Morphological identification of Anopheles larvae, and investigation of physical and ecological characteristics of reproduction areas in Şanlıurfa region
Siverek 30.09.2009 30 Az 8,70 20,3 330 0,16 10,80 Yücelen köyü
6 .1 - Ger ador de 6 8Ge / 6 8Ga
Foi realizada a eluição fracionada do gerador de 68Ge/68Ga adquirido em 2008,
com o m ost ram a FI G.34 e a FI G. 35 . Com um volum e de 7 m L é possível obt er um valor de 94,0% da at ividade t ot al de 68Ga eluída e a part ir dest e valor não se observou
um aum ent o significativo da at ividade por volum e.
0,00 20,00 40,00 60,00 80,00 100,00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 volume (mL) P o rcen tag em d e 68G a ( % )
FI GURA 3 4 - Curva de Eluição do 68Ga provenient e do gerador de 68Ge/68Ga ( %68Ga
eluído por m L) 0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 volume (mL) A ti vi d ad e d e 68G a ( u C i)
FI GURA 3 5 - Curva de Eluição do 68Ga provenient e do gerador de 68Ge/68Ga ( at ividade
As FI Gs. 36 e 37 m ost ram a eficiência dos geradores de 68Ge-68Ga, adquirido
em 2008 e 2011, respect ivam ent e. Todas as eluições foram m anuais, o que pode influenciar no rendim ent o do gerador.
0,00 20,00 40,00 60,00 80,00 100,00 0 10 20 30 40 50 60 70 no. de eluições 68G a ( % )
FI GURA 3 6 - Eficiência de Eluição do gerador de 68Ge/68Ga ent re os m eses de
Out ubro/ 2008 at é Março/ 2011 ( 29 m eses)
0,00 20,00 40,00 60,00 80,00 100,00 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 no. de eluições % 68G a
FI GURA 3 7 - Eficiência de Eluição do gerador de 68Ge/68Ga ent re os m eses de
Abril/ 2011 at é Fevereiro/ 2012 ( 10 m eses)
Em am bos os geradores de 68Ge-68Ga há um decréscim o da eficiência devido ao
t em po de uso, apesar dest es valores est arem de acordo com as especificações do fabricant e.
O gerador de 68Ge-68Ga usado pelo grupo de Decrist oforo et al ( 2007)
( 60,5± 3) % e ( 56,2± 4,0) % após 5 m eses e 10 m eses, respect ivam ent e. O gerador adquirido em 2008 com eçou a ser ut ilizado após aproxim adam ent e 180 dias da data de calibração. O rendim ent o do gerador após 5 m eses a part ir da prim eira eluição foi 63% e após 10 m eses, 59% ( FI G. 38) . O gerador adquirido em 2011 com eçou a ser utilizado 90 dias após a dat a de calibração, o rendim ent o foi superior a 80% . Após 5 m eses em uso o rendim ent o foi 70% e após 10 m eses o rendim ent o foi 63% ( FI G. 39) . Est e valor t am bém est á relacionado com o t em po e a velocidade que o gerador é eluído. Decrist oforo et al ( 2007) utilizaram um sist em a aut om at izado, enquant o as eluições realizadas nest e t rabalho foram m anuais.
