KOBAYLARIN SİNDİRİM KANALI ORGANLARI VE PANKREASLARI İLE TİROİD, PAHATİROİD, HİPOFİZ VE ADRENAL MEDULLA LARI VE BÖBREKLERİNDE CALBİNDİN DAĞILIMININ İMMUNOHİSTOKİMYASAL YÖNTEMLE BELİRLENMESİ

v-ı.Bil.Üerg./2UOl},17,3 : 117-122

K

OBAY LARIN Si

NDiR iM

KA

NALIORGANLARı

VE

PAN

KREASLARı

i

LE

Ti

ROi D

,

PARA

TiROiD,

H

ipofiz

VE ADRE

NAL

MEDU

LLALARI V

E

B

ÖBREK LERiN DE CA

LB iNDiN

DAGI

LlMININ

i

MMU NOH iSTOK iMYASA L

Y

ÖNTEMLE BEL

iRLENMESi

Berri

n

Gençer

Tarakçı

1

Se

ma

Tt

murk

een w t

Immuııohistochemi cal

Det

er m inu tion

o

f Ca

lb i

nd

in Distri

bution in

G

as trointestinal

Tr

a ct Or

gans a

nd

Pan

crea s, and

in H

ypophys

is,

Adrerıal

Medu

lla

a

nd

Kidn

eys

of

G

u

i

nca Pigs

Özel: Tavuk duodenumundaki calbindin-D 28 k' ya karşı hazırlanmış olan antiserum kuııanılarak, im-munohiskokimyasal yöntemlerle calbindininkoc ayıa nn bazı endokrinbezleri{tir cid. paratiroid, hipofiz,adren ] ve sin-dirimkanalı epiteli ilepankreasların veböbreklerindekidağılımları incelendi.Paratirold.adren,ileum ve kolonda spe-sifik immunoreaktiviteye rastlanmadı. Bununla beraber, immunareakliviteye böbrek tubuluslannda, pankreasın endokrin hücrelerinde,liroidde, hipofizde,mide ve duodenummukozasında rastlandı. Budağılım tarzıdikkalealınarak calbindinin,inlrasellüler ve ekslrasellüler ortamlardakikalsiyum hemostazisindeveya endokrinhücreuyanlmasını dü-zenleyen kalsiyummekanizmasında ro!aldığısonucunavanldı.

AnahtarKelim eler: Calbindin, endokrinbez,endokrinhücre

Summary:Thedistributionolcalbindin in thyroid,parathyroid, piluilary andadrenals,and in gastrointestinal tracl epil-helium,pancreas and inIhe kidneyhas been investigatedimmunohistochemicallyusing an antiserum raised agains!

the 28kDacalbindinfromchickenduadenum.Epithelialcels of paralhyroid,adren,ileumand calantailedtoreact with theantibodies ,atthouqh ımmunoreactıvıty was found in kidney tubu!es,panereaneendocrine ceus. thy roid. pituitary and in theepithelial cells of slomach and duodenalmucosa. ThisJocalizalian is suggestedtobe in arole forcalbindin in Ihemechanisms ofcaıcrum mediated enoocnne cell situmulalion orof intracellular and extracellular calcium

ho-meos

tas!s

.

Key Words:Calbindin. endocrinegland,endocrine cell

Giriş

intra sellül er kalsiyum , hücresel uyarı iletiminde anahta r rol oyna r ve etkinliğ i intrasellüler kalsiyum bağlayan proteinler ile düzenlenir (Christakos ve ark.,1999: Darwin ,199 1).

Calbindin-D 28k, kalsiyum bağlayıcı pro-teinlerden birid ir

(

Ch rista kos

ve ark., 1989) ve ilk kez tavuklannbağ ı rsa k mukozasındaizoleedilmiştir

(Wasserman ve Taylo r, 1966).

Kanatlı bağırsağı ndaki epiteüyat

10-kahzesyonuna

ilaveten ,calbindin-O2gk memelilerin ve kuşla rın

p

erttera l

ve sentra l sinir sisteminde de bulunmuştur (Saimb ridge ve

ark.,

1982 ;

Chnstakos

ve

ark.,

1989; Suchan,1991; Houghton,1992). Cal-bindin-D 28k' nın beyinde

"intrasellüle

r

Ca+2

tam-p

onu"

benzeri bir fonksiyon gördüğüne ina-nılmaktadı r (Ch ristakos ve ark., 1989; Sloviter, 1999: Darwin, 1991; Matıson ve ark., 1991

L.

