長期給予母鼠嗎啡對其所生幼鼠腦中
NMDA 受體亞型 1A 與 2A 的
影響
Effect of chronic treatment ofmorphine on expression
ofNMDA receptor in the developing rat
中文摘要
嗎啡在在臨床上是被用來作為止痛劑。但它的臨床作用經常被侷限於它易於產生
藥物的依賴性及耐受性，一旦嗎啡被停用後即會產生令人難受的戒斷現象。嗎啡
與它的衍生物如海洛因，常因受到濫用而造成成嚴重的社會問題。在如今婦女吸
毒的比例也有增加的趨勢。若婦女在懷孕期間，依舊吸食嗎啡常會使其所生的下
一代有不良的影響，在短期的症狀而言，有新生時的嗎啡脫癮症狀的產生與高死
亡率。而長期而言，在出生後幾年其行為與學習常比正常的小孩來的遲緩，顯示
了嗎啡對於腦部發育有一定程度的影響。因此對於預防新生兒嗎啡脫癮症狀以及
瞭解嗎啡對於發育中的腦部所造成的毒性作用是非常重要的一個工作。過去本實
驗室曾經發現嗎啡組的初生幼鼠在出生後第
14 天腦中大腦皮質以及海馬迴之
N-methyl-D-aspartate receptor（NMDA receptor, 是一種興奮性氨基酸接
受體之一）的密度與控制組相比在出生後第
14 天時有較低的情形，但此一情形
到
30 天時則又回復正常。更進一步的利用西方墨點法則發現了嗎啡組在幼鼠出
生後第
7 天及第 14 天其腦部各腦區的 NMDA 受體各個亞型皆有減量調控的情
形但在第
30 天及 60 天時則沒有發生。為此我們推論長期給予母鼠嗎啡確實會
導致其所生幼鼠腦中的
NMDA 受體亞型發生減量調控，然此一減量調控是因為
含有
NMDA 受體的神經細胞數目的減少，還是只是因神經細胞上的 NMDA 受體
亞型的表現量減少？因此本研究在相同的動物模式下，利用免疫組織染色法來計
算這些幼鼠腦部在
cortex、hippocampus CA1、hippocampus CA3、dentate
gyrus、thalmus、mid brain、caudate putamen、global pallidus 及
accumbens nucleus 各腦區含有 NMDA 受體亞型 1A、2A 的神經細胞數目並
半定量其密度。結果我們發現在第
7、14、30 天的幼鼠在 cortex、hippocampus
CA1、hippocampus CA3、dentate gyrus、thalmus、mid brain、caudate
putamen、global pallidus 及 accumbens nucleus 各腦區含有 NMDA 受體
亞型
1A 與 2A 的神經細胞數目與正常幼鼠相較並沒有減少。但是卻可發現在
PND7 時嗎啡組的密度在 cortex 分別下降了 69.7±11.3%及 64.6±12.2%、
而
hippocampus CA1 分別下降了 74.7±10.1%、及 65.6±11.3%，在
hippocampus CA3 與 dentate gyrus 的 NR1A 與 NR2A 則分別下降了 72.6
±13.1%與 65.7±15.23%、caudate putamen 分別下降 34.6±11.1%、54.6
±11.5% 而在 accumbens nucleus 則沒有差異而在 PND14 時嗎啡組在
cortex 分別下降了 64.4±12.4%及 54.3±10.1%、而 hippocampus CA1 分
別下降了
78.6±11.5%及 77.6±21.4%，在 hippocampus CA3 與 dentate
gyrus 的 NR1A 與 NR2A 則分別下降了 62.3 ±14.8%與 72.4±11.4%、
caudate putamen 分別下降 32.6±14.2%、42.6±13.1% 。此結果與過去本
實驗利用西方墨點法與受體結合實驗的結果相符合。由此可知長期暴露在嗎啡底
下的幼鼠確實會造成其腦部
cortex、hippocampus CA1、hippocampus
CA3、dentate gyrus 與 caudate putamen 等各區神經細胞上 NR1A 與 NR2A
的減量調控但此一減量調控並不會造成神經細胞的數目上的減少。
英文摘要
Long-term neuropsychological abnormality has been documented in child born to morphine addicted mothers, but the mechanism of this phenomenon until now is not clear. Our previous studies found that ontogenic expression of the NMDA receptor in this rats is different to that of control rat by lacking an overshooting of NMDA receptor density on PND14.We also found that the expression of NMDA receptor subunit, namely, ( NR1A , NR2A , NR2B , NR2C ) proteins , in the cortex, hippocampus and striatum of morphine group rats is significantly less than at PND7 and PND14 as compare to that of control group. To further explore what kinds of NMDA receptor subunits are changed，our previous study had used western blotting to examine the expression of the NMDA receptor subunits .
However we have known what kinds kinds of NMDA receptor subunits are changed but we still don’t know wheather the decrease of the NMDA subtypes’ expression on morphine group rats compared with normal group rats on PND7 and PND14 is from the decrease of the cell number of neuron having NMDA receptor or the expression of NMDA subuit in each neuron is decreased. To address this tissue we used immunohistochemistry to examine the immunoreactivity of NR1A、NR2A in the brain of rats born to morphine-treated dam rats. We found that the number of cell containing NR1A and NR2A in the region of cortex、hippocampus CA1、hippocampus CA3、dentate gyrus、thalmus、mid brain、caudate putamen、global pallidus and accumbens nucleus of morphine rats were not different to that of control rat. On the contrast , in the cortex、hippocampus CA1、hippocampus CA3、dentate gyrus、 caudate putamen the density of NR1A and NR2A of morphine rats was dramatically decreased on PND7 and PND14 as compare to that of control group.
These results demonstrated that that rats born to chronic morphine addicted dam rats induce downregulation of NMDA receptor subunits and does not cause the decrease of the cell number of neuron having NMDA receptor.
