\'C!t. Uil. OC!fi,:. (2000).16.1: \·0-1-'6
NEONATAL iSHALLi BUZAGILARDA SERUM iMMUNOGLOBULiNLERiN
GLUTARALDEHiD KOAGULASYON TESTi iLE DEGERLENDiRiLMESi
ismail $enl@ Abdullah Ba~oQlul Mahmut Ok' Fatih M. Birdane 1
Hasan GOzelbekta~ 1 T uran Civelek 1
Serum
Immunoglobulin
s
in
Neo
natal Diarrhoei
c C:.l
lv
es E
valuation b
y
Glutal'aldchid
Coag
ulation T
cs
t
Summary: The aim ol lhls study, in neonatal calves. 10 cafry out the relahonshlp between diarrhea and passive co-lostral transfer and the safety of GA test using SAID (Single Aadlallmmunodiffussion) test for lis determination. In this study. heally 20 and diarrheic 30. totally 50 calves were used as a material. Serum immunglobulin levels were me-asured by GA test as semiquantitative and by SAID lest as kan1ilallve. In the some diarrheic calves IgG levels wefe
250-400 mgldl and their serum incougulated in 30 minutes. In the meanllme. IgG levels 01 olher diarrhoeIC calves were 580·800 mgldl and th9ir serum semisolid (jelous) at between 12·28 minutes. In the hearty calves. serum samples wllh IgG level of 2400-5800 mg/dl coagulated in '-5 minules and serum samples with IgG level of 1600 mgl
dl coagulated in 6 10 7 minutes. As a result. it could be said that diarrhea is connected with passive colostrallransfer. and calves with negative and jelous GA test have failure of passive colostral transfer and calves wllh positive GA test have adequate passive coloslrallransler.
Key words: Calves. Gluteraldehyde coagulalJon lest, Serum Immunoglobulin G
6zet:Bu yah~mada. neonatal buzagllarda Ishalin pasi! immun transferi lie ilgisi ve bunu behrlemede glutaraldehid (GAl koagulasyon testinin gOvenirliliginin, blr kantilatif test olan single radial immunodlf!uzyon (SAID) testi kullanarak ortaya konulmaSI ama!;:lanml~llr. Bu ara~tlfTTlanm materyahni. 20 saghkh ve 30 ishalli olmak uzere toplam 50 adat neonatal buzagl olu~lurdu, Immunglobulin G sevlyeleri. kanlitatl! olarak single radial immunodlffuzyon lesti lie; se· mlkanhtatlf olarakta glutaraldehid koagulasyon testi lie 6~OIdO Neonatal ishalli buzagllarda 30 dakikada plh. Illa~mayan serum 6rneklennde IgG konsantrasyonlan 250·400 mgfdl iken, 12·28. daklkada yatl plhtlla~ma Oel6z) g6steren serum 6rnekleflnde Ise IgG konsantrasyonlafl 580-800 mgldl idl. Sagllkh neonatal buzagllarda 1·5 daklkada plhtlla~an serum 6rneklerinde IgG konsantrasyonlafl 2400-5800 mgldl iken. 6-7 dakikada plhtlla~an serum Or· neklerinde IgG konsantrasyonlan 1600-1700 mgldl idi. Sonu!; olarak negatif ve jel6z glutaraldehid test sonucu veren buzagllarda yelersiz pasif kolostral translere pozilif glutaraldehid test sonucu veren buzagllarda yelerli pasll kolOSlral transfer g6zlenebilocegi sOyienebilir
Anahtar Kellmeler: Buzagl. glutaraldehld koagulasyon test. serum immunoglobulin G
Giri~
Neonatal buzagl kaytplan slgtr yeli~liriciligin en 6nemli problemlerindendir. Bu kaytplartn ne· denleri arasmda ishaller ilk Slrada yer a~r. is-hallere. yevresel ~artlann uygunsuzlugu ve immun durumun yelersizligi ile birlikle mikroorganizmalar (virus. bakteri. prolozon. vs) neden olmakladlr (Allen ve White. 1985; Hall va ark., 1988; Er~ani~
ve ark .. 1988: Turgut ve Ok. 1997).