Su

tampon etkisiyl e de aşırı, uyarıma bağlı olarak int-raselüler ortamda artan kalsiyumun nörotoksik et-kisinden hücrele rikoruduğudüşünülmektedi r.

Sini r sistemindeki lokaHzasyonuna ilave ten, calbindin-D 28k'ya bazı kanatlı ve memeli türlerinin bazı endokr in tıezterlnce, mide, bağ ı rsak ve pa

nk-reaslarındaki diff üz

n

öroendokrin

sistem

h

ô

c

-telerin

de

de rastlanm ı ştır (Mclntosh ve ark., 1986 ;

Pochet

ve ark., 1987; Pochet ve ark., 1999;

In-panbut

r

ve Taylo r, 1989 ; Zabe l ve Sehafe r, 1989 ; Rhoten ve chrıstakos.tasö,

Bmoets

ve ark., 1991; Shamley ve ark., 1992 ; Johnson ve ark., 1994; Wang ve

Christakos.

1995; Bourlonve ark.,1996; Van

Baa!

ve ark.,1996).

Bu çalışmada

calbincin-D

28k' nı n, kobayların

tirold.

pa

ratirold

.

hipotiz

,

pankreas ve adren gibi en -dokrin sistem organlarından alınan doku ör-neklerinde,mide ve bağırsak epitel hüc relerinde ve

GC'li şTarihi:::!J.03.200i 0.\.s umurka a ntsı bounail.corn

TARA KÇı.TiMURKAAN

böbreklerdeki

dağılımı

incelendi. Bu p

roteinin

lo-kal

izasyonu

hakkında

elde edilecek olan bilgiler

kal-s

iyum

metabolizması

ile

yakından

i

lgili

olduğundan,

bu

çal ı ş mada

calb

indinin

nö

ronla

rda

olduğu

gibi

en-dokr

in

sistem hücreler

inde

de "

intrasellüler

Ca

+

2

t

amponu" ben

ze

ri

fonksiyon görüp

görmediği araş­ tmldı.

M

a

tery

al v

e

M

e

tot

Araştırmada ,

deney

hayva n ı

ola

rak

2'si e

rkek

,

2's

i

dişi

dö

rt adet erg

in

kobay

kullan ıldı.

Gene

l

anes-t

ezi

altı nda

k

obaylard an

alınan

doku örnekleri (tiro

id,

par

atirold.

tupoftz,

böbrek

,

pankreas

,

mide ve ba

-ğırsaklar),

f

osfat

tampon u ile

hazırlanan

%10'luk

formo

!

(

pH

7

,

2) ile t

espit

edilerek

yıkama işlemine

ta

bi tutu

ldu.

Dehid

rasyon

ve bloklama

işlemlerinden

s

onra

b

loklardan

5 urn

kalınlığında alınan

kesitler

,

ön

ceden krom alüm-jelatin

le

muame

le

edilen la

m-l

a

r

a

alındı.

im

munohistokimyasal

B

oyama

"lmmunoperok-s

idaz

Metot

"

ile

yapıldı.

Calbindi

nin

immuno-h

istokimyasal

yolla demonstrasyon u, avidin-bietin

hor

serodish peroksidase (ABC- HRP))

tekniği

ku

l

-lan ılarak gerçekleştirildi.

Kesit

ler

deparaf

inize

ve

dehid

re

edildikten

son

ra

0,1

M fosfat buffer sa

lin

(PBS), p

H

7

.2

içinde

1

0

da

kika

bekletildi

.

Takiben endojen

peroksidazı

b

lo

ke

e

tmek

i

çin metanolde

hazırlanan

%D

.3'lük

H20 2

kullanıldı

(30 dk)

.

