TAV~ANLARDA MEZENSEFALON iSKEMisi MODELi
A RABBIT MODEL OF MESENCEPHALIC
ISCHEMIA
Tansu MERTOL. Unal KiRi~OGLU. M. ~erefettin CANDA. Metin GUNER
Dokuz Eyliil Universitesi TIp Fakiiltesi, Noro~iriirji (TM,UK,MG) ve patoloji Anabilim Dallan (MSC), inciraltl. iZMiR
TiirkNoro~iriirji Dergisi 2: 101-105, 1991
6ZET: Bu i;aiI~mada. tav~anda modiEiye iskemi teknigiyle olu~an naronallezyonun dagliIml gazden ge9rilmi~tir. Kontrol gmbu olarak kullamlan tav~an-Jarda.sadece sag karotid arter baglanml~tJr.Diger iki grupta ise sag karotid arter baglanmasl yamnda sol karotid artere de anevrizma klipleriyle 6 ve 12 daki-kal1kge9d klipaj uygulanmltJr. Bu ~ekilde mezense-falonda olu~an gei; naronal lezyon tetrazolium boyamasl ve histopatolojik inceleme ile gasterilmi~-tiroTammlanan teknik beyin sapl iskemisi ii;in bir mo-del olup. bu momo-delin avantajlan ve patoEizyolojisi tartJ~llml~tJr.
Anahtar Kelimeler: Arteria Karotis Kommunis.
Beyin Sapl jskemisi. Ligasyon. Tav~an.
GiRi~:
Bugiine kadar uygulanan iskemi modellerinin he-men hehe-men tamaml kortikal iskemiye yonelik olma-sma ragmen. farmakolojik ajanlann potansiyel terapotik etkilerini incelemek ie;inkronik serebral is-kemi modeli halen bulunamaml~nr (8.12).Uygulanan c;e~itliyontemlerden bazllan global iskemiye yol ae;ar-ken uzun sureli e;ah~malar i9n gerekli olan survive de uygun dii~memektedir (12).
Bu yontemler i9nde vaskiiler okliizyonla gere;ek-le~tirilen eksperimental serebral iskemi modelleri. embolizasyon veya direkt vaskuler okliizyonla sag-lanml~tlr (12.14.18).Fakat fokal iskemi hemen daima goriilmedigi gibi lezyonun boyutlan ve etkilenen be-yin alanlan da degi~ebilmi~tir. Tek veya iki tarafh ser-vikal karotid arter ligasyonu ise e;ogu hayvan rurlerinde kollateraller iyi e;ah~tlgmdan iskemiye de yol ae;maml~tlr (8). Yallllz. Willis poligonu yetersiz olan (posterior komunikan arterlerin yoklugundan dolaYl)mongol dnsi gerbillerde ligasyonla %50 ora-nmda iskemik beyin lezyonu olu~turabilmi~tir (11).
Eksperimental iskemi modellerinde. tav~an deney hayvalll olarak birkae; e;ah~mada yer almaktadlr (19.20.21).Bu nedenle Anabilim Dahmlzda tav~anlar-da iskemi modeli olu~turma e;ah~malarmaba~lanml~- . hr. Tek tarafh servikal karotid arter ligasyonu ve kar~l tarafkarotid arterin ge9d klipajlyla tav~anlarda
goz-SUMMARY : In this study. the distribution of neuronal damage following modiBed ischemia techni-que in the rabbit was demonstrated. In rabbits serv-ing as control. only the right common carotid artery was ligated. In the other two groups, the right carotid artery of the rabbits was ligated and the left one was transiently ocduded with aneurysmal dips for6and 12min respectively. Delayed neuronal damage oc-cured in mesencephalone was shown by tetrazolium staining and histopathological examination. The technique described here is a model for the study of brain stem ischemia and pathophysiology and advan-tages of this model were discussed.
