A.O.
Veteriner Fakültesi BakterIJ'oloji ve Salgınlar KürsiisüOrd. Prof Dr. S. Tahsin Aygün
BAZI SELEKTiF BAKTERIOSTATİK MADDELERE. KARŞI
KEÇi ORİJİNLi PLEUROPNEUMONIA - LIKE ORGANISM'
LERiN (PPLO) HASSASiYETİ ÜZERİNE ARAŞTIRMA
Muzaffer Beşe" Selahattin Can**
Girİş
Erdoğan Finci***
Son senelerde yapılan araştırmalar insan ve hayvanlarda, PPLO gurubu mikroorganizmaların ciddi ve önemli enfeksiyonlara sebep oldukları m or-taya kGymuştur (5,7,9, ıı). Bu grup mikroorganizmalardan (M ycoplasma mycoides var. capri) nin keçilerde klasik keçi ciğer ağrısını sebep olduğu kabul edilmektedir (3,6,8,10).
Gerek insan ve gerekse hayvanlara ait değişik patolojik materyalden PP LO gurubu mikroorganizmaları saf kültür halinde izole etmek çok 7.Or-dur ve hatta bazan mümkün değildir. Zira bu gurup mikroorganizmalar ek-seri ya patolojik materyalde çeşitli bakteriler ile birlikte bulunur (9,14).PPLO gurubu mikroorganizmalar zenginleştirilmiş besi yerlerine ve birkaç günlük inkubasyona ihtiyaç gösterirler (9). Bu hal ise patolojik materyal de mevcut çeşitli bakterilerin çok çabuk ve bol üremesine sebep olur. Böylece katı besi yerinde üreyen bu bakteriler çok küçük PPLO kolonilerini örter ve bunların izolasyonunu güçleştirir, hatta imldnsız kılar (9, 14).
Besi yerinde mevcut bazı antibiyotikler özellikle peniciIlin PPLO gu-rubu mikroorganizmaların üremesini inhibe etmez (z, 4). Hatta bakteriyel kontaminasyona engel olarak bu gurup mikroorganizmaların izolasyonuna yardım eder (14). Buna rağmen besi yerinde mevcut penicillin, Dienes (z)'in gösterdiği gibi, PPLO gurubu mikroorganizmaların İzolasyonunda bazı hata ve güçlüklerin ortaya çıkmasına sebep olur. Penicillin mevcudiyetinde katı besi yerinde bazı bakterilerin üremesi inhibe edilir ve bakteriyel koloniler çok küçük teşekkül eder (z). Bunları PPLO kolonilerinden tefrik etmek çok
* A.Ü.Veteriner Fakültesi Bakteriyoloji ve Salgınlar Kürsüsü Doçemi. Ankara-Türkiye ** A.Ü.Veteriner Fakültesi J3akteriyoloji ve Salgınlar Kürsüsü Asistan!. Ankara-Türkiye *** A.Ü.VeterinerFakültesi Bakteriyoloji ve Salgınlar Kürsüsü Asistanı.Ankara-Türkiye
Keçi Orijinli PPLO'ıııııı HlI"a,iyeti
zor olur ve hatta mümkün değildir (z, 14). Diğer bir hata da, penicillin mev-cudiyetinde bazı bakteri nevilerinin L-form haline geçmesinden ileri gelir (14). Beşe (I) Keçiciğer ağrısından şüpheli materyallerden PPLO izolasyonu çalışmalarında buna benzer sonuçlar müşahede etrriıtir. Klieneberger-Nobel (9)'in bildirdiğine göre; Brown ve Hayes sulfadiazin yardımı ile Gonococci kültürlerinden, Beveridge besiyerinde sulfanilamide ilave ederek urethra'-sından PPLO izole etmişlerdir.
PPLO gurubu mikroorganizmaların bakteriostatik maddelere, karşı has-sasiyeti üzerine ilk incelemeler Edward (4,j) tarafından yapılmıştır. Edward
(4) bu araştırmasında, bazı selektif bakteriostatik maddenin kontaminasyon bakterilerinin üremesini durdurduğunu, buna mukabil PPLO gurubu' mik-roorganizmaların üremesini inhibe etmediğini tesbit etmiştir. Araştırıcı (4) çalışmaları sonucu; penicillinle beraber thallium acetate'ın selektif bir inhi-bitor olduğunu ve I: i 00.000 konsantrasyonda bile brillant yeşilinin toksik
olduğunu tesbit etmiştir. Bu arada araştırıcı '(4) thallium acet;lte'ın, gram-negatif bakterilerin hassas olduğu potassium tellurite üstün değer taşımadı-ğını beyan etmiştir.
Smith ve arkadaşları (14) insandan izole edilen PPLO gurubu mikro-organizmalar metabolizmasının, bakteriostatik maddelere hassasiyeti yönün-den bakteri metabolizmasından farklı olduğunu beyan etmişlerdir. Bu araş-tırıcılara (14) göre; Pleuropneumonia-like organizmler, ne gr~m- pozitif ve ne de gram negatif bakteriler gibi özellikler gösterirler. Ekseri gram negatif bakterilerin üremesini durduran potassium tellurite'in i: j0000 konsantrasyonu,
keza gram- pozetif bakterilerin üremesine engel ol,an crystal violet'in
1:100000 konsantrasyonu bu mikroorganizmaların üremesinc engel olmaz (14).
Smith ve arkadaşları (14) hem sıvı ve hem de katı besi yerinde Nile blue A, thionin ve brillant yeşili gibi bakteriostatik maddelerin insan orijinli Pleu-ropneumonia -like organizmIere çok toksik olduğunu bulmuşlardır. Araş-tırıcılar (I 4) bu çalışmalarında, üremeyi artırıcı madde olarak serum yerine
%
2j ascitic sıvısı kullanmışlardır. Daha sonra Smith ve Morton (I j)seru-mun
%
i konsantrasyondaki özel bir fraksiyonunun ziyadesiyle üremeyiartırdığın! ınüşahede ctmişlerdir.
Morton, Smith ve Keller (13) in bildirdiklerine göre; crystal violet,
%
J serum fraksiyonu ile zenginleştirilmiş besi yerinde, Pleuropneumonia- likeorganizmaların üremesini inhibe etmektedir. Halbuki ayru besi yeri ascitic sıvısıyla zenginleştirilirse bu' mikroorganizmalar crystal vialetin mevcudi-yetinde üremektedirler (I 3)'
Morton ve Lecce (I 2) nin bildirdiklerine göre; insan sığır ve at serum-larından hazırlanan serum fraksiyonları, Pleuropneumonia-like organizm-lerin üremesi üzerine cristal violet'in toksik tesirini gidermede, aynı dere~
M. Beşe .. S. Can - E. Finci
eede tesirsizdirler. Halbuki besiyerinde
%
i veya%
1,5 konsantrasyondakihemoglobin, Pleuropneumoni:ı-like organizmler için, crytal violet'in toksik tesirini tamamile değilse bile bir dereceye kadar azaltmaktadır (I 2). Aynı araştırıcılar (I 2) kültür vasatının total protein muhtevisinin, Pleuropneumo-nia-like organizmierin üremesi üzerine crystal violet'in toksik tesirini gi-dermede roloynadığını, buna mukabil kültür vasatının total protein mu h-tevisinin thallium acetate'in selektif tesirinde müessir olmadığını tesbit et-mişlerdir. Hatta sıvı besiyerinin her cc.de, en fazla LO mgr. ve en az0,1 mgr.
protein mevcudiyeti, thallium acetate'in selektif tesirinde aşikar bir deği-şiklik göstermemiştir (I 2). Araştırıcılar (I 2) thallium acetate'in antibakteri-yel tesirinin crystal violet ve potassium tellurite'in kombine tesirlerine ben-zer olduğunu beyan etmişlerdir. Morton ve Lecce (I 2) thallium acetate'in; bakterilerden L-formu husule getirmediğini, geniş bakteriyel spektruma sa-hip olduğunu, hem gram-negatif ve hem de gram- pozetif bakterileri inhibe ettiğini, sterilizasyondan evvel besi yerine ilave edilebileceğini, selektif tesi-rinin kültür vasatının protein muhtevisine bağlı olmadığını ve pleuropneu-monİ;:-like organizmierin izolasyon ve kültür çalışmalarında çok faydalı so-nuçlar vereceğini bildirmişlerdir. Klieneberger- Nobel (9) katı besiyerinde kontamine materyalden PPLO'ların izolasyonu için i:4000
konsantrasyon-da thallium acetate kullanılmasını tavsiye etmektedir.
