Presence of campylobacter coli in water line of broiler houses

Kafkas Univ Vet Fak Derg 17 (6): 1035-1038, 2011

Etlik Pilic Kiimeslerin Su Hatlarinda Campylobacter coliVarhoi El'

Yavuz COKAL *

Vildan CANER ** Cengiz CETiN ***

Ay§in SEN ***

[1] Bu calisma TOBITAK tarafindan desteklenen 104T242 numarali proje kapsamindadir * Balikesir Universitesi, Bandirma Meslek Yuksekokulu, TR-10200 Balikesir -TORKIYE

** Pamukkale Universitesi, Tip Fakultesi,Tibbi Biyoloji Anabilim Dali, TR-20020 Denizli -TORKIYE *** Uludag Universitesi, Veteriner Falatesi, Mikrobiyoloji Anabilim Dali, TR-16059 Bursa - TORKIYE

Makak Kodu (Article Code): KVFD-2011-4609

Ozet

Bu calismada, ticari etlik pilic kumeslerin su hatlarinda Campylobacter coil varliqinin belirlenmesi amaclandi. Birbirinden yaklasik 25 km. uzaklikta bulunan, artezyen ve [coy sebeke suyu olmak Cizere farkli icme suyu kaynaqina sahip iki kunnesten, (.14 ardisik siir0 doneminde ornekler toplandi. Her iki kumeste de icme suyu, nipel svap ye taze disk' orneklerinden C. coil izolasyonu yapildi. Bu sonuclar, C. co/rnin etlik pilic kumeslerinin su hatlarinda var olduqunu ye icme suyunun surulerin C. coil ile kolonizasyonunda bir kaynak olabileceqini clusundlirmektedir.

Anahtar sozciikler: Campylobacter coli, Etlik pilic, Su

Presence of Campylobacter coli in Water Line of Broiler Houses

Summary

This study aimed to determine the presence of Campylobacter coil in water lines of commercial broiler houses. The samples were taken in the period of three sequential flocks in two houses. There was a distance of approximately 25 km between the houses and drinking water was supplied by groundwater in one house while the municipal water system with polyvinyl chloride plastic pipe was the source of drinking water in the other. C. coil was isolated and identified in drinking water and nipple swab samples, and fresh fecal dropping samples in both houses. The results of this study suggest that C. coil could be found in water-line of commercial broiler houses and drinking water might be a source for flock's colonization by C. coll.

Keywords: Campylobacter coli, Broiler, Water

GIRIS

Termofilik Campylobacter tuned insanlarda gastro-intestinal infeksiyonlara neden olan onemli gida ye su kaynakli patojenlerdir. infeksiyonlardan cogunlukla C jejuni ve C. coil sorumludur. Her iki tur patojen de evcil ye yabani hayvanlarin normal bagirsak florasinda bulunmaktadir. Ozellikle infekte etlik pilic surOler onemli rezervuarlardir ve kontamine kanatli etleri insanlardaki infeksiyonun en onemli kaynagi olarak degerlendirilmektedir. Bu nedenle, insanlarda Campylobacter infeksiyonundan korunmada, kanatli enclustrisindeki en etkin stratejilerden biri de siinj bazinda kolonizasyonun onlenmesidir Adkin ve ark.2, etlik pilic surOlerin Campylobacter ile infekte olmasinda '<Limes su kaynaklannin kontaminasyonunu da iceren

37 farkli faktorun etkili oldugunu Yeralti su kaynaklarindan icme suyuna kadar olan su hatlannin Campylobacter ile kontamine olmasi, insanlarda su kaynakli infeksiyonlar oluturnnasi yam sera kanatli sib-Glen ve diger hayvanlar icin de infeksiyon kaynagi olmasi acisindan onernlidir. Bu ca4mada, ticari etlik pilic kunneslerin su hatlarinda C. colivarliginin belirlenmesi amaclanmOr.