Kesitler PBS ile

i

ki kez

yı-kandıktan

sonra primer antise

rum ,

mous

e a

nti

-Calbindi n-D 28k (Sigma

)

ile 16-20 saat s

üreyl e

4

"

C

de inkube edildi. Prime

r

antiserum %2

.5'luk

sığı r

serum album

ini v

e %0.25 sodyum azid

iç

eren P

BS

ile 1

:1000

oranında

sulandmldt. Kesitle

r

daha s

onra

biyotin

li

keçi anti-mouse IgG

(

Sigma) ile v

e bun

u t

a

-k

ibe

n

streptavidin

-biyotinf

horserad

ish

pe

raks idaz

kompleksi (Dako

)

i

le

oda

sıcaklığnda

1

s

aat

süre il

e

inkube edi

ldi.

He

r

i

kisi de PBS ile 1

:5

0

oranında

su

-landırıldı.

Kes

itler

her inkübasyon

ö

nces

i

30 d

akika

süre

i

le PBS solüsyonu

i

le

yıkandı.

D

aha s

onra ke

-s

itler,

glukoz-oksidaz diamino b

enz idtn

mk

e! (G

DN

)

(Shu ve ark.,

1

988

)

substratına daldınlıp

s

u

i

l

e

yı­

kandı

ve eozln

il

e

boyanı p ış ı k

mik

roskobu il

e

i

n

-celendi.

Fotoğraflama işlem leri

Nik

on

ma

rka

araş­ tırma

mrkroskobu

yardımıylayapıldı.

B

ulgular

immunoh

istok

imyasal

b

oyama

sonucunda a

n

ti

-calbindin

i

le spesifik olarak r

eaksiyona

g

iren

i

m-munoreaktif

h

ücrelere,

t

iraid,

pankreas

, hi

pof

i

z

,

mide

,

d

uodenum

ve böbrekte

rastlandı.

Midenin

kareiye ve p

i

lor

us

bölge

lerinde

cal

-b

indin

immunoreaktif hücrel

eri ç

ok

sayıoaydr.

Du-odenumda ise az

sayıda rastlandı (Şeki l

1)

. he

um

ve kolonda immunoreaktif hücrel

er

g

özlenmedi.

Ca

l

b

indi

n-

D

28k pozitivitesi tiro

idin

parafolikül!er

hücrelerinde oldu

kça

güçlüydü

(Şekil

2). Calbind

in

pozitivitesl sitop

lazmada

ve

zayıf

olarak

ta ç

e-kirdekte göz

lendi.

Paratirold bez

inde

i

mmunoreaktif

Şekil 1. Kobay midesinde Calbindin-O28kimm unoreaktiviles(a klar). Immunohistokimyasalboyama,X 400.

Kchajlarmsind irim kanalıur~anl;ırın' pu nkrea sla r-ıiletiro id,pa ra ti r o id hi pııliz"e...

,

Şekil2,Tireidinparaloli kOlle r hücre lerinde Calbindin-O28kimmunoreaktivilesi(oklar).lmmuno histo kimy asalboyama.X 400.

-Şekil3,Pankreasın endokrinbölüm ündeCalbindin-O28kimmune reakt ivitesi(ok).Immu nohistokimyasal boyama,X400.

TARA KÇL TIMURKAAN

•

Şekil 4. Hipofizin adenohipofi z kısmında Calbindi n-O28k immu noreaktivi tesi (oklar). immunohistokimyasal boyama, X 400.

-Şekil5.Böbreklerintubulus distalislerindeCalbindinimmunoreaktivilesi (aklar). immunohistokimyasalboyama,X 400.

Knhavlanusind irim ka na l ı \lr~aııla rıvi,'pankrea slarıilc tiroid ,para t irnid hipuflz ve ...

.'

•

hücrelere

rastJanmadı.

Pankreas

ın

endakri

n

bö

-lüm

ünü

oluşt uran

Langerhans

adacıklarında

az

sa-yıda

ve

zayıf calbi ndm

imm

unoreaktivitesi

göstere

n

hücrel

ere

rastlandı (Şe kil

3).

Hi

polizin aden

ohipa

fiz

bö

lü

münde

de az

sa-yıda

c

albindin p

ozitivites

i

göste

ren

hüc

re

tespit

edildi

(Şeki l

4

).

