69
(*)Bu çal›flma “26 th Annual Congress of the European Society of Mycobacteriology” (‹stanbul, 26-29 haziran 2005)'da sunulmufltur.
Aydan Özkütük, Hüseyin Çoban, Nuran Esen
Türk Mikrobiyol Cem Derg (2007) 37 (1) : 69-70
© 1993 Türk Mikrobiyoloji Cemiyeti / Turkish Microbiological Society ISSN 0258-2171
‹letiflim / Correspondence: Aydan Özkütük Adres / Address: Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji AD. ‹nciralt› 35340 ‹ZM‹R Tel: 0. 232. 4124510 Fax: 0. 232. 2599723 E-mail: aydan.ozkutuk@deu.edu.tr Dokuz Eylül Üniversitesi T›p Fakültesi Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dal›, ‹zmir.
Mycobacterium tuberculosis’in izolasyonunda
Lowenstein-Jensen besiyeri ile Bactec 460TB sisteminin
karfl›laflt›r›lmas› (*)
Say›n Editör,
Tüberküloz hastal›¤›n›n kontrol alt›na al›nmas›n-da h›zl› tan› büyük önem tafl›maktad›r. Molekü-ler testMolekü-lerdeki geliflmeMolekü-ler h›zl› tan› için ümit ve-rici olmakla birlikte halen bu konuda alt›n stan-dart kültür yöntemleridir. Kültür amac› ile en s›k kullan›lan besiyerlerinden biri Löwenstein-Jensen (LJ) besiyeridir. LJ besiyeri ucuz ve güvenilir bir besiyeri olmakla birlikte izolasyon yaklafl›k 3-4 haftal›k bir sürede gerçekleflmektedir. BACTEC 460TB sistemi izolasyon, identifikasyon ve anti-biyotik duyarl›l›k testlerinin uyguland›¤› bir sistemdir ve bir çok laboratuvar taraf›ndan kulla-n›lmaktad›r (1,2). Bu çal›flmada befl y›ll›k bir sü-rede her iki kültür sistemi ile M. tuberculosis' in izolasyon sürelerinin karfl›laflt›r›lmas› amaçlan-m›flt›r.
Çal›flmada Ocak 2000 ile Nisan 2005 y›llar› ara-s›nda tüberküloz flüpheli hastalardan toplanm›fl olan ard›fl›k 9960 klinik örnek incelemeye al›n-m›flt›r.
Steril olmayan bölgelerden al›nan örneklere de-kontaminasyon-homojenizasyon ifllemleri uygu-lanm›fl, bu ifllem sonras›nda örnekler yo¤unlaflt›-r›larak, her örnek için iki LJ besiyerine 0.1'er ml ve BACTEC 12B besiyerine 0.5 ml miktarlar›n-da inokule edilmifltir. LJ besiyerleri her hafta
kontrol edilerek alt› hafta süresince 37ºC'de in-kübe edilmifltir. BACTEC 12B besiyerleri 37ºC'de alt› haftal›k inkübasyon süresinin ilk üç haftas›nda haftada iki kez, sonraki üç haftada ise haftada bir kez olmak üzere sistemde okutul-mufltur. Üreme indeksi 10'a ulaflan besiyerleri günlük olarak takip edilmifltir.
Kültürlerde üreme oldu¤unda aside dirençli bak-teri varl›¤› kinyoun boyama yöntemi ile do¤ru-lanm›fl, identifikasyon amac› ile BACTEC NAP (P-nitro-alpha-acetylamino-beta-hydroxy-propiop-henone) testi uygulanm›flt›r.
Hastanemiz laboratuvar›na befl y›ll›k süre içinde gönderilmifl olan 9960 klinik örne¤in 345'inden (%3.4) M. tuberculosis izole edilmifltir.
