2. MATERYAL VE YÖNTEM
2.2. Sentezler, Bileşiklere Ait Spektroskopik Veriler
2.2.1. Karbohidrat bileşiklerinin azit türevlerinin sentezi
2.2.1.1. 1-Azido-1-deoksi-2,3:5,6-di-O-izopropiliden-β-D-mannofuranoz (2)
Sentezi
Bileşik 2’nin sentezi için, ilk olarak D-mannoz bileşiğinden başlanarak 2,3;5,6-di-O-izopropiliden--D-mannofuranoz (42) bileşiği literatüre göre sentezlendi.
Kuru D-mannoz (20 g, 110 mmol), kuru aseton (200 mL) içerisinde çözüldü ve üzerine der. H2SO4 (6 damla) ile susuz CuSO4 (30 g, 190 mmol) eklenerek bir gece boyunca karışmaya bırakıldı. Ertesi gün TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) bitirilen reaksiyon karışımı süzülerek CuSO4 uzaklaştırıldıktan sonra, pH sulu Ca(OH)2 ile 8'e ayarlandı. Karışım celit ile doldurulmuş Hirsch hunisinden süzüldü ve döner buharlaştırıcıda, düşük basınç altında çözücü uzaklaştırıldı. Kalan beyaz katı kaynar hekzandan kristallendirilerek 2,3:5,6-di-O-izopropiliden--D-mannofuranoz (42) elde edildi (Belder, 1977). Verim: % 75, e.n. 124-125 C (lit. verim: % 85, lit. e.n. 123-124 C).
Beyaz katı bileşik 42 (20 g, 76,8 mmol), CHCl3 (120 mL) ve piridin (50 mL) karışımında çözülerek üzerine buz banyosu içerisinde, argon atmosferi altında, sabit hızda ve damla damla SOCl2 (20 mL, 270 mmol) ilave edildi. Buz banyosu içerisinde, CaCl2 tüpü takılmış geri soğutucu altında TLC kontrolü (Toluen:MeOH, 9:1) yapılarak 7 saat sonra reaksiyon bitirildi, buzlu-suya döküldü ve CH2Cl2 (3150 mL) ile ekstraksiyon yapıldı. Organik faz ayrıldı, susuz Na2SO4 ile kurutuldu, uçuruldu. Elde edilen şurup halindeki 1-kloro-1-deoksi-2,3:5,6-di-O-izopropiliden--D-mannofuranoz (1) kararsızlığı nedeniyle bekletilmeden azitleme reaksiyonuna konuldu. Bileşik 1 (12 g, 43 mmol) DMF (120 mL) içinde çözülerek üzerine NaN3 (14 g, 210 mmol) ilave edildi ve 80 C'de karışmaya bırakıldı. TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) 5 saat sonunda reaksiyon, karışım oda sıcaklığında soğutulup, buzlu-suya (~ 250 mL) dökülerek sonlandırıldı. CH2Cl2 ile ekstraksiyon (3150 mL) yapıldı. Susuz Na2SO4 ile kurutuldu, süzüldü ve düşük basınç altında uçurularak elde edilen şurup karışım açık kolon kromatografisine (silika
jel; Toluen:MeOH, 100:1) tabi tutuldu. Beyaz renkli katı bileşik 2 elde edildi (Doboszewski, 2002; Hanessian, 1997). Verim: % 67, e.n. 74-75C (lit. verim: % 56, lit. e.n. 74 C), FTIR (cm-1, ATR) (Şekil E.2.1): 2987, 2937 (alifatik-CH), 2122 (-N3), 1068 (C-O-C).
2.2.1.2. 6-Azido-6-deoksi-1,2:3,4-di-O-izopropiliden--
D
-galaktopiranoz (10)
Sentezi
Kuru D-galaktoz (22,5 g, 120 mmol) alınarak kuru aseton (500 mL) içerisinde çözüldü ve üzerine der. H2SO4 (4 mL) ile susuz CuSO4 (50 g, 310 mmol) eklenerek bir gece boyunca oda sıcaklığında karışmaya bırakıldı. Ertesi gün TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) bitirilen reaksiyon karışımı, öncelikle süzülerek CuSO4 uzaklaştırıldıktan sonra sulu Ca(OH)2 ile pH 8'e ayarlandı. Karışımın döner buharlaştırıcıda, düşük basınç altında çözücüsü uzaklaştırıldı ve kırmızı şurup şeklindeki 1,2:3,4-di-O-izopropiliden--D-galaktopiranoz bileşiği (43) elde edildi (Hanessian, 1997). Verim: % 74 (lit. verim: % 79). Elde edilen bileşik, ekstra bir saflaştırma yapılmaksızın, bir sonraki reaksiyonda doğrudan kullanıldı.