Ruminantlarda, plasental yapl nedeniyle, im-munglobulinlerin IOtal transferi mumkun daQildir. Bu yOzden ruminantlarda pasif immunite sadece
Gcli~ Tanhi ; 11.10.199<) (ff:i~m:ul~en@'e'l;cite,com.
kolostrumla transfer edilir (Blood va Aodostits.
1989). Yaptlan yali~malar ishallerin ~ekillenmesinde
kolostral pasi! transferin yetersizligini vur·
gulamaktadlr (Blom. 1982; Hopkins ve ark .. 1984; Aldrige ve ark., 1992; Wittum ve Perino, 1995).
Akul ishaller ve buna bagll oiOmlerin dogum sonrasl ilk lOgOn iyersinde ortaya ylkltQI dikkate altndlgtnda
dogum sonrasl immun durumun betirlenmesi i~·
letmecilik aylstndan oldukya 6nemlidir. Immun durum. semikantttati! (Sodyum suliil presipilasyon, yinko sulfa! turbidite, Glutaraldehid koagulasyon.
Refraklrometre) ve kantilatif (Single Radiyal immun
DiffOzyon. ELISA. vs) tesllerle belirlenmekledir
!)E\. BA!)oGLL'. OK. BtRDANE. GCZELREKT A~. CIVELEK
(Hopkins ve ark,. 1984; Beatson ve ark .. 1985; Selim ve ark. 1995), Bunlardan glutaraldehid ko-agulasyon testinin guvenirliligi tartl~malldlr.
Bu yall~mada, neonatal donem buzagllarda
ishalin serum IgG sevlyeleri lie ilglsi ve pasif
immun transferi belirlemede GA testinin
gu-venirlili~inin, bir kantitatif test olan SAID yardlmlyla
ortaya konulmasl ama<;lanml~tlr. Materyal ve Metol
Bu ara~tlrmanln maleryalini, ozel bir
hay-vanClllk i~lelmesinden sagllkll, yeteri kadar ko-lostrum alml~, 2-10 gunlUk 20 (kontrol grubu, ) ve
5.0.
Vetenner Fakultesi 1<; Hastaltklan klinigine te-davi amaclyla gelirilen 2-20 gOnluk 30 ishalli (de-neme grubu) olmak uzere toplam 50 adet neonatalbuzagl olu~turdu.
Sagllkll ve ishalli buzagllann klinik
mu-ayeneleri yaplkhktan soma, kan ornekleri ahnarak serumlan Ylkanldl. Immunglobulin G seviyeleri, kanhtatif olarak Single Radial Immunodiffuzyon
lesti ile; semlkantitatif olarakta glutaraldehid
ko-agulasyon testi ile 61<;uldu.
Glu\araldehid koagulasyon Tesl:
Bir leSI llipune 50111 % 10'luk glutaraldehid
solusyonu (%25 Merck No: 4239) Ozenne 0.5 ml
serum ilave edllerek kan~\1fIldl ve 30 dakika
bek-lendi. Bu sOre iyersinde test tOpunOn dibinde sert, opak, san bit plhllnln olu$umu ve tup tersine yev-rildigi zaman plhllnm hareket elmemesi pozitil: tam
olmayan, yan sert, jel bir plhllOln olu~masl jel6z;
plhtlla~manln olmamasl ise negalil reaksiyon
ola-rak degerlendirildi.
Single Aadiallmmunodiffuzyon Testi:
Serum immunoglobulinlerin konsanlras·
yonlannm belirlenmesinde lican Single Radial im-munodilfOzyon lest kiti (RID kits, VMRO, Pullman, Wash) kullanlldl. Bu tesUe anti-bovine Im-munglobulin G'nin slandart solusyonlan ile blrlikte
agarose lei i<;eren radial immundilfuzyon test
kap-lan, standart ve test orneklerini test kablnln <;u-kurlanna koymak i<;in 3llt'lik mikropipetler kullanlldl.