Biz bu araştırmayı evvelce yaptığımız araştırmalarda karşılaştığımız güç-lükleri dikkate alarak hayvanlardan dolayısiyle keçilerden PPLO gurubu mikroorganizmaların izolasyonunda kolaylık sağlıyabilir amacı ile bazı bak-teriostatik maddeye karşı keçi orijinli PPLO suşlarının hassasiyetinin tayine çalıştık.
Materyal ve Metot
Bu araştırmamızda kullanılan keçi orijinli PPLO suşlarının ne zaman ve hangi araştırıcıdan temin edildiği önceki araştırmamızda bildirilmiştir (ı). Bu arada deneylerimize sokulan (Myeoplasma agalactiae) Dr. Ahmet Ozsoy'dan alınmıştır. Kontrol suş olarak dört gram-pozetif ve dört gram-negatif suş kullanıldı.
Bu çalışmamızda sodium azide, potasium tellurite, thallium acetate C. P. (Fisher Scientific Company, Fisher Laboatory Chemical, New-York.), Crystal violet, basic fuchsin, thionin (Fisher Scientific Company, National Aniline Division, New-York.) kullanıldı.
Çalışmalarımızda aşağıdaki besiyerleri kullanıldı:
i - Sığır kalp buyyonu: Bu besiyerinin hazırlanışı daha önceki
Keçi Orijinli PPLO'nun Hassasiyet
nisbetindeki at serumu ile bu besiyeri zenginleştirildi. Kimyasal madde ve boyaların distile suda i
i
i00 konsantrasyonları hazırlandı. Bunlar 100° C.de 3° dakika Koch cihazında sterilize edildi. Yalnız potassium tellurİte sterilize edilmeden aseptik olarak cesiyerlerine ilave edildi. 2jO cc. miktarındakisı-ğır kalp buyyonlarına arzu edilen konsantrasyonlarda bakteriostatik madde ve boya ilave edildi ve j cc. halinde tüplere taksim edildi. Sterilite kontrolu
için bütün tüpler 24 saat 37
oc.
lik etüvde bırakıldı.2 - Tryptose Agar: Bu besiyerinin hazırlanışı daha önceki çalışmada
bildirilmiştir (ı). JOO cc. miktarında viski şişelerinde bu besiyeri
kullanıla-cağı zarr.an 100 ° C. lik Koch cihazında eritildi. Steril kimyasal madde ve bo-yalar arzu edilen konsantrasyonlarda ilave edildi. Tahminen 4°o - 45° C. de
steril at serumu ilave edildi ve retri kutularına taksim edilerek bir gece 37°
C. lik etüvde ve bir gece de oda derecesinde bırakıldıktan sonra kullanıldı.
3 - Kanlı Agar: Eritilmiş ve 40o - 45 ° C. ye düşürülen tryptose agara
%
ıo nisbetinde steril, defihine koyun kanı ilave etmek suretiyle hazırlandı. Kültürlerin sıvı ve katı besiyerine ekimi: İçerisinde (1000 ünite Ice.) renicillin ve%
ıo steril at serumu muhtevi sığır kalp buyyonunda PPLO suşları 37° C. lik etüvde 3 gün üretildi. İçerisinde değişik konsantrasyonda(l:jOOO, 1:10000, 1:25000, 1:500oo, 1:100000, 1:200000) kimyasal madde ve
boya muhtevi 5 cc. lik sıvı vasatlara, üretilmiş PPLO suşları o,i cc.
miktarın-da ekildi ve 3gün 37° C. lik etüvde bırakıldı. Keza aynı PPLO suşların kont-rol maksadı ile içerisinde kimyasal madde olmayan serumlu sığır kalp buy-yonuna ekiidi. İnkubasyondan sonra üreme olup olmadığı gözle muayene edildikten sonra kontrol gayesiyle her konsantrasyon bir öze miktarında se-rumlu tryptose agara ekiIdi ve bunlar 37° C. de 3 gün etüvde bırakıldı ve son-ra üreme kontrolu yapıldı.
24 saat 37° lik etüvde üretilmiş Kontrol suşları, değişik konsantrasyon-da kimyasal madde ve boya muhtevi besiyerine 0.1 cc. miktarında ekildi.
ve3 gün 37° C. de etüvde bırakıldıktansonra üreme olup olmadığını kontrol etrre\ maksadile serumlu tryptose agara ı öze miktarında ekiIdi.
İçerisinde değişik konsantrasyonda kimyasal madde ve boya muhtevi katı besiyerlerine, gerek PP LO suşları ve gerekse Kontrol suşları aynı zaman-da o.i cc. miktarında ekiidi. Ve cam bir bagetle petri kutusunun her tarafına
yayıldı. 37° C. etüvde 3 gün üremeye terk edildi. Bunu takiben her konsant-rasyonu havi pctri kutusundaki PPf ,O üremesi diseksiyon mikroskobu al-tında (jXıo) büyütme ile kontrol edildi. Keza Kontrol suşlarının üremesi göz muayenesı ile yapıldı.
M. Bc~c S. Cun - E. Fine;
Sonuçlar
Sıvı besiyerinde crystal violet'in ı:5000 konstantrasyonu, cetvel (I) de
görüldüğü gibi, PP LO suşlarının üremesini inhibe etmiştir. Keza i:1000
ve hatta ı:ı5000 konstantrasyonları bazı PPLO suşlarına toksik tesir
gös-termiştir. Çalışmalarımızda kontrol suş olarak kullanılan 4 gram-negatif bak-teri üzerine crystal violet'in sıvı besi yerindeki hiçbir konsantrasyonu toksik tesir göstermemiş, buna mukabil 4 gram-pozetif bakteri üzerine kuvvetli toksik tesir göstererek üremeleri muhtelif konsantrasyondainhibe edilmiştir. Katı besiyerinde ise crystal violet'in i:5000--i:50000 konsantrasyonları,
bütün PPLO suşlarının üremesini tamamiyle inhibe etmiştir. Ancak i:100000
konsantrasyonda crystal violet'in toksik tesirinin daha az, i:200000
konsant-rasyonda toksik olmadığı tesbit edilmiştir. Katı besiyerinde crystal violet'in muhtelif konsantrasyonları, 4 gram-pozetif bakterinin üremesini, Streptococ-cus equi hariç, i: i 00000 konsantrasyona kadar durdurmuştur. Buna mukabil
crystal violet'in i:5000 konsantrasyonu E. coli için toksik, keza
1:-5000- i:50000 konsantrasyonları S. gallinarum üzerine toksik tesir
göster-miştir. Diğer ı gram-negatif bakterinin üremesi hiçbir konsantrasyonda In-hibe edilmemiştir.
Hem sıvı ve hemde katı besi yerinde thallium acetate'ın 1:500o, 1:10000,
i:ı5000, i:50000, i: i 00000 ve i:ıooooo konsantrasyonları ıo PPLO suşu
ile 8 Kontrol suşu üzerine bakteriostatik ve toksik tesir göstermemiştir. Thal-lium acetate'ın daha alçak konsantrasyonlardaki bakteriostatik tesirini ince-lemek maksadiyle Lo PP LO suşu üzerine çalıştık. Cetvel (ı) de görüldüğü gibi, sıvı besiyerinde thallium acetate'ın i:1000, i:ıooo, ı:ı 500, i:4°°°,
1:-5000, i: i 0000 konsantrasyonları, PPLO suşlarının üremesi üzerine hiçbir
toksik tesir göstermemiştir. Keza kontrol suşlardan 4 gram-negatif bakteri-nin üremesi i:1000 konsantrasyonda bile inhibe edilmemiş, ancak 4 gram
pozetif üzerine az derecede bakteriostatik tesir müşahede edilmiştir.
Katı besiyerinde thallium acetate'in 1:1000, ı:ıooo, l:ı50o, 1:4000, 1:-5000 konsantrasyonları, aynı (cetvel ı) de görüldüğü gibi, lO PPLO suşunun
üremesine engel olmamıştır. Katı besi yerinde thallium acetate'ın i:i
oog
ve i:ıooo konsantrasyonları gram-negatif kontrol suşları üzerine toksik tesir göstermiş hatta bazılarının üremesini inhibe etmiştir. Buna mukabil katı besi yerinde thallium acetate, sıvı besiyerinde nazaran daha fazla toksik ve inhi-be edici özellik göstermiştir.Sıvı besiyerinde fuchsin'in i: 500o-1 :ıooooo konsantrasyonları PPLO
suşlarının üremesine hiç tesir etmemiştir. Buna mukabil 3 gram-negatif bak-teri hariç, S. gallinarum üzerine az toksik oıduğu görülmüş, 4 gram-pozctif bakterinin üremesi i: 5000 i: i 0000 hatta bazı suşlarda i:ı5000
konsantras-yonda inhibe edilmiştir (Cetvel. 3).
