GIDA İŞLEME BÖLÜMÜ GENEL MİKROBİYOLOJİ
LABORATUVARI FÖYÜ 6. HAFTA
DR. ÖZGE KAHRAMAN ILIKKAN
2019
Konu: Ekim Yöntemleri
Uygulama 1: Sıvı besiyerine ekim Uygulama 2: Seyreltme
Uygulama 3: Yayma Ekim
Uygulama1a: Sıvı Kültürden Sıvı Besiyerine Aktarma
Materyal:
- 5 ml Tryptic Soy Broth içeren tüpler - Mikroorganizma kültürü
- Mikropipet (10-100uL) - Portüp
- Steril pipet uçları - Cama yazar - Vorteks
- İnkübatör- 37oC Metot:
1. Çalışmaya başlamadan önce kabini alkol ile temizleyiniz
2. Ekim yapacağınız tüplerin üzerine gerekli bilgileri yazınız, mikropipetinizi çekeceğiniz sıvı miktarına ayarlayınız (50ul)
3. Mikroorganizma kültürü içeren tüpünüzün vorteks yardımıyla karıştırın ve kapağını açıp ağzını alevden geçirin
4. Mikropipet yardımıyla sıvı kültürden örneğinizi alınız. Tüpünüzün ağzını alevden geçirip kapatınız ve yerine koyunuz
5. Sıvı kültürü aktaracağınız sıvı besiyerini alınız, tüpün kapağını açınız ve alevden geçiriniz, mikropipetle aldığınız sıvıyı aktarınız.
6. Tüpün ağzını alevden geçirip kapatınız 7. Tüpleri inkübatöre yerleştiriniz
8. Sonuçları gözlemleyiniz
Uygulama1b: Katı Kültürden Sıvı Besiyerine Aktarma
Materyal:
- 5 ml Tryptic Soy Broth içeren tüpler - Mikroorganizma kültürü
- Öze - Portüp - Cama yazar - İnkübatör- 37oC Metot:
1. Çalışmaya başlamadan önce kabini alkol ile temizleyiniz 2. Ekim yapacağınız tüpün üzerine gerekli bilgileri yazınız 3. Öze yardımıyla katı kültürden örneğinizi alınız.
4. Sıvı kültüre aktaracağınız tüpünüzü alınız ve kapağınızı açıp alevden geçirip özeyi sıvı besiyerine daldırıp mikroorganizma kültürünü bırakınız.
5. Tüpün ağzını alevden geçirip, kapağını kapatınız 6. Tüplerinizi 37oC’de 24 saat inkübe ediniz
7. Mikroorganizma gelişimini gözlemleyiniz
Uygulama 2: Seyreltme
Materyal:
- 9 ml FTS (Fizyolojik Tuzlu Su) içeren tüpler - Mikropipet (1000 uL)
- Steril pipet uçları - Cama yazar -Vorteks
Metot:
1. Çalışmaya başlamadan önce kabini alkol ile temizleyiniz 2. Ekim yapacağınız tüplerin üzerine gerekli bilgileri yazınız
3. Mikroorganizma kültürü içeren tüpünüzün vorteks yarımıyla karıştırınız ve kapağını açıp ağzını alevden geçiriniz
4. Mikropipet yardımıyla 1 ml sıvı kültürden örneğinizi alınız. Tüpünüzün ağzını alevden geçirip kapatınız ve yerine koyunuz.
5. Sıvı kültürü aktaracağınız ve 9 ml FTS içeren diğer seyreltme tüpünüzü alınız, alevden geçiriniz ve ekiminizi yapınız.
6. Aynı şekilde diğer seyreltmeleri yapınız ve tüplerinizi diğer ekim yöntemlerini uygulamak üzere hazırlayınız
Rapor Örneği
Ad Soyad: Program:
Uygulama 3: Yayma Ekim
Materyal:
- Plate Count Agar
- Mikropipet (20-200ul/ 10-100ul) - Steril Pipet Ucu
- Portüp
- Cam L baget (drigalski spatülü) - Alkol
- Cama yazar - Vorteks
- İnkübatör- 37oC Metot:
1. Çalışmaya başlamadan önce kabini alkol ile temizleyiniz
2. Yukarıdaki gibi hazırladığınız seyreltme tüplerinizin ve petrilerin üzerine gerekli bilgileri (tarih, örnek adı, seyreltme faktörü, besiyeri adı vb.) yazınız
3. Mikroorganizma kültürü içeren seyreltme tüpünüzü vorteks yardımıyla karıştırın.
Tüpün kapağını açıp ağzını alevden geçirin
4. Mikropipet yardımıyla 100 ul seyreltilmiş sıvı kültürden örneğinizi alınız.
Tüpünüzün ağzını alevden geçirip, kapağını kapatınız 5. 100 ul örneği petrinizin ortasına bırakın
6. L bagetinizi alkol ve alevden geçirip steril ediniz
7. Petrinin kenarında soğutup, bıraktığınız sıvıyı düzgünce yayınız
8. Petriler sıvıları emdikten sonra petrileri ters çevirip inkübatöre koyunuz, 24 saat inkübe ediniz
Sonuç: Mikroorganizma sayımını yapıp, birimiyle sonucu bulunuz. Raporu teslim ediniz.
Yorum: Sonuçları yorumlayınız
