ADLİ DNA ANALİZLERİ
İ B R A H I M S E M İ Z O Ğ LU E K İ M 2 0 1 3
A N K A R A
ADLİ BİLİMLER
Locard ’ın değişim prensibi:
« Her temas bir iz bırakır.»
Locard ’a göre, suçlu olan kişi bir obje veya kişi ile temas ettiğinde, olay ile ilgili kanıt olabilecek “ iz ” bırakır.
Suçlu kişi olay yerinden, olayla bağlantı oluşturabilecek “ iz ” leri (toz ve partükül vb.) taşır.
ADLİ BİLİMLER
Adli bilimler terimi adli konularda çoğu özel uzmanlık eğitimini ve bilgisini gerektiren incelemeleri
yapan bilim dallarının oluşturduğu kümeyi ifade eder.
ADLİ BİLİMLER
ADLİ DNA ANALİZLERİ
Olay yerinde tespit edilen deliller ile olaya dahil olan kişilerin irtibatının sağlanarak suç olaylarının aydınlatılması için biyolojik delillerden elde edilen DNA molekülü üzerinde yapılacak olan bilimsel çalışmaları kapsar.
TARİHÇE
İNGİLTERE;
1988 yılında, DNA ilk defa tek başına delil olarak kabul edildi. 15 yaşlarındaki 2 genç kızın (Lynda Mann – Dawn Ashworth) katilinin (Colin Pitchfork) bulunmasında kullanıldı.
ABD;
1987’de DNA delil olarak kabul edildi, 1988’de 4 kadının tecavüz edilerek öldürülmesi olaylarının failinin aynı kişi olduğu tespit edildi. Mahkum elektrikli sandalyede idam edildi.
TARİHÇE
ORGANİZASYON
BAŞBAKANLIK
Adalet Bakanlığı
Adli Tıp Kurumu (Ankara,
Istanbul, Izmir)
İçişleri Bakanlığı
KPL (Ankara, Istanbul )
JKL (Ankara)
Üniversiteler
Adli Tıp Anabilim Dalları
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR
DELİL İNCELEME
Canlıların vücutlarından kopan, düşen veya akan her türlü bulguya
“BİYOLOJİK DELİL” denir.
DELİL İNCELEME
MAKROSKOBİK UV IŞIK MİKROSKOBİK LUMİNOL TANIMLAMA NUMUNE ALMA
UV IŞIK İNCELEMESİ
UV IŞIK İNCELEMESİ
LUMİNOL
TANIMLAMA
İhtimali Test Reaktifleri
Doğrulama Testleri
İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ
KAN;
Katalitik testlerdir.
Hemoglobinin ‘hem’ grubunun peroksidaz benzeri bir aktivite göstererek, hidrojen peroksiti (H2O2) parçalaması temeline dayanır.
Bu tepkimede oluşan yükseltgenmiş (okside) türler çeşitli substralar ile tepkimeye girerek gözle görülebilen bir renk değişimi meydana getirir.
İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ
İhtimali Kan Testleri
Test Orijinal Makale Yazarı ve yılı
Guaiacum / Van Deen's'Test Van Deen, 1862
Day's Test Day, 1867
Aloin Klunge, 1882
Phenolphthalin / Kastle-Meyer Test Kastle & Shedd, 1901; Meyer, 1903; Utz, 1903; Higaki and Philp, 1976
Benzidine / Adlers' Test Adler & Adler, 1904
Leucomalachite Green Adler & Adler, 1904
o-Tolidine Ruttan & Hardisty, 1912
o-Toluidine Gershenfeld, 1939
o-Dianisidine Owen et al., 1958
Tetramethylbenzidine (TMB) Holland et al., 1974; Garner et al., 1976
Luminol Specht, 1937
Fluorescin Lee et al., 1979
Confirmatory Crystal Tests
Reagent and/or Name of Test Original Author(s), Year *
Hematin halide / Teichmann's Test Teichmann, 1853
Pyridine hemochromogen / Takayama's Test
Takayama, 1912
Acetone Chlorhemin / Modified Teichmann Wagenaar, 1935
Confirmatory Anti-Human Hemoglobin Tests Klein, 1905; Hektoen & Schulhof, 1923; Heidelberger & Landsteiner, 1923; Baxter & Rees, 1974
KAN;
İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ
MENİ;
Katalitik testlerdir.
