As variáveis quantificadas foram definidas conforme sua importância na caracterização da qualidade física, química e biológica (sanitária) dos corpos aquáticos, considerando-se as condições materiais e infra-estrutura laboratorial disponíveis.
Foram analisadas variáveis bacteriológicas: coliformes totais, coliformes termotolerantes, Escherichia coli (APHA et al. 1998); biológicas: clorofila “a” (JONES, 1979) e identificação de gêneros de fitoplâncton (APHA et al. 1998); físicas e químicas: pH, temperatura, turbidez, transparência, condutividade elétrica, sólidos totais e frações, sólidos suspensos e frações, sólidos dissolvidos totais, óleos e graxas, alcalinidade, dureza, cálcio, magnésio, sódio, potássio, cloreto, sulfato, ferro, oxigênio dissolvido, DBO5, DQO,
(RODIER, 1975). Todas as análises foram realizadas no Laboratório Integrado de Águas de Mananciais e Residuárias do Centro Federal de Educação Tecnológica do Ceará (LIAMAR/CEFET-CE).
As metodologias analíticas empregadas para a determinação de cada variável, devidamente referenciadas, são apresentada no Quadro 4.5
VARIÁVEL MÉTODO ANALÍTICO REFERÊNCIA
Temperatura (ºC)
Termômetro com filamento de mercúrio
→ Instrumento:
termômetro de mercúrio marca INCOTERM com escala de 0 – 60ºC e precisão de 0,1ºC. APHA et al. (1998) Potencial Hidrogeniônico (pH) Potenciométrico → Instrumento:
potenciômetro marca MICRONAL, modelo B474 com eletrodo combinado, previamente calibrado.
APHA et al. (1998) Turbidez (UT) Nefelométrico → Instrumento:
turbidímetro marca LA MOTTE, modelo 2008, previamente calibrado com suspensões padrões de formazina. APHA et al. (1998) Transparência (m) Disco de Secchi → Instrumento:
disco branco com 30cm de diâmetro suspenso por uma corda marcada de 5 em 5 centímetros.
COLE (1975)
Condutividade Elétrica (µS/cm)
Condutivimétrico de Leitura Direta
→ Instrumento:
condutivímetro marca MARCONI, modelo CA-150P previamente calibrado.
APHA et al. (1998)
Sódio e Potássio (mg/L)
Fotométrico de Emissão de Chama
→ Instrumento:
fotômetro de emissão de chama microprocessado marca ANALYSER mod 910M - previamente calibrado.
APHA et al. (1998)
VARIÁVEL MÉTODO ANALÍTICO REFERÊNCIA Sólidos Totais e Frações Sólidos Suspensos e Frações Sólidos Dissolvidos (mg/L) Gravimétrico
→Meio filtrante: papel de fibra de vidro Whatmann GF/C; → Temperatura de secagem: 103-105ºC;
→Temperatura de ignição: 500ºC. → Instrumentos:
• sistema de filtração a vácuo equipado com bomba de vácuo marca ROBINAIR VACUMASTER mod. 15401;
• estufa de secagem marca FANEM, mod. 315-SE regulada a 105ºC;
• banho-maria marca QUIMIS regulado a 100ºC; • forno mufla marca QUIMIS, mod. Q.318.D24 ; • balança analítica marca METTLER com precisão de
0,0001g. APHA et al. (1998) Cloretos (mg/L) Argentimétrico
→ Titulometria de precipitação com solução padrão de AgNO3 → Técnica de Möhr APHA et al. (1998) Óleos e Graxas Gravimétrico
(Extração com Hexano em Aparelho de Sohxlet
→ Filtração em musselina/papel de filtro/diatomita, seguido de secagem do meio filtrante em cartucho de extração em estufa a 103-105ºC, extração por 4h com velocidade de 20ciclos/h e pesagem do balão → Instrumentos:
• estufa de secagem marca FANEM, mod. 315-SE regulada a 105ºC;
• sistema de extração;
• balança analítica marca METTLER com precisão de 0,0001g.
APHA et al. (1998)
Ferro Total e Solúvel (mg/L)
Espectrofotométrico (Método da Fenantrolina)
→ Instrumento:
espectrofotômetro de medida direta marca HACH mod DR/2000 – UV-VIS
APHA et al. (1998)
VARIÁVEL MÉTODO ANALÍTICO REFERÊNCIA
Sulfato (mg/L)
Turbidimétrico
→ Precipitação com cloreto de bário seguido de medida turbidimétrica
→ Instrumento:
turbidímetro marca LA MOTTE, modelo 2008, previamente calibrado com suspensões padrões de formazina. APHA et al. (1998) Dureza Total Dureza de Cálcio (mgCaCO3/L)
Titulométrico com EDTA
→ Titulometria de complexação com solução padrão de EDTA em meio alcalino, utilizando-se Negro de Eriocromo T (dureza total) e Murexida (dureza de cálcio) como indicadores.
APHA et al. (1998)
Alcalinidade (mgCaCO3/L)
Titulação Potenciométrica
→ Titulometria de neutralização com solução padrão de H2SO4 ;
→ Determinação dos pontos de inflexão das curvas de titulação a pH = 8,3 (alcalinidade à fenolftaleina) e a pH = 4,5 (alcalinidade total).
→ Instrumento:
potenciômetro marca MICRONAL, modelo B474 com eletrodo combinado, previamente calibrado.