Key Words: Brain stem ischemia, Common carotid artery. Ligation, Rabbit.
lenen gee;beyin sapl iskemisi modeli a~ag1da sunu-larak. modelin avantajlan ve gee; iskeminin
patofiz-yolojisi tartl~llml~nr. )
MATERYAL VE METOD
Deneylerde dns aymml yapllmakslZln izmir Ve-terinerlik A~l Kontrol Merkezinden temin edilen 15 ad et Ankara tav~alll kullalllldl. Ortalama agl!hklan 2-2.5 kg arasmda degi~mekteydi. Tav~anlar be~erli gruplar halinde iie;e aynlarak hepsinde preoperatif kan tetkiki. kan gazl ve rektal ate~ ole;iimleri yaplldl. Bir kulak veni iv SlVlve gerekirse de sodyum bikar-bonat vermek. sag femoral arter ise kan gazl ole;iim-leri i9n kaniile edildi. Supin pozisyonda yatlnlarak lokal anestezi alnnda orta hat insizyonu ile boynun iki tarafmda A. karotis kommunisler a9ga 9kanla-rak e;evresinden iki tarafh 3/0 ipekler gee;irildi. Spon-tan oda havasl soluyan hayvanlarda. fizyolojik parametrelerin stabilizasyonu i9n 5-10 dakika bek-lenerek arahkl1kan gazl olc;i.imleriyaplld1. Kontrol gru-bunda (Grupl). sadece sag karotid arter iki tarafu baglanarak kesildi. Diger gruplarda ise buna ek ola-rak sol karotid artere 6 (Grup2) ve 12 (Grup3) dakika-Ilk ge9d klipaj (ge9d Ya~argil anevrizma klipi ile) uygulandl. Deney suresince rektal ate~ lSlna lamba ile 37 C ile korundu. Metabolik asidoz ise BExkgxOJ formiiliine gore sodyum bikarbonat verilerek diizel-tildi. Deney somaSl tav~anlar normal postiirlerine
blrakllarak arahkh norolojik muayeneleri yaplldl.
Norolojik degerlendirme: Tav~anlar. ~uur,
ayak-ta duru~lanna ve ekstremite kuvvetine balGlarak ope-rasyon oncesLopeope-rasyondan hemen soma, 2, 24, 48 ve 72 saat soma degerlendirilmi~lerdir.
Tetrazolium He boyama: Ligasyondan 72 saat
soma iv sodyum pentobarbitat ( 50 mg/kg ) verile-rek tav~anlann beyinleri ~lkanldl. Kollikuluslar sevi-yesinden ba~lanarak one ve arkaya dogru 4-5 mm
lik koronal kesitler almdl. Kesitler non-spt. ik NADH aktivitesini a<;1ga<;1kartrnaki9n Nitroblue tet-razolium ile inkube edildi. inkubasyon solusyonu, 10 ml 0.2 M Tris-Hcl, 10 ml % 0.4 Nitroblue tetrazoli-urn, 4 ml %1Magnezyum klorid ve 8 ml distile su i~e-riyordu. Tetrazolium bu solusyona katllmadan once 0.5 ml N,N Dimetil formam id i~inde ~ozdiiriildii. Bu soliisyonda 30 dk tutulan kesitler boyandlktan son-ra 48 saat siireyle %10 formaldehit i~inde bekletildi. Daimi kaYlt i9n fotograflan almdl.
Histopatolojik inceleme: Tetrazolium
boyama-smda iskemi goriilen kesitler ile kontrol grubundaki aym yerden ge~en kesitler histopatolojik inceleme-ye ahndl. Kesitler parafine yatmlarak. ahnan ince ke-sitler hematoksilen-eosin ile boyanarak mikroskopik tetkikleri yaplldl.
Tablo I : Kan Parametrelerinin
kar~lla~tmlmasl
GRUP I GRUP II GRUP III Eritrosit 4.86 + 0.305.12 + 0.105.43 + 0.16 (x 1 milyon) Hb 10.7 + 0.60 11.1 + 0.30 12.2 + 0.27 Htc 32.5 + 1.5833.6 + 0.6635.5 + 0.10 pre-op 84.1 + 5.1792.1 + 5.8587.4 + 2.08 p02 post-op 83.8 + 5.3890.0 + 4.8887.4 + 1.70 pre-op 30,8 + 2.7329,8 + 0.9228.6 + 1.08 pC02 post-op 31.0 + 2.8330.9 + 0.5728.3 + 1.00 pre-op 7.43 + 0.017.46 + 0.017.39 + 0.02 pH post-op 7.43 +0.017.46 + 0.017.40 + 0.13* Ortalama +standart hata olarak verilmi~tir.
