in Vivo Arastırmalar ,

FABAD Farın. Bil. Der.

13, 431 - 440, 1988

FABAD J. Phann. Sci.

13, 431- 440, 1988

Bazı Aminoglikozit Antibiyotiklerle

in Vivo Arastırmalar ,

Emir TAN(*)

Candan Bozok Johansson (*)

Özet : Gentam,isin, tobramisin, sisomisin ve amikasinin tavşanlar­

da i.m. uygulamadan sonra serum düzeyleri araştırılmıştır. Dört an-

tibiyotiğin de birinci saat içinde (özellikle 20. ve 40. dakikalarda) serunı

düzeylerinin en üst seviyede olduğu saptanmıştır. Adı geçen antibiyo- tiklerin antimikro_biyal in .vivo aktiviteleri beyaz Balb/c cinsi farıeler­

de denenıniştir (Mice protection test). Gentamisin, tobramisin, siso- misin ve amikasine biri duyarlı, diğeri dirençli olan iki Pseudomonas aeruginosa suşu ile hayvanlar enfekte edildikten sonra aynı antibiyo- tiklerle tedavi edilmişlerdir. Sonuçlarımızda duyarlı P. aerugıinosa .suŞu karşısında tobramisinin, dirençli P. aeruginosa suşu karşısında - ise. aminakisinin en etkili antibiyotıikler olduğu görülmüştür.

IN-VIVO-UNTERSUCHUNGEl\I MIT EINIGEN AMINOGLYKOSID-ANTIBIOTIKA

Zusanımenfassung : Die Serumspiegel bei den Kaninchen wurden nach der im. Verabreichung von Gentamicin, Tobramycin, Sisom·icin und Amikacin bestimmt. Es wurde festgestellt, dass alle vier Anti.

biotika ihre hö.chsten Serumspiegel innerhalb von ıeiner Stunde (20 bzw. 40 min.) erreichen. Ausserdem wurde die antimikrobielle ıin-vivO­

Aktivitaet der oben genannten Antibiotika an weissıen Balb/c Maeuserı

geprüft (Mice Protection Test). Die Tiı::re ·wurden mit zwei Staemmen Van Pseudo:ı.nonas _aeruginosa infiziert, . von_ denen eine gegeri _diese

(*) .İstanbul Üniversitesi, Eczacılık Fakültesi, Mikro.biyoloji B,irimi

Anti.biotika rezistant, ·di·e andere lhingegen empfindlich war. Anschlies- send "vurden die Tiere mit ¹Gentamicin1 Tobramycin, Sisomicin und Amikacin ıbehandelt. Die Ergebnisse zeigen, dass Tobramycin gegen den empfindlichen P. aeruginosa-Stamm und Amikacin gegen den ^rezıis...

rtanten: P. aeruginosa-Stamm, die wirksamsten Aminoglykosid-Antibio- ti>ka sind.

Schlüsselwörter : Aminoglykosid-Antibiotika, Gentamioin, Tob- ramycin, Sisonıicin, Amikacin, Serumspiegel, ^PD50 Werta.

GİRİŞ

1963 yılında aminoglikozit yapı.

sındaki gentamisinin Weinstein ^ve

arkadaşları (1) tarafından izole edil- mesinden sonra bu grup antibı:i.yo­

tikler ~çin yeni bir çığır açılmış

ve bir çok araştırma grubunun yo-

ğun çalışmaları sonucu yeni ami- nogHkozit antibiyotikler, tobrami- sin, amikasin, sisom,isin ve netH- misin özellikle Gram negatif ço- mak bakteriler Ckarşısındaki üstün etkileri ile tedavide yerlerini al-

mışlardır. Kimyasal ^yapı ve etki

yolları ibirbirleııine çok benzeyen bu antibiyotikler özellikle Pseu- domonas aıerUginosa'ya karşı anti- bakteriyel etkileri ve çeşitli bakte- rilerde aminoglikozit grubu anti- biyotiklere Ckarşı direnç durumları

ile değerlendirilmektedirler.

