RiTLERDE ELISA YONTEMiYLE ROT A ViRUS ARA~liRILMASI
kusma. ate~ ve dehidratasyon nedeniyle hastaneye ba~vuran t,;Cit1Jklann gaitalannda Enzyme-linked
;.-...v~~Anr Assay (ELISA) metoduyla rotavirus oramm ara~trrdrk. Toplam 63 vakanm 11'inde (% 17.46) rotavirus
oort
hastada rotavirus ile birlikte patojen E.coli'de Oredi. Rota vir~-; . .t olan 7 cocuk 2 ya~rn altmda, 4 2 ya~m ozerindeydi. Cocuklarda gorOien bakteriyel olmayan gastroenteritlerin onemli bir bOIOmOnden sorumlu JIIH•iruslar bizim hastalanmrzm yakla~rk be~te birinde mevcuttu. Sonuc olarak; ozellikle cocukluk t,;agrnda henoz bir halk saglrgr problemi ve viral gastroenteritlerin cogundan sorumru olan rotavirus enfeksiyonlannrn•Uidllki dun111unun dana geni~ olarak ara~trnlmasr gerektigine inamyoruz.
rotavirus In stools of children with gastroenteritis by enzyme immunoassary{ELISA)
In this study; we have investigated rotavirus in stools of children with diarrhea, vomiting, fever and . . I'AIIIIn by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The positivty rates of rotavirus were 17.46%. In
IJJ~Iic culttures of 4 rotavirus positive patients pathogenic bacteria{E.coli) had grown at the same time.
seven positive tests results, In the group of infants under two years of age, while there were four positive In the older age group. Rotavirus infections are responsible from a significant number of non-bacterial
•IIIBrilis in children. For this reason; we believe that rota virus infections should be considered more frequently
•llllligatr~ in a wider group of cases our country.
gastroenteritler yaf(rn zamana kadar kendi kendine sonlanan tehlikesiz hastalrklar olarak bilinirdi; fakat sosyokui!Orel seviyesi dO§Ok toplumlarda ve malnOtrusyonu olan cocuklarda cocuk oiOmlerine ve bazen de
.,.._.1!111
malabsorbsiyona katkrlan Ozerinde son yrllarda onemle durulrn:!ktad,r!:? ::1.5, 16).Oniversitesi Tip Fakiiltesi yocuk Sai}lii}J ve Hasta!Jklan Anabilim Da!J 6gretim Oyesi Oniversitesi Tip Fakiiltesi Mikrobiyo/oji Anabilim Da/1 6gretim Oyesi
Gastroenteritlerde Elisa Yontemiyle Rotavirus Ara$fmlmasi.'()ZT0RK, Adnan ve ark.
Ilk defa 1973 y1hnda akut gastroenteritli ~ocuklann duedonum mukozasmda Bishop ve arkada~lan rotavirusu tammlaml§lardlr (3). Reoviradae ailesinin bir Oyesi olan rotaviruslar insan ve hayvanlarda hastahk yaparlar ve farkh gruplara (A,8,C, .. ) aynhrlar. A grubunda bulunan insan rotaviruslan ortak bir grup antijenine sahiptirler ve iki subgruba (1,11) ve 4 serotipe aynhrlar (6). Tekerlege benzedigi i~in rota (latincede tekerlek demektir) denen ve RNA
i~ren rotaviruslarm hayvanlarda hastahk yapan tOrleri ile insanlarda hastahk yapan IOrleri morfolojik olarak benzer, antijenik olarak farkh yap1dad1rlar (6,14). Ancak ~e§itli rotavirus 1Ur1eri arasmda ortak bir Compleman-Fixation (CF) antijeni bulunmaktadlr (2,8,10,16).
lnsan rotaviruslan yakm zamana kadar hOcre ve organ k0110r10rinde Oretilememi§lir. Son zamanlarda bir in san rotavirusu olan
w
2, Afrika kokenli maymun oobrek hOcre kOitOrOne adapte edilmi§tir(11).Kusma ve dehidratasyonun e§lik ettigi rotavirus gastroenteritleri her ya§ grubunda gorOimesine ragmen en yOksek insidans 6-24 ayhk ~ocukluk ya§ grubundad1r.Enfekte ~ocuklarla temas eden adultlerde de %41 nisbetinde subklinik bir enfeksiyon gorOiebilir (1,3,5,12). <;in'de ~ocuklar ve eri§kinler arasmda ~iddetli diyarel epidemiye neden olan bir ajan ADRV (Adult diarrhea rotavirus) olarak adlandmlml§ ve bu virusa ail antiserumlann A ve 8 grub rotaviruslarla reaksiyon vermedigi fakat, 8 grubundan bovis yada porcine rotaviruslanyla reaksiyon verdigi ve bu yeni virusu saptamak i~in ELISA testi gerektigi bildirilmi§lir (13).