Crystal violetin PPLO suşları ve Bakteriler üzerine Bakteriostatik tesiri (Action of crystal violet on PPLO and Bacteria İn liquid and solid media)
I
Sıvı besi yerinde crystal violet konsantrasyonu.i
Katı besi yerinde crytal (Concentarıion of crysta! violet ın liquid rnedia) (Concentration of crytalvinlet konsantrasyonu violet ın solid madia)
suş
(Strain) o o o o o o o o o o N o o o o o o o o o o o o o o N o o o~
o o o o o o o o~
N o o o o~
o o o o o Cetvel. o o o o o N: O suş için maximum üreme. : Bol ürerne. +-'-++ .:.. 1,++ -;--'--'-+ +-"++ ++~--I--!-.; 1.+ + + +'+ f -1-++ ++-1-+ T+' i ++++ i .!--i. + ++ +++.+ ++ ..• ++ + i +.1-++++ +-1.++ ++-1-+ -1-+++ ++++ -!-+ ++
++
++
.f-++ .t -i f. .1 1-+ ++ .1.+ ++ ++ ++ ++ +.1 ++ ++ i ++ ı. 1-++ ++ ~+ ++ -'-+ +-'-...;.. -T- +--++-1 ... ---++-+ .. i + -'---+ i -1--++ +.1 .. '.-'-c_ -'-+c_ --- -I. -1--- ++-r-++++ , \.++ ++++ .!-+++ +-1 -f-.i-+++-1 +i I.-/-+++,. i i -i-+ ++ j 1-++I
-I::+
++++ ++++ ++...ı -I ++~+ -I ' -,-++.,. -i -i- !--:-.+..ı.., ++-i-+ +-+--! '" ı+"--+ - ,,_I:~:~:
-'-:~-'-
:~-~--~
-'-++-'- +-'-++-++-'-+ -++-'-+ :Sayılacak kadar üreme.
+ :İyi sayılacak kadar ürerne. - : Oreme yok. -1-"- +.,. +" .1 .1- ,- + + +"- -I . .,. 1-++.1 "-+-,-+ .1..+++ ..J.."1--1 J. ++++ +-i .1 -i-++++ '1-+ + ++,.-1 -1-+++ +-I. i i ++++ .j.1 1.1-++++ -I j. I--/-1-++-! "- -/-++ "T-++-1 ~.+++ ..J_+-! ! -,-+-'-+ -:--1 !-'r -'-+-'--/--'-+-'-+ -'- -I ..o- 1-~- T+ + ~-++ T ++.1-'. i ,.++ + +-I. 1--r+ + +++-;-+++.! ++++ +-I.j !. ++++ -i -f .1. +-1-++ + , ;-++ ++++ +++...1-++, +-;-++ -t ,.. i ı- 1;-+-'--1-" -I.L 1- -'-+-'-+..J_+"';" +-'-+C + ",_ ..J.._, -: __-i . ..;.. ..J.. + + : + 1-++++ ,.1- ++ ++++ j-+ + i .•1- :---+-, " ~ -ı-~:....J,.. ..;..+-. ++-: t. ++++ +,.1 i ++++ ....•.. -1 i 1-++++ ..J -I.1. fo-,..+,+ +-1"1-+ -1-,++ ++++ ,-I.:...ı..
+, ..
-i-++++ -i-o! ++ .1.+ ., -'-, i 1- 1-+-+ ~ ..1. i , "+ -- + +,-+.1. r-,- +++-'-+_\ !. ..J.. .:.. +-+-1 ++++ +-+.1 !-++++ -I -•. 1.+ ++++ ++-1-+ + + +, ++++ ++ ++++ "';', +-I ++ ++ -, 1--/-+ .1 i -!-+ "i" I. ++ ++++ ++ .... '1-+++ +"- ". -'-+ -'-+ +--++++ ..,.+++ ++ -ı.ı ! i -1-+++ -1."1 -I .1 -I ı"...L+ ,. -:- -!.-;' i .-1-+ +"';_..J.+ i '-++ + "-++ .11-T-'-++ -c+ +-,--:--f -I +-,--'-+ ++-"+ +--++ , -1.1.1 ..J_+-I ~-+.'--1-+ ++++ .L i- ~+ ++++ ++++ ,+++ +T++ -+ +-f ~. +++-1 +++. 23-H 7-( 36-Ç p-K 29-Ko 40-T 8o-A SG 2o-E B-Pt L-P2 ~-P3..,
'42 4' 42 43 65 66 M. agalactiae Streptncoccus equi Staphylococcus aureus B. anthracis Listeria i E. coli S. gallinarum Paratyphi A Proteussuş
(Strain)
Thallium acetate'in 1'1'LO suşları ve bakteriler (Action of thallium on 1'1'LO and Bacteria in Sıvı besi yeriyerinde thallium acetate in konsantrasyonu. (Concentration of thallium acetate in liquid media)
üzerine bakteriostatik tesiri liquid and solid media)
I
Katı besi yerinde Thallium acetate'in konsantrasyonu. (Concentratıon of thallium acetate in solid media)Cetvel. o o o
"8
i
o8
o o o o o o o o ı: o o o o o o o o o o o o C oo o;; o oo oo oo C~
o oo~
o oo oo oo o~
N~
-
N C~
-
N~
..-
..-
-
-
.. ..-
..-
~
..-
-
..-
..-
..-
•..
23-H ..- ---+ + +-'-..-+ + +-'-+ --/- --/- ..---/- --/-..- + --.,.
c-..-+..- .,.
O, ... --+--i-.,.
+--i-_L ---..+ + +--/- + + +c- .;-+++7-1
.,-
+..- --- --+-....- ..-+_o-,-
-i- -ı-..----,- -, -+- --o...- ! -'--- -- --/--'--- -- --+ +--i- ---'---i--+- + + + +29-Ko 0_
+ -'-..- --/-..-+..- --i---+c- -1- -I T
.,
...--,- ..----1--- -+- ;. -- -I- "--+--1-+ ..--I. -1--!-+ + + -'- -'- -i-+--i-+GS +c- c- -.--+- -- ---+-..- -+- -. ..--,- "--..o_-+- .. o. -.-_L -+---/- -- -+- --..- --i--- -- -1-+ + + B-1'I ---I .--+- ..--+-
,
! _L 0_..- -I. I -+- -1--+ K-P3 +-- +..- +-- -+--- .,- ---+ --/- -ı- -ı- --/- --/- ++ 7 ..-i--I i .. ,-1- + ---+- -- 1- .~! .1 -- ., .;--- -- _L.
.L -I--+-~
-, , + + ++ 142 -. ----i + -j----1- + -'- -ı- -+--'- + --+ -+- -+- -- ..1. -. -+- -!- -- -- -+- ..--'-..-o_ -.T -1- + +++ 66 I i , ! i ..- + c--'- + ---1---- .. ---...j. , -1- +o. __o -I c---i--+- ++++ M.agalaetiae -1- + ...'1-_o- ...-'-..-o- -- +..- +..- --- ,. -+- ---+- ..--- + -+- -+- -+- .- .1--+- ---'- + + ++++Streptücoccus e'lui j i -+-c- -1--1- -- ,- o,. -ı-+ + + ++ -i-++
Staphylococcus aureus . 0--+- -l- o• -ı--!- -'- -+- --- -+- ..- -ı-..-..- ---;-0_-- 'L + -1- -i-++ +++
B. anthracis -+- ..-I. -I .. .. -" -i --
-.