Bu çalışmamızda aminogliko- zit ·antirbiyotiılderden .gentamisin, tobramisin, ·sisomisin ve amikasıinin

in vitro deneylerle antibakteriyel etkilerinin çeşitli bakteri suşları karşısında saptanması çalışmaları­

nın devamı olar-ak in Vivo deneym

lerle ıtavşanlarda toksik olmayan dozla elde editen serum düzeyleri~

nin ve farelerde oluşturulan deney- sel ·enfeksiyonların tedavisinde ko- ruyucu ·dozlarının belirlenmesi ve

sonuçların in vitro deneylerle ba-

ğıntılı olup olmadığı araştırılmıştır.

GEREÇ ^VE YÖNTEMLER Gereç:

Tavşanlarda serum düzeyleri- nin saptanması çalışmalarında !her antibiyotik için ^altı adet ^·eııkek al- bino tavşan kullanılmıştır. Antihi-

yotikleııin koruyucu dozlarının fa- reler üzerindeki ^(PD50 değerlerinin)

tayininde ise ağırlıkları 20.30 g

( x =

Tavşanlarda serum düzeyleri- nin saptanması çalışmalarında tob- ramisin, aınikasin ve sisomisin için Staphylococcus aureus (ATTC 6538) ve gentarrusin için Staphylo- coccus epiderınidis (ATTC 12228)

suşları kullanılmıştır. Koruyucu doz çalışmalarında ise in vitro di·-

lüsyon ve difj.izyon-. yöntemleri so- nuc;u dört antibiyotıiğe_ de, biri dud yarlı (No: 119), diğeri ise dinençli (No : 7722) olarak saptadığımız iki Pseudomonas aeruginosa suşu ıkul­

lanılmıştır.

Deneylerde besiyeri olarak an- tibiyotik medium 1 (pH : 7) kulla-

nılmıştır. Bakterilerin stok süspan-

siyonları 'ıçın ise antibiyotik me- dium 11 (pH : 8) kullanılmıştır.

Çalışmalarımızda kullanılan

antibiyotiklerden tobramisin sül- fat (aıktivitesi 904 mcg/mg) Eli Lilly

firmasından, ami,kasin baz (aktivİ­

tesi 915 mcg/mg) Bristol Myers

firmasından, gentamisin sül- fat (aktivitesi 615 mcg/mg) ANSA İlaç fabrikasından, sisomisin sül- fat (aktivitesi 554 mcg/mg) Birle- şik Alman İlaç fabnikaları kanalı rile Schıering firmasından sağlan­

mıştır. Antibiyotik stok çözeltileri gentamisin, sisomisin ve am:iıkasin

için pH : 8 fosfat tamponu; tob- ramisin için steril damıtık su He uygun konsantrasyonlarda hazır­

lanmış ve

+

miştir.

Yöntemler

I - Tavşanlarda serum düzey-

lerıi.nin saptanması : a) Stok ıbakteri süspansiyon-

ları USP XX (1980)'ye göre hazır­

lanmıştır.

b) Standart eğrilerin çizilmesi

vıe tavşanlarda çeşitli zaman ara-

lıklarında serum düz.eylerinin araş-

tırılması ; Antibiyotikler uygulan- madan önce deneye--alınacak olan

tavşanlardan elde edilen birleştiril­

miş (pooled) serum ile siso:misin, tobramisin ve gentamisin ıiçin

2 µg/ml, 3 µg/ml, 4 µg/ml, 5 µ;g/ml ve 6 µg/ml'llk konsantrasyonlar;

amlkasin ;çin 2.5 µg/ml, 5 µg/ml, 10 µg/ml, 15 µg/ml ve 20 µg/ml'lil<

konsantrasyonlar hazırlaıimıştır.

Retıerans nokta olarak sisomisin, tobramisin ve gentamisin ıçın

4 ,µg/ml; amikasin için 10 µg/ml'lik konsantrasyonlar alınmıştır. Bu konsantrasyonlar bakteri süspan- siyonu ·karıştırılmış besiyeri içeren Petr.i kutularına uygulanmış· ve 37°C de 18 saat inklibasyondan sonra oluşan inhibisyon zonlarının çapları saatli kompas ile ölçülmüş­

tür. Bu değerlerin ve ıkonsantras­

yonların logaritmalan alınarak FDA (1978) da verilen y

=

+

muştur. Ayrıca her antibiyotik için standart eğriler çizilmiştir (2).