Koruyucu grupların takılmasının ardından geçiş molekülü (9) sentezlendi ve takiben azit türevine (10) gidildi.
Bileşik 43 (23 g, 88,3 mmol) alınarak piridin (70 mL) içerisinde çözüldü. Reaksiyon karışımı buz banyosu içerisine alınarak üzerine piridin (~ 15-20 mL) içerisinde çözülmüş TsCl (26 g, 140 mmol) damla damla sabit hızla ilave edildi ve buz banyosunda karışmaya bırakıldı.
TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) takip edilen reaksiyon bir gece boyunca oda sıcaklığında karıştıktan sonra bitirilerek buzlu-suya (~ 150 mL) döküldü ve CH2Cl2 ile (3150 mL) ekstraksiyon yapıldı. Organik faz susuz Na2SO4 ile kurutuldu, çözücü düşük basınç altında döner buharlaştırıcıda uçuruldu. Elde edilen macun şeklindeki ürün direkt olarak azitleme reaksiyonuna konuldu. Bunun için, bileşik 9 (30 g, 72 mmol), DMF (100 mL) içerisinde çözülerek üzerine NaN3 (24 g, 360 mmol) ilave edildi ve 115 C'de karışmaya bırakıldı. TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) 15 saatlik bir süre sonunda, reaksiyon karışımı buzlu-suya (~ 300 mL) dökülerek sonlandırıldı. CH2Cl2 ile ekstraksiyon (3100 mL) yapıldı. Ayrılan organik faz, susuz Na2SO4 ile kurutuldu, süzüldü ve uçurularak elde edilen şurup karışım açık kolon kromatografisine (silika jel; Toluen:MeOH, 100:1) tabi tutuldu. Renksiz şurup halinde 10 bileşiği elde edildi (Dumont et al, 2012). Verim: % 71 (lit. verim: % 69), FTIR (cm-1, ATR) (Şekil E.2.2):
2990, 2987 (alifatik-CH), 2104 (-N3), 1072 (C-O-C).
2.2.1.3. 1-Azido-1-deoksi-2,3:4,5-di-O-izopropiliden-β-D-fruktopiranoz (12)
Sentezi
Çalışma konusu diğer tüm şekerlerden farklı olarak keto yapıda bir şeker olan D-fruktoz bileşiğinden hareketle koruyucu grup modifikasyonu gerçekleştirilerek öncelikle 2,3:4,5-di-O-izopropiliden-β-D-fruktopiranoz (44) bileşiği elde edildi.
Buz banyosu içerisine oturtulmuş balona, aseton (600 mL) ve üzerine önce damla damla der. H2SO4 (24 mL) ve yaklaşık 10 dakika karıştıktan sonra D-fruktoz (30 g, 170 mmol) eklendi. 2 saat sonunda reaksiyon TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) bitirildi ve sulu KOH çözeltisi ile ortam nötralleştirildi. Döner buharlaştırıcıda düşük basınç altında çözücüler uçuruldu. Kalan katı CH2Cl2 ile (3200 mL) çözülerek ekstraksiyon yapıldı. Organik faz, susuz Na2SO4 ile kurutuldu ve uçurulduktan sonra, kalıntı kaynar hekzanda çözülüp aktif karbon ile yarım saat geri kaynatıldı. Karışım celit dolgu maddesi kaplı hirsch hunisinden süzüldü. Süzüntüde beyaz renkli katı (44) elde edildi (Hanessian, 1997). Verim: % 69, e.n. 94-96 C (lit. verim: % 65, lit. e.n. 94 C).
Fruktoza izopropiliden koruyucu grup takılmasının ardından tosil geçiş bileşiği sentezlendi (11) ve takibinde azit türevine (12) geçiş yapıldı.
44 bileşiği (15 g, 57 mmol) piridin (~ 100 mL) içerisinde çözüldü. Üzerine piridinde (~ 50 mL) çözülen TsCl (22 g, 110 mmol) damla damla ilave edildi ve karışmaya bırakıldı. Yaklaşık 24 saat sonra reaksiyon buza dökülerek sonlandırıldı. CH2Cl2 ile (3100 mL) ekstraksiyon yapıldı, organik faz, susuz Na2SO4 ile kurutuldu ve düşük basınç altında piridin uzaklaştırıldıktan sonra MeOH-H2O ile kristallendirme yapıldı. Beyaz renkli katı (11) süzülerek kurutuldu. Verim: % 75, e.n. 82-83 C (lit. verim: % 70, lit. e.n. 84 C).