Biz bu ~h§mada; ~ocukluk ya§ grubunda ishal, ate§ ve kusma gibi belirtilerle seyreden vakalarda rotavirus insidansm1 tesbit etmeye ~ah§llk.
Materyal ve Metod
Erciyes Oniversitesi T1p FakOitesi <;ocuk lntaniye 8oiOmOnde 1989 yaz aylannda takip edilen ~§itli ya~larda 63 ishalli
~ocugun gaitalannda ELISA yontemiyle rotavirus antijeni ve bakteriyolojik metodlarla patojen barsak bakterileri ara§llrlldl.
Rotavirus antijeni i~in, Rotascreen® EIA (Mercia diagnosiics) mikrotitrasyon kiti kullamldl. Gaita ornekleri 2-3 gun i~in 2·8oc de, daha uzun sOre beklemesi gerektiginde ·20°C dipfirizde muhafaza edildi. ELiSA test kiti uygun §ekilde kullamld1. MikrodiiOsyonlarda antijen varhg1 enzim fotometresinde 450 nm'de okunarak kaydedildi.
Bulgular
63 gastroenteritli ~cugun gaita orneklerinin incelenmesinde, 11 vakada ELISA yontemi ile rotavirus antijeni tesbit edildi (% 17.46) . Rotavirus pozilif 11 ~ocugun yedisi 2 ya§mdan kO~Ok, dordO 2·1 0 ya§ grubundand1. Rota virus pozitif 3 omekte; biri 2 ya§mdan kO~Ok, 2'si 2·10 ya§ grubunda enteropatojenik E.coli Oredi, yani ~ift patojen etken vard1.
,_..mlsrde Elisa Yontemiyle Rotavirus Ara$1mlmast:6ZTORK, Adnan ve ark.
,...
astroenteritler ~ocukluk ya~ grubu. i~in ciddi proble~ te~kil ederler. E~olojisinden vir~slann sorumlu ol~ugu viral
AIUG
teritlerin en srk nedenleri; rotavrruslar, norwalk-like vrruslar, astrovrruslar, adenovrruslar, concarnovrruslardrr.r:::narasrnda da rotaviruslar ve norwalk-like viruslar ilk srrayr ahrlar (2,5).
H~S~a~anmrz; ishal, kusma, ate~ ve dehidratasyon nedeniyle hastaneye yatrnlmr~lardr. Rotavirus enfeksiyonlannrn klinik
belrtleri
Tabla l'de gosterilmi~tir. _ TlbOII. Rotavirus enfeksiyonlarrnda klinik belirtiler (5)ICinik belirti Hastaneye yatrnlan(%) Poliklinikte takip(%)
lnl
100 681C&Bna 96 82
URI 64
- 0st soluoom yollansemptomlarr 49 77 78
Datichtasyon 83
Aolaviruslann serotiplerine gore antijenler kompleman fiksasyon, immOnHoresan ve ELISA yontemleriyle tesbit edilebilir (2,5). ELISA testi gOnOmOzde gittik~e artan oranda antijen ve antikor aranmasr ~alr~malarrnda kullanrlmaktadrr.
Aolavirus enleksiyonlannda serumdaki antikorlarla enleksiyona diren~ arasrnda bir paralellik bulunmamaktadrr.
Enlakslyona diren~te barsak mukozalanndaki antikorlarda onemli rol ahrlar (3).
Kapikian ve arkada$1an Bangalde$'te yaptrklan ~h$mada 1 ·yrl boyunca , ishali alan 2 ya~rn altrndaki ~ocuklarda ialavlrusu %46 pozitif bulmu$1ardrr (13). 2 ya$rn altrndaki ~ocu~larda rotavirus enleksiyonu insidansr en fazladrr.
Dehichtasyon 12·18 aylarda en srk gorOIOr. Enfeksiyonun insidansr ve ~iddeti ya~ ile serum ve barsaklardaki antikor
~i artr~ bagh olarak onemli oi90de azalmaktadrr ( 1, 12).