Tavşanların tartıları alınarak

gentamisin, tobramisin ve sisomisi- ni l mg/kg; amikasini 7.5 mg/kg miktarlarda içeren ampuller_hazır-:' lanmıştır. Deney başlangıcında tav-

şanlardan :kontrol olarak kan ¹alın­

n1ış ve -daha sonra ant:iıbiyoti:kler

i.m. yolla şırınga edHmiştir. An- tibiyotiklerin verilmesinden 20, 40, 60, 120 ve 240 dalcika son, ra kan alınıp serumları ayrıla­

rak 50 µl'lik mikropipetle se- rumlar, bakteri süspansiyonu ile karıştırılmış besiyeri :içeren Pet.:..

ri kutularındaki oyuklara tatbik

edHm.iştir. Her Petri ·kutusuna re-

f~rans nokta 'konsantrasyonları

da .konmuştur. 37°C de 18 saatlik inkübasyondan sonra ^oluşan zon- lar saatld. kompasla ölçülmüş ve or-

talamaları alınmıştır. Her zaman

aralığı için dört Petri kutusu kul-

lı:ı.nılınıştır. Her zaman aralığı için ibulunan ortalama zon değerinin log<ilrİ tması alınarak y

=

+

formülüne uygulanrrııştır. Bu for -

ın.ülde a Vie b değerle:ri standart eğ­

ri .:için daha önce bulunduğundan

x yerine de okunan zonun logarit-

,J!lası konarak bilinmeyen serum düzeyi µg/ml olarak bulunmuştur.

Bu sonuçlar standart eğrilerden

de okunarak kontrol edilmiştir.

II - Fareler üzerinde antibi- yotiklerin koruyucu doz-

larının (PD₅₀ değerlerinin) hesaplanması :

Duyarlı suş için dört antibiyo-

tiğin 0.5 mg/kg, 2.5 mg/kg, 25 mg/

kg ve 50 mg/kg'lık dozları; dirençli

suş için ise dört ant,ibiyotiğin 5 mg/

kg, 25 mg/kg, 50 mg/kg ve 100 mg/

kg'lık dozları se.çilmiştir. Bu doz-

ların seçiminde antibiyotiklerin

MIC::1arı göz önüne alınmıştır. Her antibiyotik ve her konsantrasyon için ~ fındık faresi içtren gruplar

kullanılmıştır. Her ik~ suşun lR saatlik ıkültürleri 107 bakteri/rol olacak şekilde sulandırılını ş ve fın­

dık fartierine periton içi yoldan 0.5 ml verilmiştir. Bakteri süspan- siyonu şırınga edildikten bir saat ve üç saat sonra her antibiyotiğin yukarıda belirtilen konsantrasyon-

ları sekizli gruplara deri altı yolla

verilmiştir. Ayrıca 8 fındık faresi içeren kontrol grubuna da sadece bakteri ·süspansiyonu şırınga ı.edil­

miştir.

Hayvanlar deneye saatten itibaren 24, 48,

alındığı

72 ve 96 saat boyunca gözlenm¹iş ve canlı

kalan hayvanların sayısı kaydedil-

miştir. Deney sonuçları Litchfield ve Wicoxon'un yöntemine göre he-

saplanmıştır (3, 4, 5, 6).

BULGULAR

Agarda difüzyon yöntemi kul-

lanılarak her antibiyotik için -çizi- len v.e serum konsantrasyonlarının hesaplandığı eğrilere ilişkin kon- santrasyonlar ve FDA'nın (1978)

verdiği yöntemlere göre düzeltil-

miş inhibisyon zan ortalama çap

değerleri Tablo l'de ve standart

eğrileri Şekil 1, 2, 3 ve 4 de veril-

miştir.

Antibiyotiklerin i.m. ^verilişle­

rinden sonra ibelli aralıklarla kan-

ları alınmış ve serum düzeylenin- deki antibiyotik ,konsantrasyonları

standart ·eğrilerine ait doğru denk- lemleri ile ,µg/ml olarak saptan.

mıştır. Bulunan ortalama ^değerler Tablo 2'de verilmiştir.