0 20 40 60 80 100 6 7 8 9 10 11 13 14 15 18 19 20 24 25 27 33 35 tempo (meses) R en d im en to d o G er ad o r d e 6 8G e- 68G a ( % )
FI GURA 3 8 - Eficiência de eluiçãodo gerador de 68Ge/68Ga ( adquirido em 2008) em
0 20 40 60 80 100 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 tempo (meses) R en d im en to d o G er ad o r 6 8G e- 68G a ( % )
FI GURA 3 9 - Eficiência de eluição do gerador de 68Ge/68Ga ( adquirido em 2011) em
relação ao t em po de uso
No segundo gerador de 68Ge/68Ga ( 2011) , foi realizada um a m aior quant idade
de eluições, pois quant o m ais t em po o gerador perm anece sem eluições m aior a quantidade de im purezas acum uladas. A FI G. 40 m ost ra que a quantidade t ot al de im purezas m et álicas ( Fe, Ge, Ti e Zn) foi decaindo ao longo de cinco eluições consecut ivas. 0 50 100 150 200 1 2 3 4 5 eluições m assa ( u g )
FI GURA 4 0 - Nível de im purezas t ot al ( Fe, Ge, Ti e Zn) do eluat o realizadas durant e
6 .2 – I rr adiação do 6 5Zn
A at ividade específica obt ida na irradiação de 1g de ZnSO4.7H2O foi de 31,6
MBq 65Zn/ gZn ( 854 µCi 65Zn/ gZn) , no fim da irradiação com fluxo de nêut rons
0,9 - 1,0 x1013 n.s- 1.cm- 2 durant e um a hora. Est a at ividade foi suficient e para a
realização dos experim ent os.
6 .3 – Purificaçã o da Água
Os result ados m ost raram que houve um a redução das principais im purezas, Fe e Zn, de 82± 5% e 91± 10% ( n= 3) , respect ivam ent e, após a purificação com a resina Chelex 100®. Os out ros m et ais analisados ( Cu, Ge, Ti e Ni) não est avam em níveis
significant es na água ant es da purificação.
6 .4 – Presença de Espécies M et álicas Consider adas Cont am inant e s do Eluat o de 6 8Ga e Re agent es e Cont role Ra dionuclídico
Foram analisadas as im purezas quím icas ( Fe, Ge, Ti e Zn) e radionuclídica (68Ge) present es no eluat o de 68Ga.
Na t écnica de I CP- OES, cada elem ent o possui um a curva de calibração para a faixa de concent ração que se desej a analisar. A faixa de concent ração escolhida foi de 0,02 – 0,1 µg/ m L ( para os elem ent os Fe, Ge, Ti e Zn) . A FI G. 41 m ost ra um exem plo de curva de calibração do Zn, em que relaciona a int ensidade de acordo com a faixa de concent ração.
y = 3784,6x + 7,7976 R2 = 0,9934 0 100 200 300 400 500 0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 Concentração In te n si d ad e
FI GURA 4 1 – Curva de Calibração do Zn
A TAB. 9 m ost ra a quantidade ( µg) de cada im pureza quím ica present e em 5 m L do eluat o de 68Ga ( HCl 0,1 m olL- 1) , m ensuradas at ravés da t écnica de I CP- OES em
4 eluições aleat órias realizadas durant e 12º m ês após o uso do gerador de 68Ge-68Ga.
TABELA 9 – Massa de I m purezas do eluat o de 68Ga
M assa do m et a l ( µg) Fe Ge Ti Zn Tot al 10 70 5 935 1020 5 85 5 930 1025 10 50 5 875 940 5 75 5 995 1080
Est es valores m ost ram que a m assa t ot al de im purezas foi de aproxim adam ent e 1m g, sendo a m ais abundant e o Zn. Além de ser um produt o de decaim ent o do 68Ga, o
Zn t am bém foi encont rado em abundância no principal reagent e usado nos experim ent os, o HCl. A TAB. 10 m ost ra a quantidade de cada elem ent o present e nos reagent es e na água ut ilizada após passar pelo processo de purificação.
TABELA 1 0 – Concent ração de m et ais considerados im purezas present es nos
reagent es e na água usados no processo de purificação do 68Ga Conce nt r açã o ( µg/ m L)
Reagent e s Fe Ge Ti Zn
HCl 0,1 m olL- 1 0,01 0,14 0,01 6,6
H2O < 0,02 < 0,02 < 0,02 0,3
Acet ona 0,09 < 0,02 < 0,02 75,3* * o valor foi bem acim a da curva de calibração
A quantidade de 68Ge present e no eluat o de 68Ga, do gerador de 68Ge-68Ga
adquirido em 2008, foi da ordem de 10- 2% , após 3 anos em uso, perm anecendo dent ro
dos lim it es perm issíveis pelo fabricant e. O gerador de 68Ge-68Ga adquirido em 2011,
apresent ou o m esm o valor ( 10- 2% ) , porém m ensurado após 1 ano da dat a de
calibração.