Asit Fosfataz enziminin naftil fosfatın fosfat grubunu parçalaması temeline dayanır.
İHTİMALİ TEST REAKTİFLERİ
TÜKÜRÜK;
Alfa Amilaz enziminin aktivitesi temeline dayanır.
DOĞRULAMA TESTLERİ
Antijen - Antikor Hibridizasyonu temeline dayanır.
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU PCR
ELEKTROFOREZ
TİPLENDİRME
RAPOR
DNA İZOLASYONU
Patlat-Ayır-Geri al
KİMYASAL YÖNTEMLER
KOLON YÖNTEMLERİ
MANYETİK PARÇACIK YÖNTEMLERİ
KİMYASAL YÖNTEMLER
Fenol –Kloroform Yöntemi
(Organik Yöntem)
KİMYASAL YÖNTEMLER
CHELEX Yöntemi
KOLON YÖNTEMİ
MANYETİK PARÇACIK YÖNTEMİ
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR TEMELLİ OLMAYAN YÖNTEMLER
PCR TEMELLİ YÖNTEMLER
DNA MİKTAR TAYİNİ
Spektrofotometre
Agaroz Jel Elektroforezi
Kemiluminisans ve Fotometrik
PCR Temelli Olmayan Yöntemler
DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR Temelli Yöntemler Real Time PCR
AB Quantifiler Duo DNA Miktar Tayin Kiti
Promega Plexor HY DNA Miktar Tayin Kiti
QIAGEN İnvestigator Quantiplex DNA Miktar Tayin Kiti
AB Quantifiler Duo DNA Miktar Tayin Kiti
Promega Plexor HY DNA Miktar Tayin Kiti
QIAGEN İnvestigator Quantiplex DNA Miktar Tayin Kiti
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR
PCR
MULTİPLEKS PCR
PCR
MULTİPLEKS PCR
AB AmpFlSTR Identifiler Plus Multipleks Amplifikasyon Kiti
Promega PowerPlex 16 HS Multipleks Amplifikasyon Kiti
QIAGEN İnvestigator ESSplex Plus Multipleks Amplifikasyon Kiti
Ülkemizde Yaygın Olarak Kullanılan STR
Multipleks Kitler
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR
ELEKTROFOREZ
Kapiller Elektroforez
ELEKTROFOREZ
•Yürütme işlemi 15 kV ’da (15.000 V) ve 60 °C’de yaklaşık 45 dakikada tamamlanır.
•Tampon olarak kullanılan 1 X TBE (Tris-borat-EDTA) yüksek voltajda hızlı bir elektroforez için tercih edilmektedir.
•POP4 polimeri, %4 DMA (poly [N,N-dimetilakrilamid=DMA], 8M üre, %5 2-pirolidinon ve 100 mM N- Tris-metil-3-aminopropan-sülfonik asid (TAPS)’dan oluşur.
POP4 polimeri içinde bulunan yüksek üre miktarı elektroforez sırasında PCR ürünlerindeki denatürasyon durumunun devamını da sağlar.
ELEKTROFOREZ
ELEKTROFOREZ
ELEKTROFOREZ
ELEKTROFOREZ
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR
TİPLENDİRME
Allelik Ladder;
İnsan populasyonuna özgü STR bölgelerinin ortak allellerin olduğu yapay bir karışımdır. Her bir allel için referans DNA büyüklüğünün belirlenmesinde kullanılır. Bu allelik ladderlar, her STR lokusu için bir ölçme birimine benzer standart vazifesini görmektedir.
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
Size Marker;
Büyüklüğü bilinen yapay DNA parçacıklarıdır. Her bir örnek için bilinmeyen DNA parçacıklarının büyüklüklerinin belirlenmesinde kullanılır. (ILS 600,LIZ 500,ROX 350)
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
TİPLENDİRME
ADLİ DNA ANALİZLERİ
DELİL İNCELEME
DNA İZOLASYONU DNA MİKTAR TAYİNİ
PCR
ELEKTROFOREZ TİPLENDİRME RAPOR
RAPOR
Teşekkür ederim.
ibrahimsemizoglu@yahoo.co.uk