Serum düzeyi araştırmamızda

gentamisin, tobramisin ve sisomi- sin 1 mg/kg dozda J.m. yolla tav.

şanlara uygulandığında serum dü- zeylerinin gentamisinde 20 ve 40 dakikalarda; tobramisinde 40 da- kikada; sisomisinde 20 dakikada en

([og)

eo .. ao ' "'

~0.60

13 ~0.50

~ 0.40 2

~ c 0.:()

125 1.27 1.29 1.31 i.33 (logl Z on (mm)

Şekil l Gentamlsin'ln standart eğ­

risi (r

=

=

_!log)

"E

~o.so

~O. ⁷⁰

i0.60

§c.50

1o.

_xo. c JO

1.15 1.17 1.19 1.21 1.23 125 1.27Uogl Zan ımml

Şekil 3 : Tobramlsin'm standart

eğrisi (r

=

=

üst düzeyde olduğu saptanmıştır.

Amika:sin 7.5 mg/kg dozda i.m. yol.

la tavşanıa·ra uygulandığında ise

ortalaİna serum düzeyinin 40 -daki- kada en Ust düıJeye ulaştığı bu~

lunmuştur.

Denediğimiz dört antibiyotiğe

ı 1 og)

~o.sa

"' E

o o.

c

~o. so

o

~o.~ o -

~ ] O, 30

1.17 1.19 1.21 1.23 1.25 ( log) Zon (mm)

Şekil 2 Sisomisin'in standart eğ_

rlsi (r = 0.998 a = 5,14 b

=

( logl 1.4 o Et20 ';;,

Eto o

~o.sa

o

~0.50

1i

"

:; 0.20

~

1.00 1.05 1.10 1.15 1.20 125 ((og) Zon ( rrıml

Şekil 4 : Amikasin'ln sıandfil,t eğ­

risi (r

=

=

de duyarlı (No : 119) ve dirençli (No : 7722) P. aeruginosa suşları ile farelerde oluşturulan deneysel in- feksiyonlarda Litchfield ve Wico.

xon'un yöntemine göre saptanan antibiyotiklerin koruyucu dozları~

nın (PD_{50 )} karşılaştırılması Tab- lo 3'de görülmektedir,

Tablo 1 Agarda ilifüzyon yöntemiyle çizilen standart ^eğrilere ait sa-

yısal değerler

İnltlbisyon ortalama zon çaplan (nnn)

I(onsan- Gen ta- Tobra- Siso Konsan- Aml.

trasyon nrlsin misin mis.in tras yon kas in

(mcg/cm3 ) (mcg/cm')

2 18.6 14.4 ^ıs.o 2.5 11.7

3 19.1 15.5 15.6 5 13.7

4 19.6 16.2 16.4 10 15.0

5 20.7 17.2 16.9 15 15.4

6 21.0 17.7 17;7 20 16.6

Tablo 2 Kas içi yolla uygulanan dört antibiyotiğin: çeşitli zaman

aralıklarında serumdaki konsan:trasyonlan

Serum düzeyi Konsantrasyonu ^(mcg/cm3)

- - - - -

Zaman Gentamisin ı Tobramisin Sisomisin Ami.kas!n (dakika) (lmg/kg) (lmg/kg) (lmg/kg) (7.Smg/kg)

- - - -

20 1.512 1.36 1.55 18.99

40 1.52 1.67 1.48 31.05

6Q 1.42 1.59 1.30 30.9

120 0.91 1.23 0.89 15.45

240 0.26 0.29 0.17 3.09

ı Tavşanlara kg başına veııilen doz.

2 6 tavşanda elde edilen değerlerin ortalan1as1 (rocg/cm3)

Duyarlı P. aeruginosa (No : 119)

suşu ile fındık farelerinde oluşan

deneysel infeksiyona ^karşı tobra- misinin 15 rng/kg'lık koruyucu doz ile en ·etkili antibiyotik olduğu gö-

rülmüştür. Tobramisini 22 ıng/kg lık dozla slson1isin ve aynı dozla

gentaınisin izlcn1ektedir. An1i¹kasin ise 51 mg/kg¹lık koruyucu dozla

üç antibıiyotiğin arkasından ,gıel­

rnektedir. Dirençli P. aeruginosa (No : 7722) suşu karşısında 48 mg/

kg'hk koruyucu dozla en etkili anti- biyotik olarak amikasin görülmek- te, onu 88 mg/kg ile gentamisin, 98 ıng/kg ile tobramisin ve 230 mg/kg ile de sisomisin izlem.ekte- dir.