3111 serum test kaplanna konduktan soma 18 saat
oda ISlslnda tututdu. Sonu<;lal1 ilade eden halka
yaplan bir kompasla OI<;uldO. Relerans serumlarla meydana gelen halka <;aplarma gore standart egri
olu$turuldu. Orneklerin halka <;aplan da bu standart
egri ile kar~lla$tlnlarak Immunglobulin
kon-santrasyonlan belirlendi (Selim ve ark. 1995). Bulgular
Hasta buzagllarda sulu, san bazen pis kokulu 144
diyareyle birlikte orta ile ~iddetli derecede de-hidrasyon belirlendi.
Oeneme grubuna ait hayvanlann serum glu· taraldehid koagulasyon test sOresi. serumun
plh-hla~ma 6zelhgi ve immungrobulin G kon· santrasyonlan Tabl01'de verilmi~\lr. Buna gore ishalll buzagllar yetersiz pasi! kolostral transfere
sa-hipti (375 mg/dl). 30 dakikada plhtlla~mayan serum
orneklerinde IgG konsantrasyonlan 250-400 mgldl iken. 12-28, dakikada Van plhtlla~ma (jalbz) gos-teren serum orneklerinde ise IgG konsantrasyonlan 580-800 mg/dl araslnda tespit edilmi~tlr.
Sagllkll buzagllann serum glutaraldehid ko-agulasyon lesl sOresi, serumun plhhla~ma 6zeJligi
ve IgG konsantrasyonlan Tablo 2'de verilmi~tir. Buna gore sagllkll buzagllar yeterli pasif kolostr;;!,1
translere sahlpti (3255). 1-5 dakikada plhttla~an serum brneklennde IgG konsantrasyonlan
2400-5800 mgldl iken, 6-7 dakikada plhtlla~an serum
or-nekJennde IgG konsantrasyonlan 1600-1700 mg/dl arasrnda tespil edilmi~tir.
Tablo I. SepllS&mlh buzaQllarm 5eNm glutaraldehld 110-agufasyon test sOresl. S9Nmun plhllta~ma Ozelligi V9 S9rum 1m-munglobulln G konsantrasyonlarl
Hayvan saylSl GA TeSI sureS! Serumun IgG
(oj (dakika) plhllla~ma (mg.'d1) Ozelligi
14 30 negalll 250·400
"
12-28 jelOz 580·800Tablo 2 Sagllkh buzaglLartn serum glularaidehid koagulssyon lest suresl, S9rumtJ1"l plhtlla~ma OzelliQJ ve serum Immunglobuhn G konsanlrSSyoN8/1
Hayvan saYlSI GA Tesl suresi Serumun IgG (n) (dakika) plh!lla$ma (mgldl)
Ozelligi
20 I·' pozlti! 1600-5800
Tartt~ma va Sonuy
Serum IgG seviyeleri < 800 mg/d\ olan
bu-zagllann maternal antikorlarla Ilgili pasif transfen
ye-tersiz; serum IgG seviyeleri 800-1600mg/dl olan bu-zagllann pasil transleri klsmi ve serum IgG seviyeleri >1600 mg/dl olan buzag:llann pasif trans-feri yelerli kabul edilmektedir (Hopkins ve ark.,1984; Perino ve ark" 1993). Slglr ye-ti$liriciliginde yeni do{!anlarda g6zlenen hastallklar ve buzagl kaYlplan dikkate allndlglnda immun
du-rumla ilgili pasif korostral translerin belirlenmesi
01-dukya onemlidir (Allen ve While, 1985; Hall ve ark., 1988; Ergani~ ve ark., 1988; Turgul ve Ok, 1997).