Tetrazolium He boyama: Nitroblue tetrazolium
ile boyanan koronal kesitlerde kollikulus kaudalis dii-zeyinde normal boyanan mor renklerin yanmda a<;1k pembe renkte uniform olmayan iskemiyi gosteren alanlar ~ekil l'de gosterilmi~tir. Kontrol grubunda
istatistik metod: SonuQar Student-t testine go-re kar~tla~tmldL
SONUC;LAR
Kan parametreleri: Her ii~ gruptaki tav~anlarm
ortalama hemoglobin (Hb), Hematokrit (Htc), Eritro-sit (E) degerleriyle pre- ve post-operatif kan gazlan tablo l'de gosterilmi~tir. Aym grub un pre- ve pos-toperatif p02, PC02 ve pH degerleri arasmda anlamh bir fark bulunmadlgt gibi kontrol grubuyla diger grup-lar arasmda da angrup-larnh farklthk goriilmemi~tir (p> 0.05 ). Sadece 1. ve Ill. gruplann Hb degerleri arasmda p<0.05 bulunmu~ olmasma ragmen iskemi olu~an grupta Hb daha yiiksek oldugundan sonucu etkile-yecegi dii~iiniilmemi~tir.
Norolojik degerlendirme: Operasyondan hemen
soma bile ~uurlan hi~ bozulmayan tav~anlarm post-operatif 30-60 dakika kadar bir ko~ede sakin durduk-lan gozlenmi~tir. ilk saatlerde on veya arka ekstre-mitelerinde goriilen minimal pareziler daha somadan ortadan kalktlgmdan operasyon slrasmda supin po-zisyonda yapllan tesbite baglanml~tlr. Bunun dl~m-da ~uur, kuvvetsizlik ve postiir a<;1smdl~m-dankaydl~m-da deger bir degi~iklige rastlanmaml~ttr,
102
~ekiI 1 : tetrazolium boyama ile kollikulus kaudalis diizeyinden ge· ~en kesitlerde daha az boya tutan (A9k renkte goriilen) yer· ler iskemi alanlanm gostermektedir.
Grup 1 (kontrol) ortada, Grup 11(6 dk geQci klipaj) solda, Grup III (12 dk ge~ici klipaj) ise sagda goriilmektedir.
(ortada gorulenler) bu bolgede boyanma azhgl gorul-mezken. grup II'de (solda gorulenler) 4. grup IIne ise 5 tav~anda iskemi alanlan gorulmu~tur. Diger kesit alanlan normal olup iskeminin sadeee mezensefalon-da oldugu gozlenmi~tir. iskemi gorulme oranlan kar-~lla~tmldlgmda(kontrol grubuyla) anlamh bir farkhhk bulunmu~tur (p<.O.OI).
Histopatoloji: Tetrazoliumla daha aQk renkte bo-yanan kesitlerde sitoplazmanm koyu eozinofilik. nuk-leusun ise koyu bazofilik oldugu ve perikaryon un bu bolgelerde daha e;:okue;:gen~eklinde hakimiyeti iske-miye uyar bulgular olarak degerlendirilmi~tir (~ekil 2). Kontrol grubunda ise bu degi~iklikler gozlenme-mi~tir.
Yapllan e;:ah~madamortalite gorulmemi~tir.
~eki12 : Histopatolojik incelemede stoplazmada homojenizasyon ve asidofilisinde artl~. hiicrede biiziilme, koyu kromatinize nukleus ve Nissl cisimciklerinin belirsiz olmasl iskemiyle uyumludur (HE.x50)
TARTI~MA
Fokal serebral iskemi. serebral vaskuler hastahk-ta. serebral kan akunmm intraoperatif gec;:idolarak ke-silmesinde veya lokalize bir kitlenin beyine kompres-yonunda gOrlilebilenve bolgesel iskemik odemden in-farkt geli~imine kadar bir dizi olaylar zindrini ba~la-tan tetik mekanizmas1dlr (6). Norolojik lezyonun de-reeesi. kollateral kan aklmmm etkinligine bagh oldu-gundan ana serebral arterin bile ani okliizyonu hemen daima serebral enfarkta yol ac;:mamaktadlr(9). Bu ne-denle fokal iskemide komplet iskemi olabildigi gibi is-keminin hie;:olmamasl da olagan bulgudur (6.9).