6 .5 - Pur ificação do 6 7 / 6 8Ga
6 .5 .1 – Pur ificação do 6 7 / 6 8Ga em re sina cat iônica
6 .5 .1 .2 – Escolha da Coluna Crom at ográfica
A prim eira coluna crom at ográfica ut ilizada foi de acordo com o t rabalho de Zhernosekov et al ( 2007) , ou sej a, ~ 2 m m de diâm et ro e ~ 5 m m de com prim ent o. Verificou- se que est as m edidas equivalem a um a seringa de 1m L padrão e para im pedir a passagem livre da resina foi colocada lã de vidro com o base. O problem a dest a coluna é que a resina não ficava com plet am ent e ret ida nest a base em alguns
experim ent os, int erferindo nos result ados. Foi t rocada por um a coluna de vidro com placa porosa G2. Ent ret ant o, o diâm et ro dest a coluna é m aior que o da seringa, e o rendim ent o da eluição do 68Ga foi inferior à coluna ant erior. Ent ão, um a nova coluna
foi utilizada, um a adapt ação de um a m icropipet a plástica ( Sigm a- Aldrich, EUA) . Com o base, foi usada a lã de vidro, que ret eve os grãos da resina, pois a m icropipet a é m ais afunilada e fina que a seringa. O m at erial plástico é frágil e foi necessário vedar a coluna para im pedir o vazam ent o.
A TAB. 11 m ost ra um a com paração dos t rês t ipos de colunas e a diferença do rendim ent o da eluição do 68Ga, com 1m L da solução de acet ona/ HCl 0,05 m olL- 1
( 98/ 2) % . A prim eira coluna est udada, ou sej a, a seringa padrão ( 1m L) foi usado 500µL de resina cat iônica AG50W- X8 ( 200- 400 m esh) , bem com o na coluna de vidro. Apenas na m icropipet a foi usado um volum e m enor ( 50µL) da m esm a resina.
TABELA 1 1 – Diferença do rendim ent o de purificação do 68Ga em relação ao t ipo de
coluna utilizada
Tipo de coluna Seringa 1 m L Coluna de Vidro M icropipet a
Rendim ent o da Eluição do 68Ga
83,9% 30,6% 89,4% *
* 0,4m L da solução de acetona/ HCl 0,05 m olL- 1 (98/ 2)%
As soluções usadas na purificação do 68Ga perm aneceram durant e 2 m inut os
em cont at o com a resina na coluna crom at ográfica, obt endo, assim , m elhores result ados de rendim ent o de purificação naquelas colunas em que o diâm et ro e o t em po em cont at o com a resina foi m aior, no caso, a m icropipet a e a seringa, em relação a coluna de vidro.
6 .5 .1 .4 – Est udo Com pa rat ivo da At ivação da Resina Cat iônica com ácido/ ba se e ape na s ácido
A TAB. 12 m ost ra os efeit os das diferent es condições de at ivação da resina.
TABELA 1 2 - Com paração ent re o rendim ent o de purificação do 68Ga e redução das
im purezas ent re duas diferent es resinas at ivadas com ácido/ base e apenas com ácido ( n= 3)
Resina M esh At ivação % 6 7 / 6 8Ga
pur ificado
% re dução im pureza s
AG50WX8 200- 400 Ácido/ Base 70± 10 81± 5
AG50WX8 200- 400 Ácido 60± 5 97± 2
AG50WX8 > 400 Ácido/ Base 77± 6 98± 1
AG50WX8 > 400 Ácido 86± 1 92± 10
Não houve um a diferença significat iva ent re os result ados apresent ados para a resina AG50W- X8 ( > 400 m esh) e AG50W- X8 ( 200- 400 m esh) . A at ivação da resina não influenciou os result ados relacionados com a ret enção do 68Ga e em relação à
redução das im purezas.