Tablo 3 Biıi duyarlı, diğeri dirençli iki P. aeroginosa su.şu. ile fare- lerde Oluştunda:n den.ey sel :infeksiyon.larda dört antibiyotik- te saplanan koruyucu dozlar (PD₅₀₎

Antibiyotik

Gentamisin T obramisin Sisomi,sin Amikasin

Antibiyotik

Gentamisin Tobramisin Sisomisin Amikasin

MIC (mcg/cm')

0.9 0.48 024 1.9

MIC (mcg/cm3)

62.5 15.6 15.6 15.6

P. "''rnginosa (No: 119)

](oru.yucu dozlar (PD_{50 )} mg/kg

22 (10.ll - 15 ( 6.16 - 22 (I0.44 - 51 (24.31 -

47.89)*

36.56) 4635) 106.99)

P. aeıllginosa (No : 7722) Koruyucu dozlar (PD₅₀₎ mg/kg

88 (51.77 - 149.6) 98 (57.31 - 167.6) 230 (28.03 - 188738)

48 (21.92 - 105.12)

"' Parantez içindeki sayılar güvenilirlik s1nırlannı göstermektedir.

SONUÇ VE TARTIŞMA Denediğimiz bu dört antibiyo-

tiğin seruın düzeylerinin ilk 60 da- kika içinde (özellikle. 20. ve 40. da- kikalarda) en üst seviyede olması diğer araştırıcıların değişik dozla-

rına ve uygulama şekillerine kar-

şın benzerlik .göstermektedir (7-15).

Ayrıca :in vivo deney sonuçlarımız

in vitro dilüsyon yöntemi ile karşı­

laştırılacak olursa, in vitro dilüs- yon yöntemi için diğer araştırıcı­

larca verilen gentarnıisin, tobrami- sin ve sisomisin için 1 µg/ml ve amikasin için 20 µg/ml duyarlık sınırının toksik olmayan dozla el- de edilebildiği görülmüştür (9, 16).

In vivo koruyucu doz araştır­

ması bulgularımız sonucı.ı._ıda du-

yarlı P. aeruginosa suşu karşısında

tobramisiilln, dirençli P. aerugino- sa suşu karşısında ise amtkasinin en etkili antibiyotikler olduğu sap-

taıımıştn•. Sonuçlarımızda dikkati

ç.el(i~n en önemli noktalardan birJ amiJkasinin in vıivo koruyucu doz

araştırmamızda hem duyarlı hem de dirençli P. aenıginosa suşları

üzerinde hemen hemen aynı de- recede etki göstermesidir. _İn vitro deneylerde amikasine dirençli ola- larak saptadığımız P. aeruginosa

suşuna in vivo deneylerde en etkil~

antibiyotik olarak amikasin sap-

tanırıışhr. Aınikasinin diğer an1i- noglikozitleri ü1aktive eden enzim- lere karşı dayanıklı olınasının de- ney sonuçlarımızda bir rol ^oynayıp

oynamadığı düşüni.Umüş ve bu ko- nunun derıin~e.ştirilerek

r11ası ger8'kliliği ortaya

l\.ılillcr ve arkadaşlarının

araştırıl­

çıkmışt1r.