...-I. .;-.1. ++ -+-Listeria i ..--ı- -+- -ı- -'- -ı-0_ -1- ..L__o -,---- -- L ! ! + + ++ ++. E.coli ----ı-++ -ı----ı- -+----+- ..--1- ! ! .1., ..-+ + + + + ++ + -1'++ S. gallinarum i +.j- .1..+ -+---+ -ı-c--+--1- + +---ı- -+ +;- -1-., -+- ---1- --i-__o + -1- !-+ ...,
! ...-+-++ +-+-;--+-Paratyphi A ----+- -+- ... -1-;--ı- -I- +o- -+---i- --i- --i- --+--i-__o
--i-+-- +-,- -ı- c---i--+-..- ..- -+- + --i- --i- --i- --i--- -+-+++ +--i- --i-
c-Proteus .0-o,..1-.1- -+- o- -i- .1.1 -i- '1-.1 + I. -i- -i- -i- -i--'- i-o. i 1- .f L -I .. c- I. ...;--1- ..-I -!-+--i--ı- + + + '-+--i- ~--ı- O suş için maximum üreme
.1---i--i- : Bol üreme
-1--+- Sayılacak kadar üreme
-'- İyi sayılacak kadar üremc : Üreme yok
Basic fucsin in PPLO suşları ve bakteriler üzerine Bakteriostatik tesiri
(Action of basic fuchsin on PPLO strains and Bactcria in liquid and solid 'mcdia)
Sıvı besi yerinde Basic fucsin konsantrasyonu.
i
Katı besi .yerinde basic fuchsin konsantrasyonu Concentration of basic fuchsin in liquid mcdia) Conccntration of basic fucsin in solid media)Cetvel.
suş
ö1
o o o o o o o o8
ö o o o o o (Strain)c:
•..
oo oo oo oo oo o•..
c:
oo oo oo oo oo oo o 8~
o o o~
o~
o 8 o o~
'"~
'" o~
..•
~
'" ::.::~
..~
..
~
~
..~
~
::.:: ..~
..
~
~
..~
.~
.~
23-H 7-1 36-Ç 29-Ko 4o-T 8o-A 86 2o-E B-PI L-P2 K-P, 7 142 41 43 65 66 M. agalactiae p-K Streptococcus equi Staphylococcus aurcus B. anthracis Listeria i E. coli S. gallinarum Paratyphi A Proteus ++++ ". ++ .! -i-+ ..-- ..--+ +..--..-- +--+-.-.j -:-j., . -i- -:- -1-," i. + ++++ ++++ +-1 -i + ++++ -+.~ -~i -- +-+- -.---++ 'i. ++++ ++++ ++++ ~+;-+ .I.j ++ ++ ..•.. .,- -i- -! .--!--ı- -- .! .1. -'-_. -1--i- -,. 0--+ _..l_ -i-+ I.t + -1--+-+ + ;.1 i ++++ +-1- +-+ +-+- -+--t .1.-+- +-+-+ -+--+- -t-+ + -1-+++ ++++ ++++ ;- +-! -!--;- +-+-_ o. .1-+ ~-++ ...., + -' _.-+ + -i- "--Lo -1--+-I' -:-...:...++ + +-j- -i-. 1+ -:-1 -; +.ı-+ + i i j .1--+- -+-+ + + "-++++ -1-+ ++++ -'-+++ +.+++ .f-.!- -1-';-+-1.' ! -_.f- ~ -- +.,--1-.j. + + -i--+-~- -+- -+- -j-++++ +i i j. ++++ ++ -i-1+ + .•.++ .1.+ ++++ .,. -1-+-1--1-+++ ++++ .t- f- T --• : --•..J ....1.-;-~. ! j. -'- 1- ,. -t-+ +++T .t ; -~.1 ++-1-+ .~ -i- i .f + -1-"++ ;--1-1-1-++-t .t. ++-1-+ .1 -! 1-"':'" i, -.- ++-1--1-+-'--'-+ +-1--1- +-1-+1-..,J..+.J_+ -1--1-++ ++++ ! -f -+ .1. ++-1-+ +-1-++ •. 1.. --1 +C_ +_L .,+-'- + .,.+ 1--+-;-+ -;--1-+~. +"-~. -i- .1. 1-1+++ ++.++ ++++ ++++ ++++ +11.j ++++ ++++ +-1-1+ ++++ +.' ..1., +++ +.1-1.+ ++-1-+ -j +++ ++...ı...+ +++'-1 -'--i- o--'-+-'-+ "'.1. : +;-+. -r+ _..1. -i- +-+---.1.•. -:--1--!--!. i-+.,. ++++ +++-1. ++ i. I. +-!.i -i-++++ ++.1.1-++c_ 1 ++.,.+ +-1- i-j ++++ + !-++ ++++ ++-+ +'f.+.J. ++++ 1+-' + ,- ~. -:- -.r-.. + .•.-;. "+ -. -" -c ~ __j ._ ;- +-- _1_,--1---f.+-+- +--I- i,i i -t-+++ .1.1 -1-+ ++++ ++++ ++1.1 ++++ .f !-.I i. +++.,. +++-'-++.1-.; ++++ ..i-++ .-.++++ -'-+++ ++ +...ı... .;. O:'+ __ -;- -- -1- ;.-j-++ -I '+ ++ .1 f 1+ +++ ++ +.+ + +++ + ++++ +++-1. ++++ -1-+++ -j-+ .- 1 i. ----;. -t 0-- -i-i C_+ -'-+ ';"'-I'! -+ ++++ .~. -t +-+ + -.++ .,.1- ++ -~ -+-+ ++-1-.1 -'-+++ + ++++ +++-'-+-i -I-ı ++++ • j- ~. .;-'1 + ....1 - +...:-+ , !., L . _ • ..J + 0--+_ + -- .1--+- .1"':'. ++++ ++++ + +-I + ++++ f.j t i -1-++-1-1++ + + +-, .1--+ .!--i-+-i-+-i-++ ++++ ++.-1.1 -.,- 1.+c. f i -+ .,. +-1--" -+ ..••, -•. 1 +.J.. j. t 1 ....• - +-'-+ +-'-+ ,,--,-+ .• ".+++ .1 j +.1 +-+-+ i t- i I. ++++ ++++ -,.+ i i c_+ + + !+ +1 +-!-++ +-'-++ +-1--1-+ ++++ ++++ 1+1-+ ++ c._, -~---++ .1-j ....,. "+ -'-0-' _+
c_ + ---1-+ ---ro .1. ++;--;. -+- +.1-+-i- +-;-++++ !.i i I. +++-1-++-1 + +-+-++ +..J. L .1.' -'-+ ++ -H-++ -i-+ +++.,. +.1.++ ++++ ++++ .1.1 +-1-++++ ++++ ++++ ++++ ++++ -'-+ -1.1.'1 ++ ++++ ++++ ++'f i. ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ -'-++ +++ ++++ ++ -'-+++ -'-+++ \\
,
++++ +.++o
suş için maximum üreme Bol üreme.++
+
Sayılacak kadar üreme İyi sayılacak kadar üreme Oreme yok
M. Beşe - S. Can - E. Fine;
Katı besiyerinde fuchsin'in l:jOOO konsantrasyonu, bazı PPLO suşları' üzerine toksik tesir göstermiş, I: j 000 den yukarı konsantrasyonlarda PPLO suşlarının üremesi inhibe edilmemiştir. 3 gram-negatif bakterihariç, S. gal-!inarum üzerine fuchsin, cetvel (3) de görüldüğü gibi toksik tesir göstermiş-tir. 4 gram-pozetif bakterinin üremesi bazı konsa.ntrasyonlarda inhibe edil-miş ve bu bakteriler üzerine toksik olduğu görülmüştür.
Sıvı besiyerinde thionin'in hiçbir konsantrasyonu, cetvel- (4) de görül-düğü gibi, PPLO suşlarının üremesini inhibe etmemiştir. Hem gram-poze-tif ve hem de gram-negagram-poze-tif kontrol suşlarının bazıları üzerine thionin'in
1:-j 000 hatta i: i0000 konsantrasyonunun az toksik olduğu tesbit edilmiştir.
Katı besiyerinde thionin'in yalnız i:JOOO konsantrasyonu bazı PPLO
suşları üzerine toksik tesir göstermiştir. Bu arada thionin, cetvel (4) de gö-rüldüğü gibi, 1:10000: 1:2jOOO,I:jOOOO konsantrasyonlarda' M. agalaxiae , üzerine önemli derecede toksik tesir yapmıştır. Hatta i:
JOOOkonsantrasyon--da üremesi inhibe edilmiştir. Katı besiyerinde thionin, Kontrol suşları üze-rine sıvı besi yerinde olduğu gibi, fakat daha kuvvetli toksik tesir göstermiş-tir. Hatta 'bazı kontrol suşları l:jOOO, 1:10000 konsantrasyonda ürememiştir. Sıvı besiyerinde potassium tellurite'in her konsantrasyonda PPLO suş-ları, cetvel (j)de görüldüğü gibi üremiştir. Buna mukabil potassium tellu-rite, 4 gram-negatif bakterinin üremesi üzerine toksik tesir göstermiş, E. coli 1':10000, Paratyphi A 1:2jOOO,S. gallinarum 1:100000, Proteus 1:25°0:) konsantrasyonlarda ürememiştir. Potassium tellurite 4 gram pozetif bakte-rinin üremesini inhibe etmemiş, ancak i:j 000 konsantrasyonda B. anthracis
üzerine toksik tesir göstermiştir.