MATERYAL ye METOT

Ticari etlik pilic kumeslerinin su hatlannda C. coli'nin

varliginin belirlenmesi amaci ile Zimmer ye ark:nin

hedsim (Correspondence) M) +90 266 7149302-03/116

yavuzcokal@yahoo.com P4

1036

Et lik Pilic Kiimeslenn Su ...

tanimladi6i protokol kOcuk modifikasyonlarla uygulandi 3. ca4ma, birbirinden yaklaik 25 km uzaklikta bulunan iki etlik pilic kumeste, Cic sure doneminde

Kurneslerin icme suyu kaynakiari, kOnnes 1 icin artezyen suyu ve kilmes 2 icin kay §ebeke suyu idi. Her iki kumeste de icnne suyu, su kayna§indan PVC borularla kumese tasinmakta, fiberglas depoda biriktiriimekte ve nipel suluk-!aria kumese da§rtilmaktachr. Her iki kumesin de su hatti, her donem arasinda yapilan temizlik ye dezenfeksiyon esnasinda, sodyum hipoklorit solusyonu ile dezenfekte edildi. lcme suyu ornekleri, kumeslere su saglayan ana borudan (500 ml ye 1 L) ye birinci surUnCin nipel suluk-larindan (500 ml) alindi. '<Limes yakin ana su boru-sunun ic kismindan her biri 10x10 cnn2lik bir alani kapsaya-cak §ekilde svap ornekleri lie ikinci ve UgUncil surillerde nipel suluklann pasianmaz celik pin basliklarindan svap ornekleri alindi. Ayrica, ardi0c Lic surOden de olmak Ozere, surunun yerlevnesinden itibaren kesime kadar her hafta rast gele secilen yaklaik 20 adet taze diOci ornekleri alindi. Tum Ornekler, souk ortamda, en kisa Wrede laboratuara

Steril cam ielere alinan su ornekleri, 0.22 pm por caph filtreler (GSWG047S1, Millipore) kulianilarak, Membran Filtrasyon Cihazi (Sartorius AG) lie filtre edildi. Su orneklerinin bir serisinden uzaklastinlan her bir filtre, 50 ml Hunt Enrichment Broth (HEB) 4 Oren steril cam ielere aktanldi ye 42°C'de 48 saat mikroaerobik kowllarda (BR60, Oxoid) inkubasyona birakildi (an zenginleWrme). Inkubas-yon sonrasi orneklerin Modified Charcoal Cefaperazone Deoxycholate Agar (mCCDA) (CM739, SR155, Oxoid) besi-yerine pasajlan yapildi ve 42°C'de 48 saat mikroaerobik kosullarda inkubasyona birakildi. Di§er seriye ait filtreler direkt olarak mCCDA besiyerine yerietirildi ye ayni kowl-larda inkUbe edildi. Svap ornekleri, 10 ml HEB iceren tup icine aktariidi ye su orneklerinde belirtildigi §ekilde an zenginleOrme ye sonrasinda mCCDA besiyerine pasajlan yapildi. Taze ornekleri direkt mCDDA besiyerine ekimieri yapilarak 42°C'de 48 saat mikroaerobik kowllarda inkUbasyona birakildi. Hem direkt kultur hem de an zenginleOrmeli kultur yontemi lie inkubasyon sonrasinda kati besiyerlerinde gozlemlenen Campyiobacter upheii

kolonilerin saf kulturleri hazirlandi ye hippurat hidrolizi, TSI'da H2S Oretimi, oksidaz, katalaz, nitrat indirgenme testi ile biriikte nalidiksik asit ye sefolitin duyarhlik test sonuclanna dayanilarak tut- duzeyinde identifikasyonlari yapildi S.

BULGULAR

Urines 1 ye Mimes 2'den alinan icnne suyu, nipel svap ve taze cli§ki orneklerinden C. coil izolasyonu yapildi (Tablo 1). Taze ch§ki orneklerinde, sirasiyla birinci ye ikinci sOrillerde 4. ye 1. haftalardan itibaren, ucuncu surulerde ise 2. ye 3. haftalardan itibaren C. coil izole edildi. Her iki kumeste de, sill-Wet-in kesim ya§ina yakla§tikca C. coil izolasyon oraniarinda arts goruldu.