Ad

rende

calb

indin

immunoreaktivitesine sahip

hücreler

g

örülmem ekle

birlikte

;

böbrekler

in

ruburus

distaliste rinde zayıfta

ol

sa

i

mmuno

re

aktiviteye

rastland ı (Şe kil 5).

Tartışma

v

e

So

n uç

Birç

ok

hor

mon direkt veya indirekt yo

lla

kal-s

iyum

metabolizmas ını

etki

lemektedir.

Bu

hor-mo

nlara

par

athor mon ve ka

lsitenin (

Copp, 1964),

sekretin,

(Is

enbe

r

g v

e

ark..

1973; Windeck ve

ark..

1978)

,

tiroto uyarıcı

h

o

r

mon (TSH)

/

tir

ele

ho

r-monları

(Sa

r

ve

a

rk

.,1

980),

gast

rin

ve

ko-l

es

i

stokinin (

Care

v

e a

rk.,

19

7

1;

C

ooper

ve a

rk

.,

1972)

,

gluk

agon

(

Birge v

e

Aviali

,

1

969),

ka

-teşotarru nler

(

Fisc her v

e

ark.

,

1973

)

ve histamin

(Kap

lan

v

e

a

rk

.

,

1976) dahildir.

Bunun

yanısıra,

bu

hormonların bazılarını

üreten endokr

in

hücre

ler,

ör

-neğin;

para

li

ra

i

d

ho

rmonu

,

tiroksin

,

T

SH

,

no

-radr

enalin ve gas

trin,

seçici ola

rak

ka

lsiyum

d

ü

-zen

leyici

hormo

n

1

,

25{O

H

)

2

D

tarafından tutulmaktad ır

(

D

eneker ve Tja

lve,

1973

;

Stumpf ve

a

rk.,

1979

;

Clark ve ark

.,

1980)

.

C

albindin' in

normal se

nt

ezi i

çin ka

n

ka

lsiy

um

dü

zeyin i dü

ze

nl

eyici

ho

rmo

nuna i

htiyaç

vardır.

B

u

p

rotein,

c

almodulin

p

rote in

ailes

inin

bi

r

ü

y

e

s

i

ol

up

ha

yvansal do

kularda

yaygındır.

Fakat bu p

rote

in

s

adec

e

bazı

türl

erin

spesif

ik

h

ücrelerin

de b

ul

u

nur

.

Bu s

ebeptendir ki

,

k

emrricnerin

retinasında

bu

-lun madığı

h

alde,

karnivorlarların retirtası

calbind

in

i

mm

u

no

r

eakti

v

i

t

esi

içer

ir

(

Verstappen

ve

a

rk

.,

1986) ve

ayn ı

zamanda beyindek

i

spes

if

ik

kortike

l

nöron

larda da c

albindinin

varlığına rastlanmıştır

(

Jand

e

v

e ark., 198

1a

;

Roth

v

e ark

.,

1

98

1

)

.

Bazı

d

okula

rd

a

örneğin

tavuk

bağırsağında

ve rat

böb-reğin de

1,

25(OH)2

D calbindin sentez

ini

dü

ze

nler.

Pan

kreas ve tavuk

böbreğind e

ise

1

,

25

(

OH b D

yokluğu nda

bile c

alb

indin

s

ente

zi

gerçekleşi r.

Be-y

inde

i

se bu prote

inin

sentez

i

için

1,25(OH

)z

D

'

ye

i

h

t

iyaç yo

ktur.

C

albindin,

bağırsak

ve böbrek

epitel

h

üc-re

lerinde

k

alsiyum

il

etiminin

gerçekleşmesi

iç

in ge

-re

klidir

(

Wasserman ve ark

.

,

1978)

.

Pank

reasfak

t

B

h

üc

r

e

le

r

inde, kalsfyurn

un

etk

isiyle

insül

in

sal-gılanmasına

y

ol

açtığı

(Roth ve ark

.,

1982),

nö

-r

anlard

a i

se intr

asellüler kal

siyum

tamp

on

u

o

l

arak

etk

i

gösterdiği

i

l

er

i

sü rül m üştü r

(Jande ve

a

rk

.,

12 1

1

981e: Jande ve ark., 1981 b

l.

insa

nlarda

ve bir çok h

ay van

tür

ler inde

olduğu

gib

i

bu

çatışmada

da

Ca

lbindin-O

2

8k

im

-muno

reaktivitesine,

kobaylarm

tirold

ve

h

ipolizl eri gibi

bazı

e

ndok

rin

bezfertnde.

mid

e

ve

pankreaslarındaki

endakrin hücre

lerinde

ve b

öbreklerind e

rastlandı.