Katı besiyerinde potassium tellurite'in ı:j 000 konsantrasyonund~ bazı PPLO suşları müstcsna büyük bir çoğunluğu üretmiştir (Cetvel 5). Potas-sium tellurite, i: i0000 konsantrasyonda 5 PP LO suşunun üremesini inhibe
etmiştir. Bu madde genelolarak 1:10000 ve 1:25000 konsantrasyonlarda PP-LO suşları için toksik bulunmuştur. Katı besiyerinde potass!um tellurite 4 gram-pozetif bakteri üzerine
!:
5000 konsantrasyonda az derecede toksik tesir yapmış, hatta B. anthracis i:5000 konsantrasyonda ürememiştir. 4 gram-negatif bakterinin üremesi, sıvı besiyerine nazaran daha fazla inhibe edilmiş-tir. 1:25000 konsanrtasyona kadar gram-negatif bakterilerin hiçbirisi ür~-me miştir. Keza potassium tellurite'in toksik tesiri i:100000 ve 1:200000 kon-santrasyonlarda bile müşahede edilmiştir.Sıvı besiyerinde sodium azide'nin i:5000-1 :200000'c kadar bütün
kon-santrasyonlarında cetvel (6) da görüldüğü gibi, bütün PP LO suşları üremiş-tir ve hiçbir toksik tesir müşahede edilmemiştir. çalışmamızda kullanılan 8 kontrol suş her konsantrasyonda üremiş, ancak bazı suşlar i:j 000 konsant-rasyonda az üremiştir. Bu şusların kolonileri, özellikle S. gallinarum kolo-nileri ziyadesile küçük teşekkül etmiştir.
suş
(Strain)
Thionin'in PPLO suşları ve bakteriler üzerine Bakteriostatik tesiri (Action of thionİn on PPLO strains and Bacteria in liquid an solid media)
. i
Sıvı besi yerinde Thionin konsantrasyonui
Katı besi yerinde thionin (Concentration of thionin in liquid media) (Concentration of thioninkonsantrasyonu in solid media) Cetvel. 4 ö o oo oo oo
8
o ooo ö...
o oo oo oo oo o8
o...
o o o o o oc:
o o o o oc:
o o o o o o o~
o o o o~
.....
..
...
..~
o~
-
.. ...~
..
...
~
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-23-H ++-1- -'- ++,-+ ,-++ ++.+,-
-t--i ..t" ++ + "-,.
++-1- ++++ + j.
+,.,-+ ++++ -1-+++,.
i+-c 7-1 ++++ _L I-!- ı- +,.-t 1-++++ + +++ -!.+-+- + ++++ ++++ + -I-i-+ ++++ + ı-++ ++ ++ ++++ 36-Ç ++ +.,- +++ + ++++ +1 , I- + +-i-+ -!-++ +,
+ ++ ++ ++ -' i +++-!- ++++ ++++ ++++ +++ + p-K ..,J..+_-!~ +";"..,J.. 1- ..;..+ +.
- -1-+-i--'-,.
~-...;.'t- -I-, i -r-+ -' -1-"- + + -ı-...;.. -'- +--o +,
i _L ++ -+ -,.++ -'- -I + ..- + 29-Ko-
++...;. -0-++ -: "- -I- _L I-i- .- -:--1. +-' .- -+- + i 1--.- -o--o- I +.o "1--
-i---
-+-- i !- ...-+--
++- ++ o--c4o-T + ,- ,--I- -;-++ ,- +++-, ++i-+ i :--1- '0-+: ,- -t-+-j l- .-.+ -I
-
i + -I-i- ++...; 0_ -j ,-++ + +-1-+ 8.o-A ++++ -I +-1- .j I- I- + ++++ ++.!.,.
i-+ + 1-+ ++ -I--j I- t- + + -I ++-1 .1. ++++ +++ ++ + 1.+ ++-1 -I
SG ++-1--1- + ++ -~ ++++ +.,-+-!- -! ı 1-+ + ++ "-
,.
_,o+ 1- ++ -+_L i -I-++ +++-1-+ -1-+-1-+ i +-i- ++ -! i++
2o-E -j-...ı..+ ;- -' 1- 1-+ -i- ,...;..-t ".+ +-' ___ L_ -I
-.
1--'- -'-+-'-,
--o-!-"- -o--I__ ..L
-I--i +
-
++-
+., -l- ı- -'--'-++B-PI -c +-:-.:-
.-
;-+ -:--1 -1- -.--0-+_i +--
i -. .1-- + -I.o -" i-
+ .1-__ ++ +"-L-P2 -i--!- -1-.-i--!- -'-+-t i -1_+ +
,
-1-- -I 1----
-t- -. i -+-
-i- -!--i- -I- -+- "- +--
-'--
++ -I -1.++K-P3 +-i- -I,-++ -' i-++ +-i-t- -1- ++ -t-'! -'--'-
.-
+ i !--f-+ 1- + ++ -i- + t- + i i -1-+7 +-t +.+ ++++ ++~- 1- +-++.+ -j i i+ I-L+-'-
,.
-ı-.! i ++ ++ I- +,.
+ + + + +++ +-1--1 + + ++ ++++ 142 -1-++-;- -I -1-++ +++...1- -I--i- c+ + +.,-
+ •. + + .-+-'- -' i + L.-
-I + 0_, .. 0_ ++ + 0_ + i,
-/- ++++ 41 +-i 1.-1- -'-+ i +-1-+. ++- ..- i -l- o- ..-+-',
+-:. -- -I--+-- +"
-'- +-'- -fo- -I , ++-
+ -!--'-++ 42 +.0--1- + ++-'- +-i ,-...;. -;--:_...;...ı.. +--
.,-,---
,---1- 1--o"1-+,
--
-+- i-1-++ ++- + ~--r-+-:- + + -;-ı-43 ++-i-+ ++ ++ ,,-+ +-i- + +-i -c -,- i 1-+ ++ i- i -1-+ +
.
.,.+ ++ ++ +-, i i ++,
+++ -, -I-+-!- ++-i- +65 -j -I -1-+ + +++ ++ i , +++ + + + ++ -I j ı- + + -1--1-I + ++ + ++ I-
-:-+ -:-+ ++ + + -' -I -I-j ++++ ++++
66 + +"-+ -t-++ -i-++-i- +-1"-'1- ,,-+ ++ + +-t- 1-- j--'- +-1- i : I- + -I-, o-I f .- + o. -I- I- ++ -'-+ + -1-++ +-1 -I+ M.agalactiae +-, , 1-
-
+ -1- ++-1 ++.,."- -' -I ++ -- -1--'-+,
Li ,- +-'- -"-I +
--
-I- +.,- ".+Streptoeoccus equi + -:-++ + + ! -~++ 1--1- -'
_.
-/-.o- -'- .+.
..-i- t---- -t- -+ +-
+--
+++ ++++Staphylococcus aureus +1 I-!- + 1-.!. + ++-1- +++-'- i i 1-+
-
+++ iTT+ ++"1"-1- -I--
-i-++ ++ .++-i-++ B. anthracis ++++ ++++ + i++ + + -1-+ +++ .t- +-/-++ -j ++ + +-++ ++-1 .1-+++ + +++ i
,-
+ ++ -I-i- + +++ Listeria i + ++ ++ ++ +++ +.t -I ++-t 1-+++ -1- + I- + +-1 + +++ -I I--j. + B. coli -i-I'+-;- +.~ -:-++.!. -'-+++ -'-,.++ ++-'-+ H-+ +-t ..- I-.
+ ++ + + ++ ++ -'-+ + +-F+ ++++ S. gallinarum -'- + +"- +..;..+ .o .. i+7-;"
-f"- ++ -'-+ ++++ ++ -'-+ -1--:- .,.+ -'-+ +++ +++Paratyphi A ++'!--'- -t -1-+ ++ !- +-i--:- + -I--r--r-i" ..j ..•; + "- +++ + ++++
-'- + ++ -! 1-+ -t--I ++.~- -1- ++++ ....
Proteus ++++ ++++ ++++ +-! ..f 1- ++++ + ++-1' '!-++ + -I i-I-+ ++ ++ +++ + + ++ -f. -/-++-/- ++ ++ +-t ++
++++- O suş için maximum üremc. ++ Sayılacak kadar üremc.
+++ Bol üremc. + ıyi sayılacak kadar üreme
Potassium tellirute'in PPLO suşları ve Bakteriler üzerine Bakteriostatik tesırı.
