organizmaların kullanımı

Endüstri

 Taşlanmış jean’ların üretiminde GM organizmaların kullanımı

 Enzim ve deterjan gibi ajanların üretiminde GM organizmaların kullanımı

 Asit, alkol, boya, pigment, koku-tat bileşikleri ve diğer gıda katkı maddelerinin üretiminde GM

organizmaların kullanımı

 Kozmetik ürünlerinin üretiminde GM organizmaların kullanımı

 Petrol ürünlerinin arıtılmasında GM organizmaların

kullanımı

Çevre Koruma

 Atıkların ileri düzeyde parçalanmasında ve yeniden kullanımında GM organizmalardan yararlanma (çevreci mikroorganizmalar)

 Madencilikte GM organizmaların kullanımı

 Çevreci enerji üretiminde GM organizmaların

kullanımı

DNA ve RNA İzolasyonu

 Hücreve hücre çekirdeğinin lize edimesi (lizozim, mutanolisin, proteinaz K, SDS)

 DNA nın ekstraksiyonu(ayrılması): DNA sulu fazda kalırken, diğer atıklar organik fazda kalır

(fenol-pH 7.6 nın üzerinde dengelenmelidir-, fenol/kloroform, kloroform/izoamil alkol)

 Alkol ile çöktürme: (etanol, izopropanol)

 Tuz ile çöktürme: (sodyum ya da potasyum tuzları)

 DNA Saflık Ölçümleri: Spektrofotometrik (260 nm)

 Etidyum bromit bağlanması

 Toplam RNA (Ultrasantrifüj) ve mRNA (polT kolon)

Restriksiyon endonukleazlar

 DNA üzerindeki kısa özel serileri tanırlar ve tanıma bölgesi yakınından keserler

 Tanıma serileri : genellikle 4 veya 6 baz çiftidir.

Ancak bazen 5, 8 baz çifti yada daha uzun olabilir

 Tanıma serileri palindrom özelliktedir

 Palindrom: Bir zincirdeki DNA dizisinin

tamamlayıcı zincirdeki DNA dizisi ile, ters yönde aynı olmasıdır

 Farklı kaynaklardan izole edilen ve aynı seriyi tanıyarak aynı bölgelerden kesen enzimler

izoşizomerdir. Bu enzimler eğer aynı tanıma

serisini farklı bölgelerden kesiyor ise yalancı

izoşizomerdir.

Restriksiyon endonukleazlar

 Palindrom örneği:GAATTC CTTAAG

 Bakterilerden izole edilen Restriksiyon Endonuklez enzimleri:

• Bakterinin adından türetilir

• Cins: İlk harfi oluşturur (büyük harfle yazılır)

• Tür- İkinci ve üçüncü harfleri oluşturur (küçük harfle yazılır)

• Diğer harfler suşlardan türetilir

• Romen rakamları aynı bakteriden izole edilen farklı enzimlerin sıra ve sayısını bildirmek için kullanılır

• Örnek: EcoKI

• E Escherichia

• Co coli

• K K suşu

• I E. coli K suşunda tanımlanan ilk enzim