Tetik mekanizmasl olu~turdugundan patofizyolo-ji ve farmakolopatofizyolo-jik ajanlann etkilerini ineelemek ic;:in foka!serebral iskemi modelleri iizerine c;:ah~malarUZUll yillardlr devam etrnektedir (8.18). Terdh edileeek mo-delde; uygulamanm kolay olmasl. anesteziye bagh de-gi~ikliklerin minimuma indirilmesi. gec;:idokliizyon olu~turabilme yetenegi. iskeminin aym bolgede
olu-~abilmesi ve patofizyolojik e;:ah~malarie;:inhayvanla-nn yeterli siire hayatta kalabilmeleri aramlan ozelliklerden birka9dlr. Uygulamamn kolay oldugu ve anestezi gerektirmedigi tek giri~im ~ekli servikal ka-rotid arter ligasyonu olmasma ragmen e;:oguhayvan llirlerinde kollateraller iyi geli~tiginden sadeee ligas-yonla beyin sirkiilasyonunda belirgin degi~iklik ve is-kemi olu~turulamaml~tJr (7.13.17). Sadeee bazl eins gerbillerde Willis poligonu yetersiz oldugundan uni-form olmayan hemisferik iskemi gozlenmi~tir (5.11).
Tav~anlarda iskemi modelleri az e;:ah~lldlgmdan karotid ligasyonu modifiye edilerek c;:ah~mamlzdauy-gulanml~tJr. Uygulama genel anestezi gerektirmemek-tedir. Boy Ieee anestezinin riskleri. anestetik maddelerin iskemi iizerindeki etkileri ve post-operatif erken donemde norolojik degerlendirmeleri engelle-mesi ortadan kalkmaktadlr. Tav~anlarda. diger hay-vanlarda problemli olan iv serum takllmasl ve femoral arter kateterizasyonu bile sadeee lokal anes-tezi ile rahatl1kla yapllabilmektedir. Hayvanlar genel-likle ~uur ve ayakta duru~lanna gore degerlendirildiklerinden anestetik ilae;:ve kas gev~e-tidier ters etki yaratrnaktadlr (17). Trakeostomi ve en-tubasyon gerekmediginden post-operatif donem daha rahat gee;:mi~tir.Sadeee karotis diseksiyonu Slrasm-da bazen trakea irritasyonuna bagh gee;:icisolunum etkilenmesi olabildiginden ligasyon oneesi bir siire beklenilerek kan gazlanyla takip etrnek gerekmekte-dir. Ozellikle iskemi modeli e;:ah~malannda kan gaZl ole;:iimleriolduke;:aonem kazanml~tJr. Aynea bu mo-delde. direkt giri~im soz konusu olmadlgmdan ope-rasyona bagh lokal eevap degi~ikligi. kanfbeyin engelinin permeabilite degi~ikligi ve direkt kortikal hasar da olmamaktadlr (13.17).
Boyamada kullamlan tetrazolium. dehidrojenaz-lann histokimyasal tayininde yaygm kullanllan bir en-dikatordiir (3). Havanm bulundugu ortamda 02 radikali tetrazolium tuzlannm gere;:ekrediiktamdlr. NADH aktivasyonu varsa tetrazoliumla boyanma 01-maktadlr. infarktta hie;:boyanma olmazken iskemi-de daha az boya almaktadrr. TTC (Tmenil tetrazolium klorid) ve diger tetrazolium tuzlan daha oneeleri kul-lamlml~tJ(1).Daha kolay temin ettigimiz ie;:inbiz e;:a-h~mamlzda Nitroblue tetrazoliumu Lye ve ark. (12)
nm bahsettigi inkubasyon solusyonunda kullandlk. Bu metod iskemi alanlanmn makroskopik goriinme-sini sagladlgmdan iskemi e;:ah~malanm daha kolay-la~tlrml~tJr. <;:ah~marmzdada bu boyama metodu ile patolojik degerlendirme arasmda tarn bir uygunluk bulunmu~tur.
Asidofilik noronlann goriilebilmesi ie;:iniskemik olaydan soma en azmdan 16 - 18saatin gee;:mesige-rekmektedir (14).
Ge~ noronallezyonda ise hiiaesel degi~iklikler a9-smdan 3-4giinliik bir siirenin ge~mesi uygundur (5). Servikal karotid arter end-arter 0lmad1gmdan ve di-ger ligasyon ~ah~malannda da infarkt goriilmedigin-den ge~ iskemiyi gozlemek amaClyla ~ah~mam1zda beyinin kesitlerinin incelenmesini ii~iincii giiniin so-nunda yapmaY1 terdh ettik.