(Action of potassium Tellurite on PPLO strains and Bacteria in Liquid and solid media) Sıvı.besi yerinde potassium tellurite konsantrasyonu.
i
Katı besi yerinde potassium tellurite (Concentration of potassium Tellurite in liquid media) (Concentration of potassium telluritekonsantrasyonu. in solid media) Cetvel. 5 ö
8
o o o o ö8
oı
oi
8
o8
8
osuş
..
o8
'0..
8
o o o o C o2
o o oc
8
o o o8
(Strain) o o..,
"
o..,
o o o 8"
o..,
"
"
:::.G~
~
~
~
..
~
~
:::.G~
~
~
~
~
-+-j-+ +
o
suş için maximum üreme-t+ + Bol üreme ++++ ++-1-+ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ +I+-!-++++ .1.+ ++++ ++ 11.+ ++++ ++++ ++++ -t +++ ++++ 1._'-++ +-'-++ +++ +-I'-!--I-++++ +-1-+-'-+++ +++ + +++ ++ ...ı...+ ++ ++++ +ıt++ +i i+ ++.,- i ++++ ++-!--I-1-++-1' +++-+.. -'-++ -I i 1+ ++++ +-1-+ ++++ ++.1 i ++ +++"-i /'.++ ,..:..++ +++ +++.1 ++++ .. 1+ + ++ ++++ -!-+++ + +.1-+-1. ++ i i + ++ ++++ ++++ +++ ++++ t t-++ +.1 i j. ++++ ++++ ++++ ++-,-+ ++++ ++++ ++++ -I- !. ~, -'" +++ i.1.++ + -~.! i. ++ + .1.++ +++ -'-+ +.1. , ++++ ++.1 t--J..,++ +++ +++-'-i +++ -1+++ 1-.1. ++++ .11+ +-1 i ++ -+- .~ ++ +++ + ++C_ i + ++ +-i- _,o ++ +-/-+ I. + ++ i ++ ++-.-t ++.f -1- ı. +~++ +-f + '1-+ + ,.+++ ++++ -~+++ +"- ++ ++++ ++++ ++++
i+ Sayılacak kadar üreme
+ İyi sayılacak kadar üreme üreme yok +;.-+--++++ + f-++ ++ ..- 1+-;--I J. ++++ ++++ +"- .•-+ ++"- + ++++ .11++ ++ ++-1-+ +-1.+.;-+++./ -1-+++ +++~ ++++ -'-+++ ++++ "-+ -~+ ++++ 1.'++ ++-1.1 .1+++ +1- 1.+ -'-++1 ,11,'1-+ ++-+- !--1"1-++ +i. ++-'-+ -i , .1.+++ +.+++ + -'- +"-i ,+ + ++++ ++++ -1-+-1.1 +++-j. +..:...ı...ı... -1-++-1 ++++ ++++ ~-++ ~ +-1 + 1-++ ..1-++-1 ++++ +.! ;,+ +-1-+.1. +-;-+-'-++++ ++++ ++++ +++., .:...+++ ++++ +++-!-++ 'I'j- C_+ ++ ++++ -j--I-++ "';--f i : +-,-++ ++++ .1.+++ ++++ "-++ -'-+.! .1-+ ++++ .\+++ +_1 +.1. ++-'-+ +++ ++ +: +...ı...++ -1-+ ++-f -i. .1-+++ -'-+++ .,.-1+-;-+-1.1.+ ++++ ++++ +++1. ++++ +++-/. ++++ -'-++-'- ++-,- +++-'- .1++-++++ ++++ +1++ ++++ ++++ ++ 1.+ ++++ + -i-+ ++++ +-1-+'1-+++T -1-++I. ++++ +++-i. ++-'-+ ++'++ ++++ -'-+ ++++ +-'-++++ ++++ +., i I. T+++ ++++ ++++ ++++ +;.-++ 1_.-1-+1 ++++ '1-+++ .1- i •.1. .1+ -t 1-++ +-++ -I j.++ +++~ ++++ +.1.1+ -'-+++ -1'1 ++ ++++ +"- I. ++ ++++ .1+++ .I..~++ -'-+++ -f.ı i--1-++++ ++-!-+ +-i--f ++++ ++++ ++-1-+ +~++ ++++ -i-+-'-+ ++++ ++++ ++++ ++++ +++-'-.1- ~+ + ++++ 1.+ "-+.;-+ ++ ++1+ +++.1-++++ +-'-++ "i" t.++ ++++ ++++ +.1. j.+ ++++ -I+++ +1-++++ +-!-++ ++-;+ ++++ +++ I. ++-'-+ ++-1 ++++ ++ i 1-++-'-+ ++++ ".+-,-+ ++++ ++++ ++++ -t-+~-+ .•1.++ ++++ ++ ++++ ++ ++++ +++~ c_+++ ++++ ++++ +-1-++ ++++ ...:-+ ;.+ 23-H 7-1 36,-Ç 32-K 29-Ko 4o-T 8o-A SG 2o-E B-PI L-P2 K-P3 7 142 41 42 43 65 66 M. agalactiae Streptococcus equi Staphylococcus aureus B. anthracis Listeria i E. coli S. gallinarum Paratyphi A Proteus
Sodium azide'nin PPL0 suşları ve bakteriler üzerine Bakteriostatik tesiri. (Action of sodium azide on PPLO and bacteria in Liquid and solid media)
Cetvel. 6
suş
Sıvı besi yerinde sodium azide'nin konsantrasyonu.i
Katı besi yerinde sodium azide'nin konsantrasyonu.(Strain) (Concentration of sodium azide in Liquid media) (Concentration of sodium azide in solid media)
ci g o o o o
i
"8
o o o o o o g o o o o o o o o o o o o•..
o o o o o oc:
o o o o o oc:
o o~
o o o o~
~
o o o o~
N~
N o~
N N ::.:: ....
.. ::.::~
~
~
~
~
~
~
~
~
~
~
~
23-H ++ ++ ++.,..+ ...;.++ + ~+++ ++-'- + L 1- -- i- +-. +- -'-+c_+ i~
..+ i ! 1--'--i ++.;-+ +++~ -1- ! +-/-7-1 -/--+-/- -:--f- -I -/- + -,--" -/--1 -1- -;-+ -i--!- + -'-+--
+ .~.+ : t--/- + +- + +-/--/- ++ ~- -/- -i -. -/--+- -1-+ ++ 36-Ç .1.+-i !--.
I--+--/- +-'--/--/- -/-++ + -/- ! ~. -ı- -+-+ + f- -I !i. ++-+- I- -/--/- + + 1- -r f-++ 1- +! +.,.. ++++ ++++ p-K + .,.-'-+ i -I. +++"- _L i ._-/- -. i "'-T- + c_ +- --+..;..+ -1- .- 1-_.--I +-' .:-+ ++- + 1-+-'- ++ 0_ 29-Ko ++ 1'+ i-r-++ ++ !-+ :++-!. + ++-1- +T+ ++ -,--1- + -I-L+ + +-+ + ++.,.
++++ +++-1- -j-+++4o-T -. + + + +.,.+ .!.~++ +..;...+ + 1-;0_ +-C+-.- +-i -. -i- -i
--
-'-O,-
+ c_ + -'-+--
++ + +-'-++ -'-+.;-+ +--
++ 8o-A +-++ .--! -/--,- ++ c-C- -ı- ".
I- - , ..-.,--, -/--'-+-- +-
+ +-. i~- .1 I.++ 1- ++-'-+--
+- + -i- -;-+ SG +++-1 ++ ++ +++ -/- ++ ++ + ! I. + +++ +.
! + 1-+i ! -' + + -1-++ -1- ++ ++ +-! -I + ++.\ 1- 0_ + ++ 2o-E + ++..;.. + c. I- ~-+ + +-'- ! L ..J ...ı....;... +-1- "- I- -+-- +-'- ;--;- +-- -
_L-. i .- -'-+ c_ -i ++ -+-+++ B-Pı i -r+ .1i +-,- -c + + +-+ c- I- -/- ++ I- -r +-,- i+ L-P2 ++-!-+ +.;- I- -ı- -; ++ + +.1 1.+ +++ + +--!- ++ +.-f.+-1- -'- + +++ -'- i i + +++ + • -1-+ .c+++ K-P3 -.-+ -/--1- -!-+ + +--
-/- + -/--.- -+ i~
+- +~ 7 ++ + ++ ++ + +++ + /.++ .-++ + +++-1- ++-,-/- + ,-++ + ++ -I- i +++ ++++ ++++ ++++ 142 +-!-.;...-+- ! -'-++ -'-+ +.1-- -:.'++"- -+-++0- +.1-,
..- ++ + "- -'- ++ -:- + +-,--
+ .I. ..J.++ ++~--I _.+++ ,-++-1-41 -I- I- + c ++-:-+ +.;-+~- ++--+ ++-, I. ;- -+-++ + , I- i..-+-.~
+ +-
+ .-,
++~. +~- +-/- -'-+-'--1' ++++ 42 + +++ ++-1 -. + + ++ ...