M. tuberculosis izole edilen örneklerin %77.5'i solunum yolu, %22.5' i solunum yolu d›fl›ndaki örneklerden oluflmaktayd›. 345 M. tuberculosis’in 205'i (%59.4) her iki yöntemle de 104’ü (%30.2) yaln›z BACTEC 460TB sistemi ile ve 36’s› (%10.4) yaln›z LJ besiyerinden izole edilmifltir. BACTEC 460TB sisteminde preparat negatif örneklerden LJ'ye göre üç kat fazla izolasyon sa¤lanm›flt›r. BACTEC 460TB sistemi ve LJ besiyerinde M. tuberculosis'in izolasyon oran› s›ras› ile %89.6 ve %69.8 olarak saptanm›flt›r. Klinik örneklerden M. tuberculosis'
Editöre Mektup
Comporison of Lowenstein-Jensen medium with Bactec 460TB
system in the isolation of Mycobacterium tuberculosis
70
culosis'in izolasyonunda LJ besiyerine ek olarak BACTEC 460TB sisteminin kullan›lmas›n›n du-yarl› ve h›zl› sonuç al›nmas›nda gerekli oldu¤u do¤rulanm›flt›r.
KAYNAKLAR
1. Pfyffer GE, Brown-Elliott BA, Wallace RJ. Mycobacteri-um. In: Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Jorgensen JH, Yolken RH, eds. Manual of Clinical Microbiology. Washing-ton DC: American Society for Microbiology, 2003; 532-559. 2. Morgan MA, Horstmeier CD, DeYoung DR, Roberts GD. Comparison of a radiometric method (BACTEC) and conven-tional culture media for recovery of mycobacteria from sme-ar-negative specimens. J Clin Microbiol 1983; 18: 384-388. 3. Master RN. Mycobacteriology. In: Isenberg HD ed. Clini-cal Microbiology Procedures Handbook, volume I Washing-ton DC: American Society for Microbiology, 2005; 3.1.-3.16. 4. Uzun M. Örneklerin ifllemlenmesi ve kültür yöntemleri. In: 21. yüzy›lda Tüberküloz Sempozyumu ve II. Tüberküloz Labo-ratuvar Tan› Yöntemleri Kursu Kitab›. Samsun, 2003; 285-90. 5. Leitritz LL, Schubert S, Bucherl B, Masch A, Heesemann J, Roggenkamp A. Evaluation of BACTEC MGIT 960 and BACTEC 460TB systems for recovery of mycobacteria from clinical specimens of a university hospital with low inciden-ce of tuberculosis. J Clin Microbiol 2001; 39: 3764-3767
in ortalama izolasyon süresi BACTEC 460TB sistemiyle 12.6 gün, LJ besiyerinde 26.3 gün olarak belirlenmifltir.
Çal›flmam›zda iki kültür yöntemi karfl›laflt›r›ld›¤›n-da BACTEC 460TB sisteminin karfl›laflt›r›ld›¤›n-daha duyarl› ve h›zl› oldu¤u gözlenmifltir. Son zamanlarda ESP-II, MB/BacT, MGIT 960 gibi otomatize sistem-lerde izolasyon oranlar›n›n BACTEC 460TB' ye göre daha düflük ve izolasyon sürelerinin daha uzun oldu¤u çal›flmalarla da gösterilmifltir (4,5). BACTEC 460TB sistemi duyarl› ve h›zl› bir sistem olmakla birlikte besiyerlerinin radyoaktif madde içermesi ve çapraz kontaminasyon riski nedeni ile dezavantajlar› da mevcuttur. Bu deza-vantajlara engel olabilmek amac›yla laboratuvar›-m›zda, sistem i¤nesinin periyodik sterilizasyonu ve fliflelerin radyoaktif at›k kurallar›na uygun ola-rak ortadan kald›r›lmas› sa¤lanmaktad›r.
Çal›flmam›z›n sonucunda BACTEC 460TB siste-minin LJ besiyerine göre daha duyarl› ve h›zl› oldu¤u görülmüfltür. Klinik örneklerden M.