N~()nalat ishatti Uuzagltarda St'rum immunogtobutinlerin ... Zira bin;;ok aral,)ItnCI (Blom 1982; Petri ve ark 1984;
Muggli ve ark .. 1984; Perino ve ark .. 1993; Witlum ve Perrino. 1995; Selim ve ark., 1995; Perrino, 1997) yetersiz passil kolOSlral transfeni bu-zaQllarda klsa ve uzun d6nemde saQhk du-rumlanntn ve bOyOme peliormanstnm risk altmda olduQunu ve onemli kaYlplann meydana geldi{jini Ifade elmektediner. Bu gorul,)e tam olarak ka-ulmayan aral,)lmcllar (Aldridge ve ark.. 1992:
Heath. 1992: Bal,)oQlu ve ark.. 1999) hi-pogammoglobuhnemin her zaman enfeksiyona ve
OIOme neden olmadlQlnl kolostrum sayesinde
yOk-sek oranda pasif immunile sa{jlanan buzaQllarda bile ishal ve diQer haslaltklarm da meydana ge·
lebileceQini bildirmektedirler. Bu yahl,)ma sonuylan ise birinci grup aral,)tlrmacllan destekler niteliktedir. Zlra deneme grubunu olul,)turan ishalli buzagllar
yetersiz pasi! kolostral transfere sahipken, konlrol
grubunu olul,)turan saQltkh buzagllar ise yeterli
pasif kolostraltransfere sahipli.
Pasi! koloslral transferin belirlenmesinde pra-lik olarak sahada uygulanabllir ve gOvenilir lestler lercih edilir. Bu lestlerden biri olan GA testi tar-tll,)mahdlr. Saikku ve ark. (1989) GA testinin pratik, ucuz ve kritik IgG seviyelerinde yOksek spesifite ve sensitivileye sahip semikantitallf bir test oldugunu, Turgut ve ark. (1997) da GA lestlnin sadece l,)i d-delli pasif transfer yelmezliginin belirlenmesinde oldukya duyarh bir test olduQunu belirtirken,
Hop-kins ve ark. (1984) GA teslinin koruyucu IgG se· viyelerinin (>1600 mg/dl) belirlenmesinde larlll,)mah olduQunu ifade elmekledir. Bu yahl,)mada, konlrol grubunu olul,)turan buzaQllann yeterli pasi' ko· lostral transfere sahip olduQu (lgG seviye1eri 3255 mgldl) ve GA tesllnin pozitil sonuc;: verdigl; de-neme grubunu olul,)turan buzaQllarln yetersiz pasif kolostral transfere sahlp oldugu ve IgG sevlyeleri 705 mg/dl olanlarda GA tesllnin lel6z, IgG se· viye1eri 375 mgldl olanlarda Ise GA teslinin negati! sonuc verdigl g6zlenmll,)hr. Buna g6re bu call1,)ma da IgG seviyeleri ile GA arasmda ters ilil,)ki oldugu l,)eklindeki g6rOl,)leri (Sandholm, 1974: Hopkins ve ark., 1984; Saikku ve ark., 1989) destekler ni·
teliktedir. Sand holm (1974) glularaldehid indeksi He plazmadaki a-globulin miktart arasmda ters
ilil,)ki oldugunu ve Onemli derecedeki hi-perglobunemlde plhtllal,)manm 1 dakikadan daha az sOrede Olul,)tugunu vurgulamakladlr. Bu ca-hl,)mada da IgG seviyesi en yOksek serumlarda plhltlal,)ma en klsa siJrede olmul,)tur.
Sonuc olarak; neonatal donem ishal va· kalannm yetersiz pasif kolostral transferle Ilgili 01-dugu; negati' ve jeloz GA test sonucu veren bu·
145
zagtlann yetersiz pasi! koloslral transfere; poziti' GA
test sonucu veren buzaQllann ise yeterli pasi' ko-lostral transfere sahip olduQu s6ylenebilir.
Kaynaklar
Aldridge, B., Garry, F .. Adams, R. (1992). Role of Co· lostral Transfer In Neonatal Calf Managmenl Failure of AcqUistion 01 Passive Immunity. The Compendenium. 14. 2.265-270.
Allen, SO., While. AD. (1985) Dairy Calt Diarrhea.
Agn-pracllce. 6. 4. 23-31.
Ba~oglu, A .. Qamkerten, I .. SevlnY. M. (1999). Serum Im-munoglobulin Concentrations in DiarrheIC Calves and Their Measurement by Single Radiallmmunodilfusion. Is·
rael Journal of Veterinary Medicine. 54. 1.9-10.