+ -i-:- ++ ++ -i-,
i t. +-/-++ +++-!- ++ c + 1++ + +++ + ++-1- +1 1.+ ++++43 -I- c--ı -1- -'-+ +-;- +.1- .- ++--!- +.1 ..--/- -ı-....:. ++ 0_ j-++ -i-C __I : -. -1--'- -I. -,-+-'- -'+++ + i 1--'- ic- +-+- .+ +++
65 ++++ +-/- i ,- +,++ +1-!.+ 1-;--+--T-
-
I--,--/- -1-++-, +-1 T+ + ++ ++ +-i ++++ 1- ;-.-f- ++++ +- ++1-66 ++-! + -I..+ + ++ 1-+ +-'-++ -+- !- +-'-
-.
++ + +-+-++ -;-+ .1.+ -1-+ +-+-+.,. ++++ +-.-++ ++++ -i-+++M. agalactiae +-+ + --:-+-i- -1+ +-,- J_ -I ... L ++~--! "'7"-~ +..ı.. +
,
1- -j :.-j-+ +-+ ~- ";"-1--
-1--'- -j i -'-1--;-+ +-+-++Streptococcus equi ++ ++ -1-++ ++ 1-+ -,-+++ .1: 1--ı-+ ++ -;
-.
+++ + +++-+- .,..+ +-1 -I-:- +++ f- ++++ ++ i -I. ++++Staphylococcus aureus -.:-+++ ++ ++...:...+ ++ .J.+ +-:-..J L -'-+-'- + +-'- !.-;- .1-/--;- 1- +
,
+--i -I 1--'.+ .'-+ i-i- +++ + ++++ B.anthrasic .,..+ 1.+ ++ -i ,-:-+ .1.-+-++ +TT+ ++.j- 1- -I-~-+-! ++-r+ -1--,-+ ++++ ++++ ++++ ++++Listeria i i -/-++ ++ ++ ++++ +-'-++ -I +++ ++++ +++1- ++ ++-+--1- + ++ + ++++ ++++
E. coli +-'-++ ++i-
..
-!--'--'-+ +-':"-1 + +-'- +++..L .. +.;- 1- -/--. -1-c_-
-i +-'-+c_ -;.++~- -I- -'-+-i ++-,-+ -'-++S. gallinarum ++++ ++ ++ ++ c- 1-+ 1-+++ ++++ +-+-++ + "--I ++ + ++ ++++ ++++
Paratyphi A +1 ++ ++ i -1- +J. +...1_ "':"'+-1 + -+-+ +-!-+-j- + -1-++ + -'-+ -/-'i- i+ i++ 1- + i.:.+ ++++
Protcus ++-'-+ -1-+++ ++ ++ i-++ ++ + 1- +1-+ + +-+- ++
-
+ +-.-+-'- ++-
+++-'- -I,';. -I-i- +-1-++ +++ -l- O suş için maximum ürcme ++ Sayılacak kadar ürcmc+++ Bol ürcme + İyi sayılacak kadar üreme
M. Beşe - S. Can - E. Finci
Katı besiyerinde sodium azide'nin 1:5°00 konsantrasyonu hariç, bütün
konsantrasyonları PPLO suşlarının üremesi için toksik olmadığı görülmüş-tür. Cetvel (6) da görüldüğü gibi, i: 5000 konsantrasyonu ekseri PPLO
suş-larının üremesini azaltmıştır. Sodium azide'nin 1:5000 konsantrasyonu, hem
gram-negatif ve hem de gram-pozetif bakteriler üzerine toksik tesir göster-miş hatta bazı kontrol suşlarının üremesi inhibe edilmiştir. Genel plarak bu toksik tesir i:10000 konsantrasyonda da tesbit edilmiştir.
Tartışma
.pPLO gurubu mikroorganizmaların izolasyonu bakımından araştırma-lar göstermiştir ki; penicillin, bakteriyel kolonilerin ziyadesiyle küçük teşek-kül etmesine ve hatta bakterilerin tamamen J .-formuna geçmesine sebep ol-maktadır (2, 14). ilk defa Edward (4) bazı bakteriostatik med den in PPLO
gurubu mikroorganizmalar üzerine tesirlerini araştırmış, Smith ve arkadaş-ları (14) hem gram-negatif ve hem de gram pozetif bakterilerin üremesini inhibe eden crystal violet konsantrasyonunun, PP LO üremesini inhibe et-mediğini tesbit etmişlerdir.
20 keçi orijinli PP LO suşu ile yaptığımız çalışmalarda; sıvı besiyerinde
crystal violet'in 1:500o, 1:10000 ve hatta 1:2500o konsantrasyonları, bu
mik-roorganizmalara toksik olduğu görülmüştür. Katı besiyerinde ise
1:5000-i:50000 konsantrasyonlarda PPLO suşlarının üremesi inhibe edilmiş,
hat-ta 1: 100000 konsantrasyonda crystal violet'in toksik olduğu görülmüştür.
Edward (4) thallium acetate'in 1:500 konsantrasyonunda 2
pleuropneu-mina-like suşunun inhibe edildiğini, buna mukabil Morton ve Lecce (I 2) bu konsantrasyonda insan orijinli 6 PP1.0 suşunun inhibe edilmediğini tesbit etmişlerdir. Keza Morton ve Lecc~ (12) o.i - i
°
mgr. proteini muhtevibesiye-rinde, thallium acetate mevcudiyetinde pleuropneumonia-like orğanizmlerin ürediğini, buna mukabil bakterilerin inhibe edildiğini müşahede etmişlerdir. Çalışmalarımızda kullanılan 20 PPLO suşu, hem sıvı ve hem de katı
be-siyerinde thallium acetate'ın i: 5000- 1:200000 konsantrasyonlarında
üremiş-tir. lO PPLO suşu ile yaptığımız müteakip deneyde; hem sıvı ve hem de katı
besi yerinde thallium acetate'ın i:i000, i:2000, 1:2 500, i:4°°o, i:5000
kon-santrasyonlarında lO PPLO suşu üremiştir.
Smith, Morton ve Leberman (14) PPLO gurubu mikroorganizmaların üremesini inhibe etmeyen basic fuchsin'in, hem gram-negatif ve hem de gram-pozetif bakteriler üzerine inhibe edici tesir bakımından iyi sonuçlar verdiğini tesbit etmişlerdir.
Çalışmalarınuzda sıvı besiyerinde basic fuchsin'in hiçbir konsantras-yonu, PPLO suşlarının üremesini inhibe etmemiştir. Keza katı besiyerinde
i: 5000 konsantrasyon hariç toksik tesir göstermemiştir.
Keçi Orijinli PPLO'nun Hassasiyeti
Smith, Morton ve Leberman (14) thionin'in PPLO üzerine çok toksik olduğunu, sıvı ve katı besiyerinde 1:10000 ve 1:25000 konsantrasyonda
PP-LO üremesini inhibe ettiğini, hatta i:200000 konsantrasyonunun bazı PPLO
suşları üzerine toksik olduğunu bildirmişlerdir.
Çalışmalarımızda, sıvı besi yerinde thionin'in bütün konsantrasyonların-da 20 PPLO suşu üremiş, katı besi yerinde ise bütün bu suşlar üremesine
rağ-men ancak bazı suşlar ü7.erine i:5000 konsantrasyonu tqksik tesir
göstermiş-tir. Bu arada thionin, M ycoplasma agalactiae ü7.erine yüksek konsantrasyon-larda bile toksik tesir 'göstererek üremesini durdurmuştur.
Edward (4) PPLO gurubu mikroorganizmaların potassium tellurite karşı kafi derecede mukavim olmadığını, Smith, Morton ve Leberman (14) ayni maddeye karşı insan orijinli PPLO'ların daha mukavim olduklarını bil-dirmişlerdir.
Çalışmalarımızda kullanılan PP],0 suşlarının hepsi sıvı besiyerinde po-tassium tellurite'in bütün konsantrasyonlarında üremiştir. Katı besiyerinde ise PPLO suşları üzerine toksik tesir göstermiş, hatta bazı suşlar i:5000-
1:-i 0000 konsantrasyonlarda ürememiştir.