6 .5 .1 .5 - Est udo Com pa rat ivo de Re sina s Cat iônicas com ercialm ent e disponíve is em re laçã o a AG5 0 W - X8 ( > 4 0 0 m esh)
A TAB. 13 m ost ra os result ados das resinas cat iônicas est udadas em relação à at ividade t ot al de 68Ga eluído ( solução N
2) e à perda de at ividade de 68Ga nas out ras
TABELA 1 3 - Est udo das Resinas Cat iônicas em Relação à porcent agem ( % ) de 68Ga
eluído ( n= 3)
Resina M esh Car ga Solução N1 Soluçã o N2 H Cl4 m olL- 1 + H2O* Resina
AG50W- X2 100- 200 27 ± 2 27 ± 7 43 ± 5 2 ± 1 1 ± 1 AG50W- X4 100- 200 11 ± 4 4 ± 1 66 ± 9 14 ± 5 5 ± 2 AG50W- X4 200- 400 1 ± 0,4 4 ± 1 86 ± 3 8 ± 3 0,7 ± 0,2 AG50W- X8 200- 400 0,8 ± 0,3 1,0 ± 0,2 47 ± 7 42 ± 6 9 ± 3 AG50W- X8 > 400 2 ± 0,4 4 ± 1 91 ± 1 3 ± 1 0,8 ± 0,3 AG50W- X12 100- 200 5 ± 2 1 ± 0,1 14 ± 3 34 ± 3 45 ± 4
* O HCl 4 m olL- 1 para recondicionar a resina e água para lavá-la
A TAB. 12 m ost ra claram ent e que a at ividade de 68Ga recuperada é m aior
quando usada a resina AG50W- X8 ( > 400 m esh) , porém um a out ra resina que apresent ou bons result ados foi a AG50W- X4 ( 200- 400 m esh) .
A resina AG50W- X8 ( 200- 400 m esh) usada nos prim eiros experim ent os não apresent ou result ados prom issores para dar cont inuidade ao seu uso nest e t ipo de experim ent o.
Na TAB. 14 est ão apresent ados os result ados referent es à redução das im purezas quím icas do processo, após o processo de purificação.
TABELA 1 4 - Redução das im purezas cont idas no eluat o de 68Ga após o processo de
purificação de diferent es resinas cat iônicas ( n= 3)
Redução das I m pureza s ( % )
Resina M esh Fe Ti Zn Ge AG50W- X2 100- 200 58 ± 29 80 ± 4 40 ± 11 72 ± 6 AG50W- X4 100- 200 60 ± 25 81 ± 3 65 ± 17 77 ± 7 AG50W- X4 200- 400 86 ± 10 79 ± 2 67 ± 12 82 ± 9 AG50W- X8 200- 400 65 ± 15 82 ± 2 45 ± 11 74 ± 5 AG50W- X8 > 400 64 ± 24 83 ± 3 54 ± 22 88 ± 2 AG50W- X12 100- 200 53 ± 22 64 ± 32 21 ± 28 82 ± 4
As im purezas quím icas que m ais influenciam em processos de m arcação de biom oléculas com o 68Ga são o Fe e o Zn. Os m elhores result ados encont rados foram
obt idos com a purificação do 68Ga com a resina AG50W- X4 ( 200- 400 m esh) , result ados
superiores à resina AG50W- X8 ( > 400m esh) , ou sej a, a quantidade de Fe e Zn foram reduzidas à 86 ± 10% e 67 ± 12% , respect ivam ent e com a resina AG50W- X4 ( 200- 400 m esh) e 63 ± 23% para Fe e 54 ± 21% para Zn com a resina AG50W- X8 ( > 400 m esh) . Out ra vant agem é que est a resina é disponível com ercialm ent e pela em presa Bio- Rad ( EUA) e a coluna crom at ográfica ao ser regenerada com HCl 4 m olL- 1, pode