Bileşik 11 (10 g, 24 mmol) DMSO (70 mL) içerisinde çözülüp üzerine NaN3 (8 g, 120 mmol) ilave edildi ve 165 C'de karışmaya bırakıldı. Reaksiyon TLC kontrolünde (Toluen: MeOH, 9:1) 1,5 günlük bir zamandan sonra sonlandırılarak buzlu-suya (~ 100 mL) döküldü. Direkt olarak çöken, beyaz renkli 1-azido-1-deoksi-2,3;4,5-di-O-izopropiliden-β-D-fruktopiranoz (12) bileşiği süzüldü, ~ 20 mL su ile yıkandı, oda sıcaklığında kurutuldu (Reitz et al, 1989). Verim: % 61, e.n. 58-59 C (lit. verim: % 66, lit. e.n. 56-58,5C), FTIR (cm-1, ATR) (Şekil E.2.3):
2998-2934 (alifatik-CH), 2109 (-N3), 1070 (C-O-C).
2.2.1.4. 1-Azido-1-deoksi-2,3,4,6-tetra-O-asetil-β-D-glukopiranoz (4) Sentezi
Yapısında bulunan tüm -OH grupları, asetil grupları ile korunmuş halde bulunan 2,3,4,6-tetra-O-asetil--D-glukopiranozil bromür bileşiği (3) yapı olarak anomerik karbonundan kolay ayrılabilen grup olan halojen bağlı bir bileşik olması nedeni ile doğrudan azitleme reaksiyonuna tabi tutuldu.
Bileşik 3 (20 g, 48 mmol), DMF (40 mL) içerisinde çözülüp üzerine NaN3 (7,9 g, 120 mmol) ilave edilerek 55C'de karıştırıldı. TLC kontrolü ile (Toluen:MeOH, 9:1) reaksiyon 4 saat sonra sonlandırıldı. Oda sıcaklığına soğutulan karışım yaklaşık 150 mL buzlu-suya döküldü, ürün beyaz katı olarak çöktü, süzüldü ve ~ 20 mL su ile yıkandı. Elde edilen 1-azido-1-deoksi-2,3,4,6-tetra-O-asetil-β-D-glukopiranoz (4) bileşiği MeOH-H2O kristallendirmesi ile saflaştırıldı (Masuda and Shimizu, 1998). Verim: % 75, e.n. 124-126 C (lit. verim: % 83, lit. e.n. 126-127 C), FTIR (cm-1, ATR) (Şekil E.2.4): 2970, 2909 (alifatik-CH), 2118 (-N3), 1755 (C=O), 1058 (C-O-C).
2.2.1.5. 3-Azido-3-deoksi-1,2:5,6-di-O-izopropiliden--
D
-glukofuranoz (16)
Sentezi
3 no'lu -OH grubu dışında iki ketal grubu ile korunmuş 1,2:5,6-di-O-izopropiliden--D -glukofuranoz (45) bileşiği (11,5 g, 44 mmol) buz banyosu içerisinde kuru CH2Cl2 (500 mL) ve kuru piridin (15 mL) karışımında çözüldü. Tuz-buz banyosu (1:3) aracılığıyla sağlanan -15C'lik sıcaklıkta, Tf2O (14,5 mL, 88 mmol) damla damla ilave edilerek karışmaya bırakıldı. Reaksiyon TLC (Toluen:MeOH, 9:1) kontrolünde yaklaşık 45 dakika sonra sonlandırılarak ~ 300 mL buzlu-suya döküldü ve CH2Cl2 ile (3100 mL) ekstraksiyon yapıldı. Organik faz, susuz Na2SO4 ile kurutuldu, düşük basınç altında uçuruldu ve elde edilen beyaz katı triflat bileşiği (17) kararsız yapıda olması sebebi ile bekletilmeden azitleme reaksiyonuna konuldu. Bileşik 17 (16 g, 40 mmol) kuru DMF (90 mL) içerisinde çözüldü ve üzerine NaN3 (5,3 g, 80 mmol) ilave edilerek 0 C'de karışmaya bırakıldı. Reaksiyon TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) 5 saat sonra bitirilerek ~ 150 mL buzlu-suya döküldü. CH2Cl2 ile (3100 mL) ekstraksiyon yapıldı, organik faz susuz Na2SO4 ile kurutuldu, süzüldü ve düşük basınç altında uçuruldu. Elde edilen ikili reaksiyon karışımının açık kolon kromatografisine (silika jel; Toluen:MeOH, 100:1) tabi tutulması sonucunda renksiz şurup olarak 3-azido-3-deoksi-1,2:5,6-di-O-izopropiliden--D-glukofuranoz (16) bileşiği elde edildi (Gruner et al, 2002). Verim: % 50 (lit. verim: % 40), FTIR (cm-1
, ATR) (Şekil E.2.5): 2988 (alifatik-CH), 2111 (-N3), 1065 (C-O-C).