Edward (4) i:5000 konsantrasyonda sodium azide'in, farelerden izole
edilen iki PPLO suşunu inhibe etmediğini, halbuki Smith ve arkadaşları (14)
8 PP LO suşundan 3 PPLO suşunun inhibe edildiğini tesbit etmişlerdir. Smith ve arkadaşları ('4) katı besi yerinde sodium a7.ide'in 1:2500o
konsantrasyo-nunun PpLO üremesini inhibe etmediğini müşahede etmişlerdir.
Çalışmalarımızda kullanılan bütün PPLO suşlarının hepsi sıvı besiyerin-de, sodium azide'in bütün k?nsantrasyonlarında üremiştir. Ancak katıbesi-yerinde bu maddenin i:5000 konsantrasyonu bugurup organizmalara az toksik
tesir göstermiştir.
Deneylerimizin sonucu olarak keçi orijinli PP] ,0 suşlarının bakterio-. statik maddelere hassasiyet yönünden bir fark göstermediklerini, fakat hem gram-pozetif ve hem de gram-negatif bakterilerden bakteriostatik madde-lere mukavemet bakımından farklı ö7.ellikler .'gösterdiklerini tesbit ettik. An-cak keçi orijinli PPLO gurubu mikroorganizmalar ile bakteriler arasındaki bu farkların çok fazla olmadığı niüşahede edilmiştir:
Öze t
Bu çalışmada bazı selektif bakteriostatik maddeye karşı keçi orijinli 20
PPLO suşunun hassasiyeti hem sıvı ve hem de katı besiyerinde araştırıldı. Keza 8 gram-pozetif ve gram-negatif bakteri aynı şartlarda incelendi.
Sıvı ve katı besiyerinde inhibitor maddelerin bakteriostatik tesirlerinin farklı olduğu görüldü. PP LO ve bakteriler üzerinde katı besiyerinde
M. ne~e - S. Cnn - E. Finci
teriostatik maddelerin tesirleri sıvı besiyerine nazaran daha fazla olduğu gö-rülmüştür.
Bu çalışmada incelenen 20 PPLO suşu üzerinde bakteriostatik
madde-lerin tesirmadde-lerinin aynı derecede olduğu müşahede edildi.
Crystal vialet PPLO ve gram-pozetif bakterilere toksiktir. Katı besi-yerinde 1:5000-1:5000o konsantrasyonu PPLO üremesini tamamile inhibe
etmiştir. Sıvı. besiyerinde crystal violet'in i:5000 konsantrasyonu, PPLO
suşlarının üremesini tamamile durdurmuştur. .
Bu çalışmada incelenen maddelerden thallium acetate, potassium tcllu-rite ve basic fuchsin ayni şartlarda PPLO üremesini inhibe etmezken hem gram-pozetif ve hem de gram-negatif bakterileri inhibe etmeleri bakımın-dan en iyi sonuçları vermişlerdir.
Keçi orijinli PP LO suşları, thionin ve sodium azide karşı gram-pozetif bakterilerden daha mukavim oldukları tesbit edilmiştir.
Summary
A Study on Susceptibilities of Pleuropneumonia-Like Organisms of Caprine Origin to Same Selective Bacteriostatic Substances
Susceptibilities of 20 PPLO strains to the some selective bacteriostatie
agents were investigated in both liquid and solid media in this study. Eight representative strains of gram-negative and gram-positive organisms were also tested under the same conditions.
The bacteriostatic effects of inhibitory agents appeared to be different in sensitivity in liquid and solid media. The bacteriostatic effects of the subs-. tances on PPLO and Bacteria were found to be more inhibitory in solid
me-dja than in liquid media.
The effects of bacteriostatic substances on the 20. straıns of PPLO of
caprine origin tested in this study were found to be the same.
Crystal violet proved to be toxic for PPLO and gram-positive organisms. İt completely inhibited the growth of PPLO on the solid media in concent-ratian of i: 5000 to i: 5000o. The ı:5000 concentration of crystal violet was
completely inhibitory to the growth of PPLO strains in the liquid media. Of the substances tested thallium acetate, potassium tellurite and basic fuchsin the best results in inhibiting either the gram-negative or gram-po-sitiye organisms.while not inhibiting the PP LO under the same conditions. The PPLO strains of caprine origin appeared to be slightly resistant to thionin and sodium azide than gram-positive organisms.
Keçi Orijinli PPLO'nun Hass~siyeti
Literatür
i - Beşe, M.: Keçi ciğerağrısı hastalık etkeninin (Mycoplasma mycoides ııar.
capri) izola.ryonu: Biyolojik, Biyoıimik ve Serolojik Özellikleri. Habilta~ıon tezi. capri) izola~ıonu: Biyolojik, B[yoıimik ve Serolocik Özellikleri. Habu/ta.ryon tezi. Ankara Üniversitesi Basımevi. (1963).
2 - Dienes, L.: Isolation of pleuropJleu!7lonia - like or,~anism form patholoc~ical
Specimen~ ıı,ith the aid ofpeııici/line. Proc. Soc. Exp. Bio!. Med. 64, (1947):
165 - 166.
3 - Durusan, R., Atilla, C. ve Doğuer, M.:Keçi/erin salgııı ciğerağrısı. (Pleti-ropneumonia Contagiosa c~prae).
ı.
Etiyolojisi üzerinde çalışmalar. Türk Vet. Hekim. Dem. Derg, 64 - 65, (19jZ): 3-94 - Edward~ D. G.: A Seleetive medilim for pleuropnetlmonia - like organisıllS.
J.
Gen. Microbio!., i, (1947): 238 - 243.5 - Edward, D. G.: An investi,~atioıı of the biologicalproperties of organisnı of the pleuropneumonia grotlp,ıvith stlggestiolt.r. Regarding the identification of strains.
J.
Gen. Microbio!., 4, (1950): 311-329.6 - Edward" D. G.: Organism of thepleuropneıımonia ,group causin,g disease 1it goats. Vet. Rec., 65, (1953): 873-874.
7 - Edward, D. G.: The pleuroplteu!7lonia group of O1;ganisnl: are~pieıv, toget-her with some neıv observations.
J.
Gen. Microbio!., ıo, (1954): 27-64.8 - Heikkila, I. und Özkal, İ.: Zur aetioloj!,ie der amteckenden J_un,~enbrust7 fellentzündung, dcr Ziegen (Pleuropnetlmonia contagio.ra capri). Wiener
Tie-raerzt!. Monatsschrift. 7, 40, (1953): 4°2-413.
9 - KIieneberger - Nobel, K: Pleuropneumonia-like or.ganism.r (PPLO) Mycoplasmataceae. Academic press. London and New York. (I962). lO - Longley, E. O.: Contagious caprine pleuropneumonia. A. Study of the
Di-seases in Nigeria. Colonial Research publications. No. 7. London: H. M. Stationary office, (I 9 5ı).
Ref. Edward, D. G.: The pleuropneu1J1onia group of organisnlS. Areıview together with .rome new observations.
J.
Gen. Microbio!., LO, (1954): 27-64. i i - Morton, H. K, Smith, P. F., and Leberman, P.R.: The ctlltivationof Pleuropneumonie-Iike organisms fro!7l the htlman genitourinary tract ıvith reference totheir po.rsible venereal tran.rmission. Amer.
J.
Syphilis, Gonorrhea and venereal Dis., 35, i (1951): 14-17. Ref. Biol. Abstr., 25, 9, (1951):2513 - 2514.
::If. Beşe - S. Can - E. Finci
12 - Mortan, H. E. and Lecce,
J.
G.: Se/ective actioıı of tha/lium acetate and c,:ysta/ vio/et for p/europneumonia - /ike orga~isms of Human orijin.J.
Bact.,66, (1953): 646-649.
13 - Mortan, H. E., Smith, P. F., and Keller, R.: Preva/ence of p/europ-neumonia .- like. organims and the eva/uation of media and method s for their iso/ation from clinica/ materia/. Amer.
J.
Public Health. 8 (1952): 913-925. Ref. Bial. Absstr., 26, 12, (1952): 3i LO14 - Smith, P. F., Mortan, H. E. and Leberman, P. R.: Susceptibilities of P/europneumonia-/ike organisms to .rome .re/ective bacteriostatic a,gents. Proc. Sac. ExptL. BiaL. Med., 74 (1950): 552-555.
15 - Smith, P. F., and Mortan, H. E.: The separation aııd characterization of the growth factor in serlııJl and ascitic jluid'ıııhich is reqııired
0'
certa;ıı p/eu-ropneUlilOnia-/ike organimlS..
J.
Bact. 6i .(I951): 395-4°5 .Yazı "Dergi Yazı Kuru/ı/'na 25.X1'1964 günü ge/mi/tir.