ser reut ilizada ao m enos por 3 vezes, pois não apresent ou dim inuição gradat iva em relação à recuperação do 68Ga, bem com o a purificação das principais im purezas
TABELA 1 5 - Valores obt idos em relação à recuperação do 68Ga e redução das
im purezas quím icas de cada processo de purificação do 68Ga com a m esm a resina
cat iônica AG50W- X4 ( 200- 400 m esh)
Redução das Pr incipais I m pureza s ( % ) N o. de ex per im e nt os Recuper açã o do 6 8Ga ( % ) Fe Ti Zn Ge 1º 82 98 78 65 78 2º 87 78 78 57 75 3º 87 82 82 81 93 Média 86 ± 3 86 ± 10 79 ± 3 67 ± 12 82 ± 10
Apesar dos result ados de purificação serem prom issores seguindo est a m et odologia, a quantidade de Zn ainda perm aneceu elevada no eluat o final, bem com o a quant idade de Ge ( TAB. 16) . Ent ret ant o, est es experim ent os foram realizados quando o gerador de 68Ge-68Ga com plet ou 1 ano a part ir da dat a de calibração, o que
pode t er influenciado na quant idade de Ge encont rado no eluat o final. O nível de Zn foi alt o t am bém nos reagent es ( it em 6.4) , principalm ent e, no HCl ( 30% , suprapuro; Merck) , usado em t odas as et apas, incluindo na solução N2 usada para eluir o 68Ga. Por
est e m ot ivo, houve um a grande variação nos result ados apresent ados. Além disso, com o est es experim ent os foram realizados m anualm ent e, a velocidade de eluição pode t er influenciado no result ado final de redução das im purezas, bem com o influenciou na adsorção do 68Ga na coluna crom at ográfica.
TABELA 1 6 – Valores de m assa t ot al ( em µg) de im purezas no eluat o final de 68Ga
( 5m L) após a purificação na resina cat iônica AG50W- X4 ( 200- 400 m esh)
Quant idade das I m pureza s ( µg)
N o. de ex pe rim ent os Fe Ti Zn Ge
1º 0,7 0,3 182 4
2º 0,7 0,3 121 5
3º 0,2 0,2 53 2
A quantidade de 68Ge na am ost ra de 68Ga purificado perm aneceu na faixa de
10- 3% em t odos os experim ent os, dent ro do lim it e especificado pelo fabricant e
( 10- 3% ) , com o m ost ra a TAB. 17:
TABELA 1 7 - Quant idade de 68Ge ( % ) no eluat o de 68Ga após a purificação na resina
cat iônica ( n= 3)
Resina M esh Quant idade de 6 8Ge ( % )
AG50W- X2 100- 200 ( 7 ± 2) x 10- 3 AG50W- X4 100- 200 ( 7 ± 0,9) x 10- 3 AG50W- X4 200- 400 ( 4 ± 2) x 10- 3 AG50W- X8 200- 400 ( 5,0 ± 0,3) x 10- 3 AG50W- X8 > 400 ( 3 ± 2) x 10- 3 AG50W- X12 100- 200 ( 4,0 ± 0,2) x 10- 3
6 .5 .1 .5 – Est udo de Purificaçã o do 6 8Ga Usando as M enore s Part ícula s
das Re sina s AG5 0 W - X4 ( 2 0 0 - 4 0 0 m e sh) e AG5 0 W - X8 ( 2 0 0 - 4 0 0 m esh)
Na TAB. 18 est ão descrit os os result ados das m enores part ículas da resinas cat iônicas est udadas em relação as at ividade t ot al de 68Ga eluído ( solução N
2) e a
perda de at ividade de 68Ga nas out ras fases descrit as.