2.2.1.6. 1-Azido-1-deoksi-2,3,4,6-tetra-O-asetil-β-D-galaktopiranoz (6)
Sentezi
Sentezi gerçekleştirilen D-glukoz bileşiğinin bir epimeri olan söz konusu 2,3,4,6-tetra-O-asetil-β-D-galaktopiranozil bromür (5) bileşiğinde de anomerik karbona bağlı, kolay yer değiştirebilen bromür grubunun olması, bileşiği doğrudan azitleme reaksiyonuna konması için elverişli bir hale getirmiştir.
5 bileşiği (20 g, 48 mmol), DMF (45 mL) içerisinde çözüldü. Üzerine NaN3 (6,3 g, 96 mmol) ilave edilerek 60C'de karıştırıldı. TLC kontrolü ile (Toluen:MeOH, 9:1) reaksiyon 5 saat sonra sonlandırıldı. Oda sıcaklığına soğutulan reaksiyon karışımı buzlu-suya (~ 70 mL) döküldü, ürün beyaz katı olarak çöktü, süzüldü, ~ 20 mL su ile yıkandı ve oda sıcaklığında kurutuldu. Elde edilen azido-galaktopiranoz (6) bileşiği sıcak MeOH ile kristallendirilerek saflaştırıldı (Percec et al, 2013). Verim: % 80, e.n. 96-97 C (lit. verim: % 98, lit. e.n. 98 C), FTIR (cm-1, ATR) (Şekil E.2.6): 2985 (alifatik-CH), 2125 (-N3), 1736 (C=O), 1083 (C-O-C).
2.2.1.7. 1-Azido-1-deoksi-2,3,4,-tri-O-asetil-β-D-ksilopiranoz (8) Sentezi
İlgili bileşiğin sentezi için öncelikle D-ksiloz'dan başlanarak perasetil türevi (46) sentezlendi, ardından anomerik karbona bağlı bromür türevi (7) sentezlenerek azit türevine gidiş için ara ürün elde edildi. Son olarak da diğer asetil bileşiklerinde olduğu gibi azit ile yer değiştirme sonucu azido-şeker (8) elde edildi.D-ksiloz (20 g, 0,13 mol) alınarak Ac2O (160 mL) içinde çözüldü ve üzerine NaOAc (11 g, 0,13 mol) eklenerek 100 C'de karışmaya bırakıldı. TLC kontrolünde
(Toluen:MeOH, 9:1) başlangıç maddesinin bitmesi ile 3 saat sonra reaksiyon bitirilerek buzlu-suya (~ 300 mL) döküldü ve beyaz renkli katı perasetil ksilopiranoz (46) çöktü. Ürün süzüldü, 20 mL su ile yıkandı, oda sıcaklığında kurutuldu (Sardzik et al, 2010). Verim: % 75, e.n. 126-128 C (lit. verim: % 85, lit. e.n. 126-127C).