TARTIMA ye SONK

Geli§mi§ ulkelerde, insanlarda gastroenterit vakalann-dan en sik izole edilen bakteriler Campyiobacter turleridir ye olgulann buyiik bir cog" unlu§undan C. jejuni (%90) ye C. coil (%5-10) sorurnlu tutulmaktadir 6. Bu nedenle Campylobacter infeksiyonlarinin epidemiyolojisi lie iigiii cali§malar C. jejuni Uzerine odaklanmi§tir. Ancak, C. coil infeksiyonlannin daha uzun sure hastanede yati§a neden olmasi ye infeksiyon sonrasi irritabl bagirsak sendromu lie yangisal bagirsak hastaliginin gelid arasindaki ili§kinin belirlenmesi, C. co/Min de ekonomik acidan onemli bir halk sagligi probiemi oldu§unu gostermektedir 6-8. Ayni zamanda, C. collnin antibiyotiklere kari guclu direnc profilini ye birincil immun yetmezlik hastaligi olanlarda yuksek ortaya koyan buigular, bu bakterinin insanlar kin onemli bir patojen oldu§unu vurgulamakta-dir 9,10. Bu nedenlerle, insanlarda C. coil infeksiyon kay-nakiarinin ye aracilannin belirlenmesi, soz konusu infek-siyondan korunmada onemli veriler saglayacaktir.

Molekuler tabanli ca4malar, insanlarda C. coil infeksi-yonunun en onemli kaynaginin kanath hayvanlar oldL4inu

Tablo 1. Etlik pilic kOmeslerden alinan orneklerde C. coil izolasyon sonuclan Table 1. Results of C. coli isolation from samples in broiler houses

ornekler

Ana su borusu

-500 ml

- 1 L

Ana su borusu svap

Nipref suluit su Nine! svap

Taze disks

X: Alinmadi

Mimes

C. coil izolasyonu f arm* Sayrst

-/4 3 / 6

-/ 4 3 / 6

-/ 8 .J4

1.5061 2. Sitru 3. 50r0 1. SOru 2. SOW 3. Surd

2120 X

,j(

X 1 / 12 2 / 24 X 2 / 12 2/24

gostermistir ",12. C. co/i, kanatli hayvanlann yani sira farkli ciftlik hayvanlarinda da infeksiyona neden olmaktadir 13.

Ulkemizde, kanatli isletmelerinde kullanilan sularin belirli nitelikiere sahip olmasi yasal duzenlemelerle belir-lenmistir 14. Kumesierde cogunlukla artezyen suyu ya da bulundugu yerlesim yerinin sebeke suyu kullanilmaktadir. Degisik Olkelerde yapilan calismalarda C. coli'nin Mimes icme sularinda varligi belirlenmistir. Perez-Boto ve ark.15, ana damizlik suriilerde yaptikiari calismada, yaklasik 15 m deriniikteki kuyulardan depolara tasinip kiorlama sonrasi kumeslerde kullanilan icme suyunda C. coil varligini ortaya koymuslar ve ayni genotipi kloakai svap orneklerinde de tespit etmislerdir. Sasaki ye ark.16, dezenfekte edilmis ye edilnnemis su kaynaklarini kullanan etlik pilic kumesier-den aidikiari icme suyu orneklerinde Campylobacterspp. varligini ye dezenfekte su kullanilmasinin koioni-zasyon riskini azaltabilecegini bildirmislerdir. Bu calisma-da, biri artezyen diger' de koy sebeke suyu kullanan ve yetistirme donemleri arasinda su hatiari dezenfekte edilen iki kUmesin ana su borusundan ye nipel suluklarindan su ornekleri alindi. Ana su borusundan alinan orneklerde, izolasyon basarisini artirmak amaciyla '7 500 ml ve 1 L

olmak Ozere iki farkli hacimde su ornekleri paralel

Mimes 2'nin ana su borusu orneklerinden C coil izole edilirken Kurnes 1'in orneklerinden edilmedi. Nipel suluk orneklerinden ise her iki kumeste izolasyon gerceklesti.