APHA et al. (1998) Oxigênio Dissolvido - OD (mg/L) Iodométrico
→ Titulometria de óxido-redução com solução padrão de Na2S2O3;
→ Técnica de Winkler (Azida Modificada) com fixação prévia do OD no campo.
APHA et al. (1998)
VARIÁVEL MÉTODO ANALÍTICO REFERÊNCIA
Demanda Química de Oxigênio - DQO
(mg/L)
Titulométrico com Digestão por Refluxação Fechada
→ Oxidação enérgica da matéria orgânica com K2Cr2O7 em meio ácido, utilizando-se tubos com
tampas de baquelite rosqueadas aquecidos em bloco digestor a 150ºC;
→ Titulometria de óxido-redução com solução padrão de (NH4)2Fe(SO4)2. APHA et al. (1998) Demanda Bioquímica de Oxigênio - DBO (mg/L)
Teste de DBO de 5 Dias (DBO5
(Técnica dos Frascos Padrões)
→ Medida do teor de oxigênio consumido para oxidação bioquímica da matéria orgânica a 20ºC durante 5 dias em ambiente escuro, pela técnica de Winkler.
→ Instrumentos:
frascos padrões de DBO e incubadora para DBO marca QUIMIS regulada a 20ºC.
APHA et al. (1998) Fósforo • Total (mg/L) • Ortofosfato Solúvel (mg/L) • Orgânico (mg/L) • Polifosfato (mg/L) Espectrofotométrico (Ácido Ascórbico) → Instrumento:
espectrofotômetro de medida direta marca HACH mod DR/2000 – UV-VIS
APHA et al. (1998)
Nitrogênio
• Amoniacal (mg/L) (Nesslerização Direta)Espectrofotométrico APHA et al.
(1989) • Nitroso (mg/L) Espectrofotométrico (Diazotação Sulfanilamida-NED) APHA et al. (1998) • Nítrico (mg/L) Espectrofotométrico (Salicilato de Sódio) → Instrumento:
Espectrofotômetro digital – UV-VIS, marca MICRONAL, modelo B382
RODIER (1975)
VARIÁVEL MÉTODO ANALÍTICO REFERÊNCIA
Coliformes Totais (CT) e Escherichia
coli (Ec) (NMP/100mL)
Teste do Substrato Cromogênico
→ Utilização do sistema COLILERT-QUANTI-TRAY da IDEXX LABORATORIES – adição do meio de cultura contendo o subtrato cromogênico a 100mL da amostra ou de suas diluições decimais, distribuição em séries de 10 tubos → Condições de cultivo: 35ºC / 24h;
→ Quantificação: contagem das células amarelas (CT)e contagem de células amarelas com fluorescência azul frente à luz ultravioleta (365ηm) e conversão a NMP/100mL . → Instrumentos:
• estufa bacteriológica marca DE LEO modelo T397 regulada a 35ºC. APHA et al. (1995) Coliformes Termotolerantes (NMP/100mL)
Tubos Múltiplos com Meio A1 Difco
Inoculação de diluições decimais da amostra em séries de cinco tubos contendo meio A1, incubação em em estufa bacteriológica regulada a 35 ºC por 3 h e em banho-maria regulado a 45ºC por 21 h, seguido da contagem dos tubos com turvação e produção de gás e conversão a NMP/100mL. → Instrumentos:
• estufa bacteriológica marca DE LEO modelo T397 regulada a 35ºC;
• banho-maria marca HAAKE, modelo N6, regulado a 45ºC APHA et al. (1998) Bactérias Heterotróficas Mesófilas (UFC/mL) Plaqueamento
Técnica Pour-Plate em PCA
Inoculação de diluições decimais da amostra em placas com PCA pela técnica Pour-Plate seguida de incubação em estufa bacteriológica regulada a 35 ºC por 48 h seguida de contagem das colônia e conversão em UFC/mL
→ Instrumentos:
• estufa bacteriológica marca DE LEO modelo T397 regulada a 35ºC;
• contador de colônias marca PHOENIX – mod EC 589
APHA et al. (1998)
VARIÁVEL MÉTODO ANALÍTICO REFERÊNCIA
Clorofila “a” (µg/L)
Espectrofotométrico (Extração com Metanol a Quente)
→ Filtração em papel de fibra de vidro Whatmann GF/C; → Extração do material retido com metanol a 90% a quente; → Centrifugação a 2500rpm;
→ Leitura espectrofotométrica a 665ηm (medida da absorção da clorofila e produtos de degradação) e a 750ηm (correção da turbidez);
→ Instrumentos:
• centrífuga marca CELM, modelo LS – II; • espectrofotômetro digital – UV-VIS, marca
MICRONAL, modelo B382
JONES (1979)
Identificação de Fitoplâncton
Microscopia de Campo Luminoso
→ Centrifugação a 1500rpm por 5-10min; → Preparo das lâminas a partir do sedimento; → Observações microscópicas;
→ Identificação através de chaves dicotômicas de identificação; → Instrumentos:
• centrífuga marca CELM modelo LS - II • microscópio marca PZO, mod. STUDAR LAB
APHA et al. (1995)
4.6 – Análise Estatística
Os dados obtidos foram submetidos à análise descritiva, determinando-se as funções principais, como: médias aritmética e geométrica com desvios-padrões para estimativa da tendência central; valores máximos e mínimos como indicativos da dispersão verificada; e
número de dados amostrais durante o período de estudo.
Considerando-se a influência dos valores extremos sobre a média aritmética, assim como a natureza exponencial do crescimento bacteriano, optou-se pela média geométrica para as variáveis bacteriológicas.