Patofizyolojik a~ldan bak1ld1gmda bu ge~ iskemi iki ~eki1deac;Jklanabilmektedir ; ge~ iskemirlirl nedeni ya ge~ bir hipoperfiizyondur. ya da bu lokalizasyon-daki noronlar iskemiye daha ~ok hassastu. Resirkii-lasyonun iki tarafh karotid okliizyonu sonraS1ge~id klipaj uygulanan tarafta saglanmas1yla 0 tarafta nor-mal perfiizyon basmcmm temini. ge9d olarak. ah
mm yeniden olu~masma bir engel olu~turacak veya ge~ici hiperemiden dolaY1 doku perruzyonunda se-konder azalmaya yol a~acakhr. Bu ge~ hipoperfiizyo-nun bir nedeni ise de. baz1lan bunun doku asidozundan kaynaklanan vazo paralizi ile ac;Jklamak-tad1r (10).Pulsinelli ve arkada~lan (15)ise serebrovas-kiiler liimenin, odeme bagh olarak glial. endotelyal. perivasktiler astroglial pro~eslerirl ~i~mesirldenve pla-telet veya astrositlerin agregasyonunun artrnasmdan dolaY1komprese olabilecegini ve artrn1~ diiz kas to-nusunun da bunda etkili olabilecegini belirtrni~lerdir. Bu lokalizasyondaki noronlann iskemiye daha ~ok hassas (vulnerabilite) olmas1 da patofizyolojide diger bir a~lklama tarz1d1r.Noronlar arasmda iskemik no-ronal yaralanma a~lsmdan bir hiyerar~i sozkonusu-dur. Selektif olarak iskemiye hassas noronlar oncelikle etkilenerek iskemik noronal yaralanmanm olu~masmda anahtar rol oynarlar. Nitekim Araki ve ark. (2)gerbillerde iki tarafh ge9d karotis klipaj1 son-raS1inferior kollikulus ve hipokampusun cA1 sekto-riiniin ilk 5 dakikahk klipaj sonrasmda etkilendigini ve buralann en hassas bolgeler olduklanm belirtrni~-lerdir. Lezyonun ilerlemesi gozoniine almd1gmda da medial genikiilat dsim ve inferior kollikulusta daha ruzh ilerledigini gostermi~lerdir.
Yaptlglm1z~ah~mada goriilen ge~ iskemiyi detayh a~lklamak i~in gerekli kan akIm1 ve 45 Ca otoradyog-rafi ~ah~malan ne yaz1kki yapllamam1~hr. Yalmz bu bulgularla yine de bir a~lklama yapabilmek 0lanag1 vard1r. Brehmer ve ark. (4) tek tarafh karotis arterin bagland1g1 tav~anlarda. on sirkiilasyondan ~ok arka sirkiilasyonun ~ah~hgml ve 0 tarafta kaudal kommu-nikan arterin geni~ledigini gostermi~lerdir. Yaptlgtm1z ~ah~ma dii~iiniilecek olursa ligasyonun yap1ld1g1sag tarafta kaudal kommunikan arter sag hemisfere da-ha ~ok kan ta~lyacagmdan beyin sap1dada-ha az kan al-maktad1r. Diger taraftan ge~id klipaj uygulanan sol tarafta perfiizyona olanak saglanmca yukanda bah-sedilen resirkiilasyona bagh degi~iklikler
olacaknr.No-104
ral ve vaskiiler dokulardaki degi~iklikler hem iskemi donemi hem de resirkiilasyon donemindeki seliiler olaylardan etkilenmemektedir (15). Yaphgim1z hipo-tansiyonlu ikirld bir iskemi ~h~masmda iki tarafh ka-rotis arterin bagland1g1 tav~anlarda bu bolgede iskemiye rastlamad1gim1zdan bu ~ah~mada goriilen iskemik noronal degi~ikliklerin tek ba~ma karotid li-gasyonundan kaynaklanmaY1p bunda reperruzyonun da etkileri oldugu inanClndaY1z.
Sonu~ olarak. baz1bolgelerden kollateral akIm 01-dugui~in serebral kan akImmdaki art1~m iskemide etkisi olabilecegi ve iskemi dansitesirlde demiklik go-riilebilecegi gibi baz1 dezavantajlarmdan bahsedilme-sine ragmen, i~lemin anestezi gerektirmeden yap1labilmesi. iskeminin aym bolgede yer almasl. di-ger biiyiik hayvanlara nazaran daha kolay ve ucuz te-min edilmesi gibi avantajlan da sozkonusudur. Ustelik. bugiine kadar genellikle hemisferik iskemi ~ah~malan yap1ld1gindan beyin sap1iskemisi ~h~ma-lanna on - ayak olmas1 a~lsmdan da onemli oldugu inanClndaY1z.