Campylobacter turlerinin hassas yapilan nedeniyle su ornekleri gibi cevre orneklerinde hem clusuk konsantras-yonlarda hem de canli ancak kiiitUr0 yapilamayan (VBNC) formda bulunabildikieri rapor edilmistir 1518. Bu nedenle su ye sulu yOzey orneklerinden yapilan izolasyon calisma-larinda her zaman basari saglanamayabilir. Ulkemizde kumeslere su dagitinni cogunlukla PVC borular ve nipel sulukiar yardimi iie yapilmaktadir. Su, uzun bir sure boru-larda kalabiimektedir ye bu da hem boruboru-larda hem de suluk basliklarinda biyofilm olusumuna neden olabilmektedir 3. Bu nedenle, calismada, kiimeslere icme suyunu getiren ve PVC olan ana su borusunun i4 yOzeyinden ye nipel suluk baslik yOzeylerinden svap ornekleri alindi. Her iki kumeste de ana su borusu is yOzey orneklerinden ye bazi nipel suluk baslik yOzey orneklerinden C. coil izolasyonu yapilamadi. Bu durum, bakterinin tek basina veya diger mikroorganizmalarla birlikte bu tut- yOzeylere yapisarak biyofilm olusturabildigini ve bu biyofilmier icinde VBNC formda bulunabildiklerini clusundurmustur. Bununla bir-likte, alinan taze diski orneklerinden yapilan izolasyonlar lie her iki kumesteki ardisik Oc surunun C. coil tasiyicisi oldugu belirlendi. KUmeslerden alinan orneklerden C co/i yani sira C. jejuni de izoie edildi 19. Her ne kadar Mimes su hatlarindan elde edilen izolatiar iie taze disk' izolatiari arasindaki klonal iliskinin belirlenmesine gereksinim oisa da, bu calismanin bulgulan kanatli kumeslerinde kullani-Ian icme suiarinin, sUrOlerin C. col/ lie infeksiyonunda iinennli rol oynayabilecegini clustindOrmektedir. Bu ne-denle, halk sagligi acisindan, etlik pilic sUrOlerde soz

ko-1037

coKAL, CANER

cETIN, BEN

nusu infeksiyonun kontrolOnde, icme suyunun dezenfek-siyonuna gereken ozenin gosterilmesinin yararli olacagi aciktir.

KAYNAKLAR

1. Humprey T, O'Brien 5, Madsen M: Campylobacters as zoonotic

pathogens: A food production perspective. Intl Food Microbiol, 117,

237-257, 2007.

2. Adkin A, Hartnett E, Jordan L, Newell D, Davison H: Use of a

systematic review to assist the development of Campylobacter control

strategies in broilers. J Appl Microbiol, 100, 306-315, 2006.

3. Zimmer M, Barnhart H, Idris U, Lee MD: Detection of Campylobacter jejuni strains in the water lines of a commercial broiler house and their

relationship to the strains that colonized the chickens. Avian Dis, 47,

101-107, 2003.

4. Hunt JM: Campylobacter. In, FDA Bacteriological Analytical Manual. 7th ed., pp. 77-94, Association of Official Analytical Chemists, Arlington,

VA, 1992.