(17) çalış_

ınası bu kanımızı kuvvetlendirmek- tedir. Bu araştırıcılar AAC (6')-II enzimi taşıyan yiiksek virulanslı Pseudoınonas suşlarının amikasine

duyarlı olduklarını saptamalar1na

karşın, bu suşlarla PD50 değerleri­

nin çok yüksek olduğunu; Aksine, APH cYJ-IV direnç modeline sahip

tanıışlardır. Shadoıny ·ve arkadaş­

ları (6) koruyucu doz ^{çalışmala­}

rında sırasıyla sisornisin, tobrami.

sin ve gentamıisinin en etkili 'k~ru­

yucu doza sahip olduklarını bildir-

n1işlerdir. Davis (20) de tobramisi- nin gentaınisinden daha etkili ol_

duğunu bildirıniştir. '\ıValtz (21) ko_

ruyucu doz çalışn1alarında bakterL TIJin şırıngasından ·sonra antibiyo_

tiklerin verilmesiyle tedavide daha iyi sonuçlar elde edileceğini ve bir bakteri cinsinin bir suşuna karşı alınan sonuçların aynı cinsten diğer suşlar için geçcrlıiliğinin zayıf bir

olasılık olduğuna dikkati ^çekn1iş_

sta.filokoklarda ^ıelde edilen PD₅₀ tiı·.

değeri çok yüksek olmamakla be- raber, gentamisin, tobramisin ve netilmisinle elde edilen çok ^düşük

PD,ıo -değerlerinin ışığında bu ^suşun

aınikasinc dirençli olarak ^düşünü­

lebileceğini bildirmişlerdir.

Waitz ^ve arkadaşları (15, 18)

yaptıkları iki ayrı çalışmada P. ae- ruginosa suşları karşısında si- somisinin koruyucu dozunun gen- tan1isin, tobramisin, an1ikasin ve kanan1isinden üstün ^olduğunu bil-

dirmişlerdir. Price ve ^arkadaşla­

rı (11) ise P. aeruginosa ^suşu ile

fare1~rde deneysel enfeksiyon te- davisinde en etkili antibiyotiğin amikasıin olduğun-ı-ı., amikasini gen- tamisln ve kanaınisinin izlediğini bildirmişlerdir. Kawaguchi ve ar-

kadaşları (19) amikasinin kanamL sinden, Weıinstein ve arkadaşları (1) gentamisinin neomis·in ve :kanamL

.~inden, Scheer (5) ise sisomisinin gentamisinden üstün ^olduğunu sap-

Çalışmamızda, bir çok Gram negatif bakterinin etken olduğu çe~

şitli enfeksiyonların tedavisinde -öncn1li bir yere sahip olan an1ino-

gliko:cit~erden gentaınisin, tobraınL

sin, sison1isin ve amikasinin ^tav~

şanlarda serum düzeyleri saptandı., ğıncla, ,gentamisin, tobramisin ve sisomisin için in vitro dri.lüsyon yönteminde ka:bul edilen 1 ;µg/ml ve amikasin için 20 [J.g/ml'lik du-

yarlık sınırlarının toksik olmayan dozlarla elde edilebildiği görülmüş­

tli.r (9, 16). Farelerde ^yapılan koru- yucu doz çalışmaınızda duyarlı

P. aenıginosa suşu karşısında_ to b~

ramisinin, dirençli P. aeruginosa

suşu karşısında isıe amikasinin en

etk~li antibiyotikler ^olduğu gözlen-

miş, dirençli P. aeruginosa ^suşu

karşısındaki amikasinin oldukça etkili olarak saptanan PD~rn değeri

,istisna edilirse in vivo deney so-

nuçları ile in vitro deney ^sonuçları

arasında benzerlik olduğu saptan-

mıştır. Dirençli P. aeruginosa suşu karşısındaki amikasinin etkisinde

göriildüğü gibi aminoglikozitlıeri

inakt·ive eden enzimlerin oynadık­

ları rolün önemi bir kez daha göz-

lenmiştir.

KAYNAKLAR

1. Weinstein 1\1.J., Luedemann G.

M., Oden E.M., WE1gman G,H.,

{<¹Gcntamicin, a new broad-

. spcctrum antibiotic con1plex)) Antimicrob Ag.znts Chemother p l (1963).

2. Grave D.C., Rondal! W.A., «As_

say methods of antiıbioticsı> a laboratory manual, .Medicaı

Encyclope?ia Inc. Neıı\l York (1955).

3. Litchfield J.T., Wicoxon F., <<A simplified method of evalua...

ting dose-effect experimentsı>

J Pharmacol Ex Therap 99 : 99-113 (1949).