B

u

bulgu

lara

dayanılarak

calb

indin in,

ka

lsiyum

me-tabolizması

üz

erine

etki

eden

bazı endokrin

b

ez ep

i-tel

hücrelerinde

kalsiyum

ho

meostasisinin

dü

-z

enlenmes

i

ü

zerine

etk

isinin

ola bile c eğini

ve

ya

nöronla

rda

olduğu

gib

i

endokrin hücr

ele

rd

e

d

e

int-raseüöıer

kalsiyum tampon

u

ben

zeri

bir

gör

ev

yaptığı

sonucuna

varıldı.

Bununla be

rabe r

b

u

e

ndok rin

be

z

e

pitel hüc

relerinde

(t

iroidde

C

hücrele

ri,

rmoe

oe

ECL

hücreleri

,

p

akreasta alfa ve beta h

üc re

ler

i,

hip

afizde

T

SH

hücreleri

)

salgı lanan

v

e

k

alsiyum

me

-tabolizmasında

e

tki

li ol

an hormonlar

il

e C

albindin-O

28k'nın aynı

anda

ve

aynı

h

ücrelerde

im-mu

nohistokimyasal

yöntem

lerle

be

lirlenmesinin b

u

görüşü destekleyeceği kanısındayı z.

Kay

naklar

8aimbridge,

K.G

.

,

Mille

r, J

.J.,

Park

ere

.

C.O

.

(

1982).

Ca

l-ctu

m-

binding p

rot

ein

dislrubu

lion

i

n

the

r

at brain.

Brain

.

Res.

, 2

39,

519-525

.

8i

rge

,

S.J.

,

Av

ioli

, L.

V.

(

1969).

G

lukagon-induced n

ypo-calcem

ia

in man

. J

.

Cün. Endocrinol. Metab.,

2

9,

213

-218

.

B

indels,

R.J., Hartog, A.

,

Timm

ermans.

J

.A.

,

van.

Os

.

CH.

(

199

1

)

.

I

mmunocytochemica! loc

ali

zatio

n o

l

cat-bindin-

028 calbindin- d9k and parvalbumin

i

n ral kid

ney.

Contrib

.

N

ephrol.

,

91

, 7-13

.

Bourlon

,

P.M.

,

Fau

r

e

-Dussert

,

A

.

,

Billaudel

,

B.,

Sutte

r,

B

.C

.,

T

ramu

, G

.,

T

h

omasset.

M

. (

1996).

R

elationship bel

-ween calbindin-Dgôk

ıeveıs

in the A and

B ceas

ol th

e r

at

e

ndoe

r

ine pancreas a

nd

th

e

s

ecretion

of ins

ulin a

nd

glu-caçon

:

inlluence of v

itamin

0

3

defi

ciencyand

1

.25-dihidroxyvitamin 03.

J

.

Endocrinol.

,

148

, 22

3-232.

Suchan, A.M

.J

.

(

1

991)

.

Neu

r

ofilamenl

M and

C

albind

i

n-O

28k

are present in mut

ually

exclucive s

ubpopu lalions o

f

en

lerie

neuro

ns

in Ihe r

al

s

ubmueous pl

e

x

us.

B

rain.

R

es.

,

538,171- 175

.

Care, A.D

.

,

Bruce

,

J8.,

B

odklins,

J., Ken

ny,

A

D.

,

Co

-naway

,

H

.

,

Anası,

C.

S.

(1

971). R

ole o

f pancre

ozymin-cho

lecystokinin

and st

ruetu

rally

r

elated c

ompounds as

calcitonin

sccretogogues

. E

ndocrinol., 8

9,262-27.

Christa

kos

,

S

.,

Gabrielides,

C.,

Rhoten, W.B

.