YaZl~ma Adresi: Yrd. Do~. Dr. Tansu MERTOL. Dokuz Eyliil bniversitesi TIp Fakiiltesi N6ro~iriirji Anabilim Dah
35340. inciralt! IiZMiR. Tel: (9 - 51) 59 59 59I 33 02.
KAYNAKLAR
1. Aksoy K. Korfah E. safi i ve ark.: Orta serebral arter okliizyonu somaSI fokal serebral iskemi. Teknik ve n6ropatolojik inceleme. U.b.T.F. Dergisi 15:127-134. 1988
2. Araki T. Kato H. Kogure'K: Selective neuronal vulnerability fol-lowing transient cerebral ischemia in the gerbil:distribution and time course. Acta Neurol Scand 80:548-553. 1989
3. Astrup j.Srensen PM. Srensen HR: Inhibition of cerebral oxy-gen and glucose consumption in the dog by hypothermia. pen-tobarbital. and lidocaine. Anesthesiology 55:263-268. 1981 4. Brehmer VA. Beleites B:The morphology of the circulus
arterio-sus cerebri of the rabbit and its changes following unilateralli-gation of the common carotid artery. Anat Anz Jena 167:297-300. 1988
5. Crain BJ. Westerkam WD. Harrison AB. et al: Selective neuro-nal death after transient forebrain ischemia in the mongolian gerbil: A silver impregnation study. Neuroscience 27:387-402.
1988
6. Dempsey RJ.Roy MW. Meyer KL. et al: Indomethacin-mediated improvement following middle cerebral artery occlusion in cats. J Neurosurg 62:874-881. 1985
7. Ekl6ff B. Siesj6 BK:The effect of bilateral carotid artery ligation upon the blood flow and the energy state of the rat brain. Acta Physiol Scand 86:155-165.1972
8. Garcia JH: Experimental ischemic stroke: A review. Stroke 15:5-14. 1984
9. Hossman KA. Schuier FJ: Experimental brain infarcts in cats. I. Pathophysical observations. Stroke 6:583-592. 1980
10. Kagstre6m E. Smith ML. Siesj6 BK: Cerebral circulatory respon-ses to to hypercapnia and hypoxia in the recovery period follo-wing complete and incomplete cerebral ischemia in the rat. Acta physiol Scand 118:281-291. 1983
11. Levy DE. Brierley JB: Communication between vertebrobasilar and carotid arterial circulations in the gerbil. Exp Neurol 45:503-508. 1974
12. Lye RH. Shrewsbury GJ. Slater P et al: Rat middle cerebral ar-tery occlusion: use of evoked potentials and tetrazolium staining to assess chronic ischemia.JNeuroscience Methods 22: 133-139. 1987
13.Mendelow AD, Graham DJ, Moculloch J et al: The distribution of ischeamic damage and cerebral blood flow after unilateral ca-rotid occlusion and hypotension in the rat. Stroke 15:704-710, 1984
14.Nedergaard M: Mechanisms of brain damage in focal cerebral ischemia. Acta Neurol Scand 77:81-101. 1988
15. Pulsinelli WA, Brierly JB, Blum F:Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia. Ann Neurol 11:491-498. 1982
16. palsinelli WA, Levy DE. Duffy TE: Regional cerebral blood flow and glucose metabolism following transient fore brain ischemia. Ann Neurolll:499-509, 1982
17. Smith ML, Bendek G. Dahlgren N et al: Models for studying long-term recovery following forebrain ischemia in the rat. 2.A 2-Vessel occlusion model. Acta Neurol Scand 69: 385-401. 1984 18. SuzikiJ.(Ed):Treatment of cerebral infarction: Experimental and
clinical study. Wien: Springer-Verlag 1987. pp 9-13
19. Takashima S. Ando Y. Takashita K: Hypoxic-ischemic brain da-mage and cerebral blood flow changes in young rabbits. Brain Dev 8:274-277. 1986
20. Ta~dernirogJu E. ~ekerd z: iskemi somaSl kan beyin bariyeri per-meabilitesinin kantitatif olarak 61~iilmesi. Tiirk N6ro~iriirji der-gisi 1:57-64. 1989
21. Yamamoto K. Yoshimine T. Yanagihara T: Cerebral ischemia in rabbit: A new experimental model with immunohistochemical investigation. JCereb Blood Flow Metabol 5:529-536. 1985