İkinci aşamada bileşik 46 (25 g, 78 mmol), kuru CH2Cl2 (170 mL) ve Ac2O (5 mL) karışımında çözüldü. Buz banyosuna alınarak AcOH içerisindeki HBr çözeltisinden (% 33, 49 mL) eklendi ve 0 C'de karışmaya bırakıldı. TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) ürün dönüşümünün tamamlanması sonucu karışım buzlu-suya (~ 250 mL) döküldü ve sırası ile doygun NaHCO3 çözeltisi (3100 mL), doygun tuzlu su (3100 mL) ve son olarak da su (3100 mL) ile ekstraksiyon yapıldıktan sonra organik faz susuz Na2SO4 ile kurutuldu, süzüldü ve düşük basınç altında uçuruldu. Elde edilen 1-bromo-1-deoksi--D-ksilofuranoz (7) bileşiği (27 g, 79 mmol) kararsız yapısı sebebi ile bekletilmeden DMF (150 mL) içerisinde çözüldü ve NaN3 (30 g, 0,46 mol) ilave edilerek 50 C'de karışmaya bırakıldı. TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 9:1) yaklaşık 3 saat sonra reaksiyon karışımı oda sıcaklığına soğutulup ~ 100 mL buzlu-suya döküldü. CH2Cl2 ile (3100 mL) ekstraksiyon yapıldı, organik faz susuz Na2SO4 ile kurutuldu, süzüldü ve çözücü düşük basınç altında uçuruldu. Elde edilen şurup karışımın açık kolon kromatografisine (silika jel; Toluen:MeOH, 100:1) tabi tutulması sonucu beyaz renkli katı 1-azido-1-deoksi-2,3,4,-tri-O-asetil-β-D-ksilopiranoz (8) bileşiği elde edildi (Sardzik et al, 2010). Verim: % 80, e.n. 84-86 C (lit. verim: % 90, lit. e.n. 84-85 C), FTIR (cm-1, ATR) (Şekil E.2.7):
2967, 2884 (alifatik-CH), 2118 (-N3), 1749 (C=O), 1060 (C-O-C).
2.2.1.8. 5-Azido-5-deoksi-1,2-O-(S)-trikloroetiliden--
D
-ribofuranoz (14)
Sentezi
İlgili bileşiğin sentezi için D-riboz bileşiğinden yola çıkılmak suretiyle öncelikle 1 ve 2 pozisyonundaki -OH'ların trikloroetiliden halkası ile asetal olarak korundukları türevi sentezlemek ve ardından diğer şekerlerde olduğu gibi geçiş molekülü sentezi üzerinden son olarak azit türevine geçiş amaçlandı.
Reaksiyon gerçekleştirilmeden önce, reaktif olarak kullanılan trikloroasetaldehitin (kloral) kloral hidrattan eldesi işlemi gerçekleştirildi. Bunun için kloral hidrat (256 g, 1,53 mol)
alınarak H2SO4 (144 mL, 1,47 mol) içerisinde çözüldü. CaCl2 kurutma tüpü takılmış damıtma düzeneğinde yaklaşık 97 C'de gelen destilatın toplanması sağlandı. Elde edilen sıvı halindeki susuz kloral ilgili sentezde kullanıldı (Ay, 2006).
Kuru D-riboz (30 g, 0,2 mol) alınarak üzerine kloral (94 mL, 0,9 mol) ve 1 damla H2SO4 ilave edildi. CaCl2 tüpü takılmış geri soğutucu altında 2 saat geri kaynatma yapıldı. TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 8:2) bitirilen reaksiyon karışımı içerisindeki kloral düşük basınç altında mümkün olduğunca uçuruldu. Elde edilen jelimsi koyu renkli katı, kaynar MeOH'de çözülerek üzerine 8-10 spatül aktif karbon eklendi ve 1 saat boyunca geri kaynatma yapıldı. Karışım, celit dolgulu Hirsch hunisinden süzüldü ve süzüntü düşük basınç altında uçuruldu. Elde edilen maddenin kaynar kloroformdan kristallendirilmesi sonucu 1,2-O-(S)-trikloroetiliden--D -ribofuranoz (47) saf olarak elde edildi (Ay and Halay, 2013). Verim: % 28,
[ ]
20D +38 (c 1,0, CH3OH), e.n. 122-123 C, FTIR (cm-1, KBr disk içerisinde) (Şekil E.2.8): 3497, 3364 (-OH),2980, 2950, 2906 (alifatik-CH); 1H NMR (400 MHz, C5D5N) (Şekil E.2.9): 7,09 (bs, 2H, OH),
6,66 (d, 1H, J1,2= 4,0 Hz, H-1), 6,36 (s,1H, CHCCl3), 5,41 (t, 1H, J2,3= 4,0 Hz, H-2), 4,83 (dd, 1H,
J3,4= 8,8 Hz, H-3), 4,73 (ddd, 1H, J4,5a= 2,0 Hz, J4,5b= 4,4 Hz, H-4), 4,67 (dd, 1H, J5a,5b= 12,4 Hz, H-5a), 4,45 (dd, 1H, H-5b); 13C NMR (100 MHz, C5D5N) (Şekil E.2.10): 110,5 (CHCCl3), 106,7 (C-1), 101,1 (CCl3), 83,7 (C-4), 83,3 (C-2), 72,1 (C-3), 61,2 (C-5).
