Histokimyasal boyama yöntemleri-I:
Karbonhidratlar, Amiloid için özel boyama yöntemleri
Hafta-2
KARBONHİDRAT BOYALARI
• Glikozun insanlardaki depo şekli glikojen, özellikle karaciğer ve kas hücrelerinde biriktirilir.
Enerji ihtiyacını
karşılamak için kolaylıkla glikoza yıkılan glikojen suda çözünmediği için göterilebilir, ancak fiksasyon hemen başlatılmalıdır.
• Glukoz insan vücudunda demonstre edilebilen tek monosakkarittir.
Ancak çok küçük moleküler büyüklüğe sahip olması ve suda çözünebilmesi sebebiyle doku kesitlerinde
gösterilemez.
Doğal polisakkaritler histokimyasal farklılıklarına göre;
• Nötral polisakkaritler
• Asit mukopolisakkaritler
• Glikoproteinler
• Glikolipitler olmak üzere dört grupta
incelenebilir.
Nötral polisakkaritler
• GLİKOJEN
• NİŞASTA
• SELÜLOZ
• KİTİN PAS +
diğer karbonhidrat boyaları (alcian blue, collaidal iron, musikarmen vb.) – dir.
Nötral mukopolisakkaritler
• Bunlar gastrointestinal sistemin bezlerinde ve prostatbezinde
bulunurlar .
• PAS boyasıile boyanabilmelerine karşın alcian mavisi, koloidal demir, müsikarminveya metakromatik boyalar ile boyanmazlar.
Asit mukopolisakkaritler (basit veya sülfatsız):
Hyalüronik asit,
Kondroidin sülfat A, B ve C Heparan sülfat (bağ dokusu
musinleri)
PAS -, alcian mavisi (pH 2,5 de), koloidal demir, musikarmin + boyanırlar.
Glikoproteinler(Musin, Mukoid, Mukoprotein, Mukosubstans)
• Nötral (mide musinleri)
• Karboksillenmiş (siyalomusinler)
• Sülfatlanmış ve karboksillenmiş (kolonik musinler/sülfomusinler)
• PAS+
• Her musin pH değerine göre histokimyasal
Glikolipitler
• En çok beyin ve sinir kılıflarında bulunan serebrozidler bu gruptandır.
• PAS +
Karbonhidratlar (MUSİN) İçin Özel Boyama Teknikleri
• Periyodik Asit Schiff (PAS)
• Diastazlı PAS (dPAS)
• Musikarmin
• Alsiyan mavisi
• Kolloidal demir
MÜSİN BOYALARI
• Koloidal demir (‘’AMP’’): Bu boyada demir molekülleri amonyum ve gliserinde stabilize edilir ve asit mukopolisakkaritlerine afinite gösterirler.
• Boyama esnasında fosfolipitler ve serbest nükleik asitler de boyanabilir.
• Dokunun daha spesifik bir hale gelebilmesi için hiyalüronidaz ile daha önceden sindirilebilir.
MÜSİN BOYALARI
• Alcian mavisi: Özelliği daha fazla spesifite sağlamak için pH’nın ayarlanabiliyor olmasıdır.
MÜSİN BOYALARI
• PAS (peroidic acid- Schiff): Müsinlerle beraber glikojeni de boyayabilir, fakat glikojenin
uzaklaştırılması için dokular önceden diastaz ile sindirilmesi gerekir.
MÜSİN BOYALARI
• Musikarmin: Epitelyal mukopolisakkaritleriçin oldukça spesifiktir.
Amiloid ile ilgili boyama teknikleri
• İlk kez 1854 yılında Virchow tarafından nişasta benzeri madde (amiloid) olarak tanımlanmıştır.
• %1,5 oranında mukopolisakkarit içeren protein içerikli bir maddedir.
• H&E boyamada ekstrasellüler matriksde homojen, amorf, eozinofilik birikimler olarak karşımıza çıkar.
• Amiloidoz : Protein katlanma bozukluğu olarak görülen bir çeşit hücresel birikime verilen addır. Ve bir çok hastalıkla birlikte görülebilen bir durumdur.
• Yaşlanma süreci
• Parkinson
Amiloidoz tipleri 4 ana gruba ayrılabilir:
• 1- primer amiloidoz
• 2- Sekonder amiliodoz
• 3- Tümörle ilişkili amiloidoz
• 4- Organa özgü amiloidoz
• tanısında
• KONGO KIRMIZISI altın standarttır.
• Gül kurusu renginde boyanır.
Ayrıca;
• Tioflavin T
• Tioflavin S
• Kristal viole