Beatson. SA .. Hilbert.BJ .. Mills. IN. (1985). The Use 01
the Gluteraldehyde Cougulahon Test for Detechon of Hypogammaglobullneamia In Neonatal Foals AUSI VeU .. 62. 279-281.
Blom. J. (1982). The Relallonshlp belween Serum 1 m-munoglobuhn Values and InCidence 01 Respiratory D I-sease and Ententls in Calves. Nord. Vet. Med. 34. 2
76-264.
Blood, DC. and Radostlls. OM. (1989). Vetennary Me -dicine. 7th Ed. Bailliere Tindall, london.
Ergam~. 0., Ate~. M., Yorlu. M., Kaya. 0 .. Istanbulluoglu. E (1988). Ishalli Buzagllardan Elde edilen E.coli Su~ lanrldan K99 Fimbria'nln Varhgl Uzeflne e,r Cah~ma DOGA TU. Vet. ve Hay. 0 .. 12. 185-190.
Han. GA., Reynolds, OJ .. Parsons, KR., Bland, AP .. Mor -gan. JH. (1988). Palhology of Calves with Diarrhea In So-uthern Britain. Aesearch In Veterinary SCience. 45.
240-250.
Heath. SE. (1992). Neonatal Diarrhea In Calves: In-vestigation of Herd Managment Practices. The Com· pendenium. 14.3,385-393.
Hopkins. FM .. Dean, OF .. Greene. W. (1984). Failure of Passive Transfer in Calves Comparasion of Field D, -agnosis methods. Modern Veterinary Practice. August. 625-628.
Muggli, NE .. Hohenbaken, WO .. Cundilf. LV .. Velley. KW. (1984). Inheritance 01 Maternal Immunoglobulin 81 co n-centration by the Bovine Neon<'lle Journal 01 Anima.l SCI' ence. 59. 1.39-48.
Penno, LJ. (1997). A Guide 10 Colostrum Managmenl In Beef Cows and Calves. Veterinary Medicine. January. 75-82.
Perino, LJ" Sutherland. RL.. Woollen, NE. (1993). Serum glutamyletransferase ActiVity and Pretein Concentration at Binh and after Suckling in calves with Adequate and Inadequate Passive Transfer of ImmunoglobulinG. Am. J. Vel. Res .. 54. 1.56-59.
Peine. L.. Acres. SO .. McCartney DA. (1984). The Yield 01 Colosi rum and Coloslral Gammaglobufin inBeel Cows
~E..'. BA~oCLU. OK. BIRDANE. GUZELBEKTA~. CtVELEK
and the Absorption 01 Colostral Gammaglobulins by
Beef Calves. The Canadian Vetennary Journal. 25. 7.
273-279.
Saikku. A., Koskinen, E.. Sandholm, M. (1989). De-tection of Hypogammaglobunemia in Neonatal Foals
using the Gluteraldehyde Coagulation Test. J, Vet. Med. B.36,168-174
Sandholm, M. (1974). A Prelimmary Report of A Rapid Method for the Demonstration of Abnormal
Gam-maglobulin Levels in Bowin Whole Blood. Res. Vel. Sci..
17.32·35,
Selim. SA., Smith, BP .. Culiar, JS., Blanchard, p"
Far-ver, TB" Hoffman, R" Dilling, G., Roden, l.. Wigenburg,
B, (1995). Serum Immunoglobulins in Calves: Their
Ef-146
lects and Two Easy. Reliable means 01 MeasUiement
Vetennary Medicine, April. 387-404.
Turgut. K. ve Ok. M. (1997). Veteriner GastroenteroloJi.
BClhtylvanlar. KONYA
Turgut. K .• Ba~oglu. A., Seviny, M., $en,
i..
Ylldll, M" Ka·leli. S. (1998). Plasma Transfusion in Calves with Failure
of Passive Colostral Transfer. Tr. J. of Veterinary and
Animal Sciences. 22,123·130.
Wittum, TE., Perino, LO. (1995). Passive Immun Status
at Postpartum Hour 24 and long·term HeCllth and