Elde edilen bileşik 47 (15 g, 53 mmol) piridin (150 mL) içerisinde çözüldü ve balon buz banyosuna (0 C) alınarak, üzerine TsCl (12,2 g, 64 mmol) eklendi ve aynı sıcaklıkta karışmaya bırakıldı. TLC kontrolünde (Toluen:MeOH, 8:2) tamamlanan reaksiyon karışımı buzlu-suya (~ 150 mL) döküldü, CH2Cl2 ile (3100 mL) ekstraksiyonu yapıldı, organik faz susuz Na2SO4 ile kurutuldu ve düşük basınç altında çözücüsü uçuruldu. Elde edilen şurup şeklindeki karışım açık kolon kromatografisine (silika jel; Toluen:MeOH, 100:1) tabi tutularak ara ürün olan tosil türevi saflaştırılarak şurup şeklindeki ürün (13) elde edildi. Verim: % 61, 20
D
[ ]
+12 (c 0,2, CH3OH), FTIR (cm-1, KBr disk üzerinde) (Şekil E.2.11): 3154 (-OH), 3060 (aromatik-CH), 3002, 2946, 2926, 2906 (alifatik-CH), 1600 (aromatikC=C), 1356 ve 1172 (SO2), 1098 (C-O-C); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) (Şekil E.2.12): 7,80 (d, 2H, J= 8,4 Hz, benzen), 7,36 (d, 2H, benzen),6,05 (d, 1H, J1,2= 4,0 Hz, H-1), 5,69 (s, 1H, CHCCl3), 5,02 (bt, 1H, J2,3= 4,0 Hz, H-2), 4,35 (dd, 1H, J5a,5b= 11,4 Hz, J4,5a= 2,4 Hz, H-5a), 4,20 (dd, 1H, J4,5b= 4,2 Hz, H-5b), 3,98 (dd, 1H, J3,4= 9,0 Hz, H-3), 3,91 (ddd, 1H, H-4), 2,63 (d, 1H, OH), 2,45 (s, 3H, CH3); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) (Şekil E.2.13): 145,5, 132,7, 130,2, 128,2 (benzen, 6C), 110,2 (CHCCl3), 106,6 (C-1), 99,4 (CCl3), 81,0, 78,9, 71,5, 67,5, 58,6 (C-2, C-3, C-4, C-5), 21,9 (CH3).
Son basamakta, 13 bileşiği (10 g, 23,0 mmol) DMF (150 mL) içerisinde çözülerek üzerine NaN3 (7,5 g, 0,11 mol) ilave edildi, 115 C'de karışmaya bırakıldı. Başlangıç maddesinin TLC kontrolü (Toluen:MeOH, 9:1) ile bitmesi sonucu reaksiyon sonlandırılarak buzlu-suya (~ 150 mL) döküldü, 2 saat karıştıktan sonra beyaz renkli olarak 5-azido-5-deoksi-1,2-O-(S)- trikloroetiliden--D-ribofuranoz'un (14) katı olarak çöktüğü görüldü. Elde edilen azit ürünü süzüldü, ~ 15 mL saf su ile yıkandı ve oda sıcaklığında kurutuldu (Ay and Halay, 2013). Verim: % 77, e.n. 129-131 C,
[ ]
20D +92 (c 0,2, CH3OH), FTIR (cm-1, KBr disk içerisinde) (ŞekilE.2.14): 3512 (-OH), 3006, 2976, 2944, 2908 (alifatik-CH), 2102 (-N3), 1120 (C-O-C); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) (Şekil E.2.15): 6,12 (d, 1H, J1,2= 4,0 Hz, H-1), 5,74 (s, 1H, CHCCl3), 4,95 (bt, 1H, J2,3= 4,4 Hz, H-2), 4,02, 3,93 (m, 1H, H-3), 3,89 (ddd, 1H, J3,4= 8,4 Hz, J4,5a= 2,4 Hz,
J4,5b= 4,8 Hz, H-4), 3,71 (dd, 1H, J5a,5b= 13,6 Hz, H-5a), 3,43 (dd, 1H, H-5b), 2,49 (s, 1H, OH); 13
C NMR (100 MHz, CDCl3) (Şekil E.2.16): 110,3 (CHCCl3), 106,7 (C-1), 99,5 (CCl3), 81,2, 80,3, 72,4 (C-2, C-3, C-4), 50,7 (C-5).