(1989

)

.

Vi·

tamin 0- depe

ndent

cafetum binding protems

: c

t iermstry,

dis

tribution

,

t

unctional

c

onsideralion

a

nd molecula

r

bi-ology. Endoc

.

Rev.

,

10,

3-26.

Clar

k.

SA

,

Stumpf W.

E

.

,

Sar

,

M.

,

d

e

L

uca,

H.

F.

,

Ta

-naka

,

Y

.(1980).

Target ceus

f

or

1,2

5 - dihydroxyvi

t

amine

03 in the pancreas

.

Cel

l

Tiss. R

es.

,

2

09,

5

15

-

520

.

Cooper

,

C

.W

.,

Schw

esinger

,

W

.H., O

ntjes,

DA

,

Man

-goup,

A

.M.,

Munso

n

,

P

.L. (

1972).

Slimulat

ion

of see

retfon

•

TARA KÇL TJMURKAAN

peptides.Endocrinol.,91,1079 -1089.

eopp.D.H.(1964).Parathyroid. caleitoninand controlof

plasma calcium. Recent Prog.Horm. Res.,20, 59-88.

Darwin,L.C.(199 1). Ca 2+bindingproteins asneuro nal

markers.Neuroscl. Facls., 2, 1·4.

Deneker. L., Tjalve. H. (1973). Distrubutlon of vita min

03: evidence of aceumulation in renal proximal tubuli

and thyroid paratollicular cells. Experientia,29, 719

-722.

Fischer, J.A., Blum, J.N., Binswanger. U. (1973) .

Pa-rathyroid

bo

n

n one

response to epineph rine :invlvo.J.

elin.Invest., 52,2434-2440.

Houghton, PE, Buchan, AM.J., Challis, R.G. (1992).

Ontogeny ol the distribut ion and coıccanzauon of Cal -bindin-O28k wilhin neural and endocrine cetls of the gastroinlest inallrac!offetaland ne on at aısheep.Regul.

Pepl.,37,73-83.

Inpanbutr, N., Taylor, A.N. (1989). Calbindin-O im -rnunolocalizatio n in developing ehicken thyroid: a light

and eleetten microscopik study. J. Histochem. Cytcc -hem.,37,487-492.

Isenberg.J.I.. Brickman.AS.,Moore.E.W.(1973).The

euectofseerutin on serumcafeturn in man.J.Clin.

En-dokrinol.Metab .,37,30-33.

Jande, S.S., Maler,

L.

Lawson. DEM. (198 1a). I

m-munohislochemical mapping of vitamin O-dependent

calcium- binding protein in brain.Nature,294,765-767.

Jande, S.S., Tolnai, S., Lawson . DEM. (1981b). Im-munctnstcchemtcat localizatio n of vitamine 0-

de-pendenl calcium-binding protein in duodenum , kidne y,

uterusand cerebellum of chickens. Histoc hemistry, 71,

99-116.

Johnson, JA , Grande, J.P., Roche, P.C., Kumar, R. (1994). Immunohislochemical ıocanzatıon of the 1,2 5

(OH}20 3 receptor and Calbindm-D 28k in human and

rat pancreas. Am. J. Physto!.,'267, 356-360.

Kaplan, E.L., Ncrberq, H.P., Sehulak, JA , Hill, B.J. (1976).The importance of the stomach inmediating h

is-tamine-induced hypocalcaemia in the rat.Metabolism ., 25.1151-1156.

Mattson, M.P., Rychlik, B., Cho, C., Christakos. S.

(1991). Evider ice for calcium -reducing and e

xcito-protective roles for the calcium·binding prote in Cal -bindin- O28k incultured hippocampal neurons. Neuro n,

6.4 1-51.

Mclntosh,J.E.,Bourdeau,J.E.,Taylor,A.N.(1986).I

m-munohistochemical localization of calbindin-D28k during the development of the rat nephron. AnaL. Rec., 215,

383-389.

Pochet,R.,Ptpeteers,D.G.,Malaise,W.J . (1987).Ca

l-bindin0-27 kOa: preterential localization in non-B cells

of therat pancreas.Biol.Cell.,61, 155-161.

