekte edilmiştir. Toplanan her fraksiyon evapore edilip elde edilen katı 2 ml CH₃OH çözeltisi ile çözdürülüp akabinde 0.20 µm filtreden süzülerek viallenmiştir.

Çizelge 3.10. Saf paklitaksel standardı çalışması geri kazanım (ppm) değerleri.

10-DAB III Bakkatin III Sefalomannin Paklitaksel CH₃CN/H2O 1.fraksiyon 0,7058 0,1415 - 2,0144 CH₃CN/H2O 2.fraksiyon 0,1789 0,0676 - 2,1558 CH₃CN/H2O 3.fraksiyon 0,1376 0,0670 - 1,8239 CH₃OH Yıkama 0,0000 0,1564 - 1,9625

Şekil 3.157. Taksan standardı 1. fraksiyonun (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.158. Taksan standardı 1.fraksiyonunun (siyah) ve taksan standardı 2.fraksiyonunun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.159. Taksan standardı 2.fraksiyonunun (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.160. Taksan standardı 2.fraksiyonunun (siyah) ve 3.fraksiyonunun (kırmızı) hplc kromatoğramı

Şekil 3.161. Taksan standardı 3.fraksiyonunun (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.162. Taksan standardı 3.fraksiyonunun (siyah) ve CH₃OH yıkamasının (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.163. Taksan standardı CH₃OH yıkaması (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

3.2.5.3. Sert Kabuk Ekstraktı Çalışması Sonuçları

Kolonda toplamda 3 adet 10’ar ml fraksiyon ve 10 ml CH₃OH yıkaması gerçekleştirilerek toplama işlemi yapılmıştır. Yürütücü faz olarak CH₃CN/H2O (1:1)

elüenti kullanılmıştır. Kolona 40µL sert kabuk ekstraktı enjekte edilmiştir. Toplanan her fraksiyon evapore edilip elde edilen katı 2 ml CH₃OH çözeltisi ile çözdürülüp akabinde 0.20 µm filtreden süzülerek viallenmiştir.

Çizelge 3.11. Sert kabuk ekstraktı çalışması geri kazanım (ppm) değerleri.

10-DAB III Bakkatin III Sefalomannin Paklitaksel CH₃CN/H2O 1.fraksiyon 0,4571 0,0882 - - CH₃CN/H2O 2.fraksiyon 0,1255 0,1369 - - CH₃CN/H2O 3.fraksiyon 0,0759 0,0191 - - CH₃OH Yıkama - - 0,0220 -

Şekil 3.164. Sert kabuk ekstraktı stok (siyah) ve 1.fraksiyonun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.165. Sert kabuk ekstraktı 1.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.167. Sert kabuk ekstraktı 2.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.168. Sert kabuk ekstraktı 1.fraksiyonu (siyah) ve 3.fraksiyonunun (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.169. Sert kabuk ekstraktı 3.fraksiyonu (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

Şekil 3.170. Sert kabuk ekstraktı CH₃OH yıkamasının (siyah) ve standart karışımın (kırmızı) hplc kromatoğramı.

3.2.6. β-siklodekstrinin Silika-Glisidiloksi İmmobilize (10) Kolon Adsorbanı