5. On SLW, Holmes B: Assessment of enzyme detection tests useful in identification of campylobacteria. J Clin Microbiol, 30, 746 -749,1992. 6. Tam CC, O'Brien SJ, Adak GK, Meakins SM, Frost JA: Campylobacter coli - An important foodborne pathogen. J Infect, 47, 28-32, 2003. 7. Marshall JK, Thabane M, Garg AX, Clark WF, Salvadori M, Collins

SM: Incidence and epidemiology of irritable bowel syndrome after a

large waterborne outbreak of bacterial dysentery. Gastroenterology, 131,

445- 450,2006

8. Helms M, Simonsen J, Meilbak K: Foodborne bacterial infection

and hospitalization: A registry-based study. Oin Infect Dis, 42, 498-506,

2006.

9. Thakur S, White DG, McDermott PF, Zhao S, Kroft B, Gebreyes W, Abbott J, Cullen P, English L, Carter P, Harbottle H: Genotyping of Campylobacter coli isolated from humans and retail meats using

multilocus sequence typing and pulsed-field gel electrophoresis. J Appl

Microbiol, 106, 1722-1733, 2009.

10. Dionisi AM, Milito C, Martini H, Pesce AM, Mitrevski M, Granata

G, Lucarelli C, Parisi A, Luzzi I, Quinti I: High prevalence of intestinal

carriage for Campylobacter coli in patients with primary antibody

deficiencies: A silent infection that could shift to a life-threating condition.

J Clin Gastroenterol, 45, 474-475, 2011.

11. Siemer BL, Nielsen EM, On SLW: Identification and molecular

epidemiology of Campylobacter coli isolates from human gastroenteritis, food, and animal sources by amplified fragment length polymorphism analysis and Penner serotyping. Appl Environ Microbiol, 71, 1953-1958,

2005.

12. Sheppard SK, Dallas JF, Wilson DJ, Strachan NJC, McCarthy ND,

Jolley KA, Colles FM, Rotariu 0, Ogden ID, Forbes KJ, Maiden MCJ:

Evolution of an agriculture-associated disease causing Campylobacter coli Glade: Evidence from national surveillance data in Scotland. PLoS ONE, 5 (12), e15708, 1-9, 2010.

13. Bilyiik F, celebi 6, h in M, (Myer A, Tazegill E: iki Farkli Koyun ve

Keci Surusunde Brucella ve Campylobacter Ortak Enfeksiyonu. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 17 (Suppl A), S177-5180, 2011.

14. Resmi Gazete: Kuluckahane ve damizlik kanatli i§letmeleri

yonetmeli§inde yapilmasina dair yonetmelik. 22 Maps 2009 tarih ve 27235 sayih resmi gazete. http://www.resmigazete.gov.tr/main. aspx?home=http://www.resmigazete.gov.tr/eskiler/2009/05/20090522. htm&main=http://www.resmigazete.gov.tr/eskiler/2009/05/20090522.

htm Erigm Tarihi: 04.04.2011.

15. Perez-Boto D, Garcia-Pena FJ, Abad-Moreno JC,

Hurtado-Pizarro MD, Perez-Cobo I, Echeita MA: Drinking water as the source of Campylobacter coli infection in grandparent heavy breeders. Avian

1038

Et lik Pi lic Kiimeslerin Su...

16. Sasaki Y, Tsujiyama Y, Tanaka H, Yoshida 5, Goshima T, Oshima K, Katayama 5, Yamada Y: Risk factors for Campylobacter colonization in

broiler flocks in Japan. Zoonoses Public Health, 58, 350-356, 2011.

17. Abulreesh HH, Paget TA, Goulder R: Campylobacter in waterfowl and aquatic environments: incidence and methods of detection. Environ

Sci Technol, 40, 7122-7131, 2006.

18. Josefsen MH, Lofstrom C, Hansen TB, Christensen LS, Olsen

JE, Hoorfar J: Rapid quantification of viable Campylobacter bacteria

on chicken carcasses, using real-time PCR and propidium monoazide

treatment, as a tool for quantitative risk assessment. Appl Environ

Microbial, 76 (15): 5097-5104, 2010.

19. Cokal Y, Caner V, Sen A, Cetin C, TOR M: The presence of

Campylobacter jejuni in broiler houses: Results of a longitudinal study. Afr