Pochet.R, Blachier, F., Malaisse. W., Parmentier,M., Pasteels.B.,Pohl,V.,Besibois,A.,Rogers,J., Roman,

A (1989). Calbindin D 28 in mammalian brain. retina

and endoc rine pancreas: immunohistoche mical

com-parison with ca!retinin. Adv. Exp.Med. Biol., 255, 435-443.

Rhoten, W.B., Christakos, S. (1990). Cellular gene exp

-ress ion for calbind in-D2 8 K in mouse kidney.Anat. Rec..

227,145-15 1,

Rolh, J., Baetens, D., Norma n, A.W., Garcla- segura, L.M . (198 1). Specific neurons in chick cent ral netvous

system stain with an antibody againstchick intestinalvi·

tamineO, depen de nlcalciurn bindingprotein.Brain Res.,

222,452 -457.

Roth,J., Bonner-Weir,S.,Normarı. A.W.,Orci, L. (1982). Immmu nocytoch emis try of Vitamin D-dependenl calcium

bindingproteininchickpancreas:excıustve loea lizationin

B-cells. Endoc rino logy,110,2216-2218.

Sar,M.,Stu mpf,W.E.,de Luca, H.F.(1980). Thyrot ropes

in the pituitaryare la rgel cells for 1,25-dihydrox yvitamin

03.Cell.Tiss.Res.,209,16 1-166.

Slovite r, R.S.(1989). Calcium-binding protein ( Calbindin-D 28k) and parvalbumin immunohistochemistry: 1

0-calizetion in the rat hippocampus wilh specific reterence

to the setective vulnerability of hippocampat neuron s to seızureactlvlty.J. Comp. Neu rol.,282,183-196.

Shamley, D.R., Qpp erman. L.A, Buttenstetn, R.. Ross, F.P. (1992). Qnlog eny ol calbindin-028K and calbindin

-D9K in the mouse kidney, duodenum, cerebellum and

placenta. Development. 116, 4 9 1-496.

Shu, S., Ju, G., Ean, L. (19 88). The glucose oxida s

e-DAB-nickel met hod in peroxidase histo chemistry ol the netvous system.Neurosci.lett.,85,169-171.

Stumpf,W.E.,Sar,M.,Reid,FA(1979) . Targel cells for

1,2 5· dihydro xy vitam ine 03 in intestinal tract, stom ac h,

kidney, skin, pituita ry and parathyroid. Science, 206,

1188-11 90

Van,Baal,J.,Yu, A., Hartog,A., Frensen.J.A.,Willems,

P.H.,Lytto n. J., Bindels,R.J . (1996).Loca!izalion and re -gulation byvita min D ofcalcium transportproteins in

rab-bit cortıcet collecting system. Am.J. PhysioL, 271, 985·

993.

Versta ppen, A, Parm enl ier, M., Chirnoaga, M., Lawson.

DE M., Pasteels, J.l., Pochet , R. (1986). Calcfum bin

-ding protein immunoreactivity in human relina. Op

h-thalmic Res.,18,209-214

Wang, Y.Z.,Christakos,S. (1995) . Hetiorucacid regulates

the expresston of the cafeturn binding protein, calbi ndin

-D28K. Mol. Endoerinol,9,151 0-152 1.

Wasserman, R.H., Taylor, AN. (1996). Vitamin 03 i

n-duced calcium-bindingprotein in chick Intestinalmucosa.

Science, 152, 791- 793.

Wasserman, R.H.,Fullmer, C.S.,Taylo r,AN.(1978).V

i-tamin D depe ndenl calcium binding proteins.ln: Lawson

DEM (ed)Vila m inO.Academic Press .London,133- 166_

Windeck,R.,Brown, E.M.,Gardner,O.G .,Aurbac h.G.O.

(1978) . Effecl of gast rointestin al hormo nes on isoıated

bovine parathyroidceus.Endocrinolo gy , 103, 2020 -202 6.

Zabel, M., Schater, H. (1989). Imm unocyl ochemical 1

0-calizationof vitamin O-dependentcalcium- bind ingprotein (calbindin ) in thy roid parafollicu lar cens ol guinea pig. Bone Miner,7, 107·112.

122