4. Meyıers B.R., Hirschn1ann S.Z.,

{<Coınparison of activity of si.

somicin and gentarnicin in mouse protection tests "'itb Gram-negative bacilli» AntL microb Agents Chemother 10 : 384-386 (1976).

5. Scheer M., «Wirkungsvergleich von Sisomicin und Gentamicin im Tierıexperiment» Infection 4 : 366-369 (1976) Suppl. 4.

6. Shadomy S., Utz C., Shadomy H.J., «In V·ivo stuclies with si_

somicin, gentamicin and tob- ramycin:» Infection 4 : 362-365 (1976) Suppl, 4.

7. Blair D.C., Fekety F.R., Bruce B., Silva J., Archer G., «'The- rapy of Pseudomonas aerugi- nosa infections with tobramy_

cin» Antimicrob Agents Clıe­

mother 8: 22-29 (1975).

8. Daniels P.J.L., «Antibiotics (Aminoglycosdcles)» Editor : K.

Oth.rner Encyclopedia of Ch.erni- cal Technology, Third Edi¹tion, John \¹Viley and Sons. Inc. 2 : 819-852 (1978) .

9. Knothe I-I., «Die antimikrobL elle Aktivitaet von Gentaınicin,

Sisomicin und Tobran1ycin)ı

Infection Suppl. 4.

4: 294-299 (1976)

10. Lode H., I<.emmer.ich B., Koep- pe P., <(Comparative cliniC'al pharn1acology of genta.micin, sisomicin and tobraınycinı)

Antimic:rob Agents Chemother 8: 396-401 (1975).

11. Pricc K.E., Chisholm D.R., Mi- siek M., Leitner F., Tsai Y.I-I.,

«Microbiological ıevaluatO:on of BB-K8, a new semisynthetic

aminoglycosideı) J An.tibiot 25 : 709-731 (1972).

12. Rıff L.J., l\tloreschi G., <<Netil- micin ancl gentamicin : Com- parative pharn1acology in hu-

ınans» Antimicrob Age.nts Che- mother 11 : 609-614 (1977).

13. Scheer M., «Zur Kinetıik von Sisomicin bci k1einen V' ersuch- stieren)) In.fection 4 : 355-361 (1976) Suppl. 4.

14. Schoutıcns E., Vanderlinden M.P., Yourossowsky E. «Tob- ran1ycin : Clinical and micro-

biological evaluation» Int J Clin

Phamıacol 8: 207-215 (1973).

15. Waitz J.A., Moss E.L., Oden EM., Weinstein M.J., «Biologi~

cal studies with antibiotic 6640, a new ibroadspe·ctrnın aminog- lycoside antibiotic)> J. Antibiot 23 : 559-565 (1970).

16. Schassan H.H., «In vitro acti- vity of new aminoglycoside an-

tibıiotics alone and \vith Beta- lactam antibiotics}> Infection 7 : 248-252 (1979).

17. Miller G.H., Hare R.S., Moss E.L., Sabatelli F.J., Schaffer T.W., Waitz J.A., «Evaluation of netilmicin susceptiibility discs using bacteria with known aminoglycos¹ide r:esistance Pat- terns : Correlation of in vitro and in vivo test results}} Scand J Infecl Dis Suppl 23 : 62-73 (1980).

18. Waitz J.A., Moss E.L., Drube C;G .• Weinstein M.J., «Compa- rative activi¹ty of sisomicin, gentamicin, kanamycin and tobramycin» Antimicrob Agents Chemother 2: 431-437 (1972).

19, Kawagı.ıchi H., Naito T., Naka- gawa S., Fujisawa K.I., «BB- K8, a new semisynthetic am:i- noglycoside antibiotic» J An- tiblot 25: 695-707 (1972).

20. Davis S.D. «Activity of genta- micin, tobramycin, polim~n

B, and colistimethate in mous¹e protection tests Wı:ith Pseudo- monas aeruginosa» Antimicrob Agents Chemotlıer 8 : 50-53 (1975).

21. Waitz J.A., «Laboratory eva- luation of aminoglycoside an- tibiotics" Development in In- dustrial Microbio!ogy 16 : 161-

174 (1975).