Mikroorganizmaların Gelişmesini Etkileyen Çevresel Faktörler
Sıcaklık,
pH,
Su aktivitesi,
Oksijen,
Basınç
Radyasyon
IV. G. 1. Sıcaklık
Bir organizmanın en iyi gelişme gösterdiği
sıcaklık optimum sıcaklık olarak adlandırılır.
Mikrobiyel gelişmenin olduğu en yüksek sıcaklık Maksimum sıcaklık olarak adlandırılır.
Mikrobiyel gelişmenin olduğu en düşük sıcaklık minimum sıcaklık olarak adlandırılır.
Maksimum, optimum ve minimum sıcaklıkların hepsine birden kardinal ( asıl, esas) sıcaklık denilir.
Mikrobiyel gelişme yaklaşık –20oC ile 110oC aralığında olmaktadır.
Bu sıcaklık derecelerinde mikrobiyel gelişme oldukça yavaştır.
Tek bir mikroorganizma türü bu sıcaklık
değerleri arasında gelişmesini sürdüremez.
Bazı türler düşük sıcaklıklarda, sıcak su kaynaklarında yaşayan bazı türler ise
suyun kaynama noktasından daha yüksek sıcaklıklarda gelişebilirler.
Bu tip ekstrem koşullarda gelişebilen
mikroorganizmalar extremophile olarak
adlandırılır.
Genellikle mikroorganizmaların minimum ve maksimum sıcaklık dereceleri arasında 30 derecelik bir fark vardır. Ancak bazı türlerde minimum ve maksimum sıcaklık değerleri arasındaki aralık çok azdır.
Stenotermal olarak adlandırılan bu türlerden biri olan Neisseria gonorrhoeae, minimum 30
oC, maksimum 38
oC arasındaki sıcaklık değerlerinde gelişmesini sürdürebilir.
Öritermal (Eurythermal) olarak adlandırılan
bazı türler ise, örneğin Enterococcus
faecalis, minimum 0
oC, maksimum 44
oC
arasında gelişmesini sürdürebilir.
Kardinal sıcaklıklar pH ve besiyeri bileşimi gibi çeşitli çevresel faktörlerden etkilenir.
Örneğin sivrisinek barsağında yaşayan flagellalı bir protozoa olan Crithidia fasciculata, fakir bir ortamda 22-27oC’de, zengin ortamlarda ise 33-34oC’de gelişmektedir. E. coli ise zengin ortamlarda optimum gelişmesini 39oC’de (maksimum 48oC minimum 8oC) gerçekleştirmektedir. Normal ortamlarda ise E. coli için optimum sıcaklık 37oC’dir.
Optimum geliştikleri sıcaklık derecelerine göre mikroorganizmalar
1. Psikrofil 2. Mezofil 3. Termofil
4. Hipertermofil
Psikrofil (Psychrophile):
Düşük sıcaklıklarda gelişen bu organizmaların optimum geliştikleri sıcaklık yaklaşık 15oC’dir.
Bu mikroorganizmaların minimum sıcaklıkları 0oC, maksimum sıcaklıkları ise 20oC'dir.
Bu grupta yer alan, 0oC canlılığını koruyarak 20-40oC'de optimum gelişebilen organizmalar ise psikrotolerant (fakültatif psikrofil) olarak adlandırılmaktadır.
Psikrofil mikroorganizmalar düşük sıcaklıklarda aktif olan enzimlere sahiptir.
Fazla miktarda α heliks ve az miktarda da β yapısı vardır. β tipi katlanmalar proteinde daha sağlam bir yapı oluştururlar.
Bu enzimler soğukta inaktif enzimlerden daha fazla polardır
Daha az hidrofobik amino asit içermektedir.
Bu organizmaların sitoplazma
membranlarında doymamış yağ asitleri
fazla miktarda bulunur. Bu da düşük
sıcaklıklarda membran akışkanlığının
korunmasını sağlamaktadır.
2. Mezofil (Mesophile): Optimum gelişme sıcaklıkları 37-40
oC olan ve yaşadığımız çevrelerde ve vücutlarımızda yaygın olarak bulunan bu organizmaların minimum sıcaklıkları 15
oC, maksimum sıcaklıkları ise 45
oC'dir.
3. Termofil (Thermophile): Optimum gelişme sıcaklıkları 45-80
oC arasında olan mikroorganizmalar bu grupta yer almaktadır.
4. Hipertermofil (Hyperthermophile):
Optimum gelişme sıcaklıkları 80
oC'nin
üstünde olan mikroorganizmalar bu
grupta yer alır.
1. Prokaryotlar ökaryotlardan daha yüksek sıcaklıklarda gelişebilirler. 65
oC’ni üstünde sadece prokaryotlar gelişebilmektedir. Yapısal olarak daha kompleks olan ökaryotlar yüksek sıcaklığa daha hassastır.
2. Tüm prokaryotlar içinde sadece Arkeler en termofil organizmalardır.
3. Fotosentez yapmayan organizmalar
fotosentez yapanlardan daha yüksek
sıcaklıklarda gelişebilirler.
Yüksek sıcaklığa termofil mikroorganizmaların moleküler adaptasyonu:
Bunların enzimlerindeki amino asit dizileri mezofillerden çok az farklılık göstermektedir. farklı katlanmalar yaparlar.
Hipertermofillerin proteinlerinde fazla sayıda tuz köprüleri bulunur.
Bu proteinlerdeki hidrofobik uçlar onların daha sıkı katlanmalar yapmasını sağlar.
Termofillerdeki membran lipitleri doymuş yağ asitlerince zengindir.
Hipertermofil arkelerde hidrokarbonlar
bulunur, membranları tek tabakalıdır
(monolayer)
Termofiller ve Biyoteknoloji
Termofil organizmaların yüksek sıcaklıklarda biyokimyasal reaksiyonları katalize eden
enzimleri, moleküler biyolojide özel DNA
parçalarının çoğaltılmasında kullanılmaktadır.
Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) olarak bilinen bu olayda DNA polimeraz enzimleri DNA'nın
kopyalanmasında kullanılmaktadır.
Önce DNA ısıtılarak tek iplikcik haline getirilir.
Bu sıcaklıkta çalışabilen termofil bakterilerden elde edilen polimerazlar, bu DNA parçalarının kopyasını çıkartarak çoğaltırlar.
Termus aquaticus'dan izole edilen Tag
polimeraz 95oC'de stabildir. Ancak bundan daha yüksek sıcaklıkta 100oC’de çalışabilen, Pyrococcus furiosus'dan izole edilen Pfu
polimeraz, bu çalışmalarda hata oranı daha az olmasından ve daha yüksek sıcaklıkta stabil kalmasından dolayı tercih edilmektedir.