~amrzda rotavirus pozitil olan hastalarrn ( Toplam 63 hastada %17 .46) 7'si iki ya~rndan kO~Ok digerleri iki ya~rn Ozarinde ve litaratOr ile uyumlu idi. Lewis ve arkada~lan (12) ~~~~malannda rotavirus ile beraber patojen bakterileri;
sabonella berkeley, Salmonella typhimurium ve E.coli 0125; tesbit etmi$1erdir. Hastalanmrzrn 4'0nde rotavirus ile
beraber
patojen bakteri olarak enteropathogenic Escherichia coli'de gorOimO~tor. E.coli ile rotaviruslann sinerjitik qlalak enleksiyona neden olabilecegine dair yazrlar da mevcuttur(4, 15). Gerek bizim~ah~mamrz
gerekse daha onceki~Jar, rotaviruslann patojen bakterilerle beraber enfeksiyon nedeni olabilecegini gostermektedir.
83
Gastroenteritlerde Elisa Yontemiyle Rotavirus Ara~tlfllmasdjn'ORK, Adnan ve ark.
Eri~kinlerde de subklinik rota virus enfeksiyonlan gorOimektedir. Geli~mekte olan Olkelerde yllda 5-10 milyon fatal seyirli rota virus enfeksiyonu gorOimektedir (11 ).
Degi~ik rotavirus ~u§lan ile atenOe a§llar denenmektedir (1,7, 10). Rotavirus a§1Sm1n uygulama zamam olarak 6 ay veya daha kOgOk ya§lar tavsiye edilmektedir(1 ).
(fal1§mam1zm sonucunda; gocukluk ya§ grubu non-bakteriyel gastroenteritlerinin gogundan sorumlu olan rotavirus enfeksiyonlannm bOigemiz ve Olkemizdeki durumunu ortaya koymak igin daha geni§ kapsaml1 gah~malann yap1lmas1 gerektigi dO§Oncesindeyiz
Kaynaklar
1. Anderson EL, Belshe RB, Bartram J, et al: Evaluation of rhesus rotavirus vaccina in infants and young children. J Infect Dis 153 :823-831,1986.
2. Barnett 8: Viral gastroenteritis. Med Clin North Am 67: 1031-1058, 1983.
3. Bishop RF: Viral Gastroenteritis Infectious diseaseas. In Braude AJ, Davis DE, Fierer J (eds): Medical Microbiology. WB Saunders Co, Philadelphia London Toronto 1986, pp 857-963.
4. Bishop RF, Hewstone AS, Davidson GP, et a/ : An epidemic of diarrhoea in human neonates involving a reovirus-like agent and' enteropathogenic' serotypes of escherichia coli. J Clin Path 29:46-49,1976.
5. Davidson GP: Viral Diarrhoea. Clin Gastroerterol 15:39-53, 1986.
6. Gerna G, Passarini N, Sarasini A, et a/ : Characterization of serotypes of human rotavirus strains by solid-phase immune electron microscopy. J Infect Dis 152: 1143-1151, 1985.
7. Gothefors L, Wade/1 G, Judo P, et at : Prolonged efficacy of rhesus rotavirus vaccine in Swedish children.
J Infect Dis 159 :753-757.
8. Gunnlaugson G, Smedman L, Grandien M, et al :Rota virus serology and breast-feeding in young children in rural Guinea-Bisau. Acta Pediatr Scand 78:62-66,1989.
9. Herrmann JE, Black/ow NR, Perron OM, eta/: Enzyme immunoassay with monoclonal antibodies for the detection of rotavirus in stool specimens. J Infect Dis 152:830-832,1985.
Bisa Yontemiyle Rotavirus Ara~tmlmasd)ZTORK, Adnan ve ark.
AZ, Flores J, Hoshino L, eta/ : Rotavirus: The major etiologic agent of severe infantile diarrhea may conrofab/e by a •Jennerian3 approach to vaccination.J Infect Dis 153:815-822,1986.
illl!oontilnAZ, Greenberg HB, Wyatt RG, et al: Viral enfections of humans. In Evans (ed): Viral Gastroenteritis.
edition. Plenum Medical Book Co, New York London 1983, pp 283-326.
HM, Parry JV, Davies HA, et a/ : A year's experience of the rotavirus syndrome and its association respiratory illness. Arch Dis Childhood 54:339-346,1979.
s,
Estes MK, Graham DY, et a/ : Antigenic charecterization and ELISA detection of adult diarrhea J Infect Dis 154: 448-455,1986.D: Kllnlk Vlrolojl. Ege Ttp FakOitesi Yaymt No:122, Ege Oniversitesi bastmevi Bornova-izmir, 1986, ss
SR, Makin TJ, Smith ML,et a/: Clinical manifestations of diarrhea in calves infected with rotavirus
""'''lde~rrten~toxigerlic escherichia coli. J Clin Microbial 13: 1011-1016,1981.
JL, Schreiber OS: Viral gastroenteritis. Med Clin North Am 66:575-595, 1982.
85