TABELA 1 8 - Est udo das Menores Part ículas das Resinas Cat iônicas em Relação à
At ividade de 68Ga eluído em % , n= 3
Resina Colet a da Car ga Solução N1 Solução N2 H Cl4 m olL- 1 + H2O* Resina
AG50W- X4 0 5 ± 2 91 ± 3 4 ± 1 0,6 ± 0,1
AG50W- X8 0,2 ± 0,3 0,8 ± 0,6 59 ± 7 32 ± 5 8 ± 3
* O HCl 4 m olL- 1 para recondicionar a resina e água para lavá-la
A TAB. 19 m ost ra os result ados em relação à redução das im purezas quím icas e a TAB. 20 m ost ra a quant idade ( em % ) de 68Ge no eluat o de 68Ga. A quantidade de 68Ge perm aneceu a m esm a ( 10- 3% ) no eluat o.
TABELA 1 9 - Redução das im purezas quím icas no eluat o de 68Ga após o processo de
purificação realizado com as m enores part ículas de resinas cat iônicas ( n= 3)
Reduçã o das I m pureza s ( % )
Resina Fe Ti Zn Ge
AG50W- X4 82 ± 6 81 ± 6 83 ± 10 82 ± 15 AG50W- X8 74 ± 20 79 ± 4 77 ± 10 88 ± 7
TABELA 2 0 - Quant idade de 68Ge ( % ) no eluat o de 68Ga ( n= 3) Resina Quant idade de 6 8Ge
AG50W- X4 ( 4 ± 1) x 10- 3
AG50W- X8 ( 3,0 ± 0,6) x 10- 3
Os result ados apresent ados pela coluna crom at ográfica cont endo as m enores part ículas da resina cat iônica AG50W- X4 ( 200- 400 m esh) são superiores em relação à recuperação do 68Ga, porém , em relação à redução das im purezas quím icas os valores
ent re as m enores part ículas das duas resinas se assem elham .
A TABs. 21 e 22 m ost ram a com paração ent re os m ét odos de purificação das m enores part ículas da resinas cat iônicas est udadas em relação aos result ados cit ados no it em 6.5.1.3.
TABELA 2 1 - Com paração ent re o processo de purificação do 68Ga usando som ent e as m enores part ículas da resina cat iônica AG50W- X8 ( 200- 400) e as part ículas de 200-
400 m esh da m esm a resina
Redução das Pr incipais I m pureza s ( % )
Resina Recuper açã o
do 6 8Ga ( % )
Fe Ti Zn Ge
AG50W- X8 ( 200- 400) 47 ± 7 65 ± 15 82 ± 2 45 ± 11 74 ± 5 AG50W- X8 59 ± 7 74 ± 20 79 ± 4 77 ± 10 88 ± 7
TABELA 2 2 - Com paração ent re o processo de purificação do 68Ga usando som ent e as
m enores part ículas da resina cat iônica AG50W- X4 ( 200- 400) e as part ículas de 200- 400 m esh da m esm a resina
Redução das Principais I m pureza s ( % )
Resina Recuperação
do 6 8Ga ( % )
Fe Ti Zn Ge
AG50W- X4 ( 200- 400) 86 ± 3 86 ± 10 79 ± 3 67 ± 12 82 ± 10
AG50W- X4 91 ± 3 82 ± 6 81 ± 6 82 ± 10 82 ± 15
Em relação à redução da im pureza principal quím ica, o Zn, os result ados usando as m enores part ículas da resina cat iônica AG50W- X8 ( 200- 400) foram m elhores. Nos est udos realizados com a resina cat iônica AG50W- X4 ( 200- 400) , a vant agem em se usar as m enores part ículas t am bém est á relacionada à redução do Zn no eluat o de 68Ga. Considerando que o Zn, é a principal im pureza encont rada em t odos
os experim ent os, é preferível usar as m enores part ículas dest a resina, bem com o há um aum ent o da recuperação do 68Ga purificado.
6 .5 .1 .6 - Pur ificação do 6 8Ga em Re sina Ca t iônica na pre sença de 6 5Zn
A TAB. 23 m ost ra os result ados do processo de purificação realizado com a resina AG50W- X4 ( 200- 400 m esh) com 68Ga e 65Zn:
TABELA 2 3 - Com port am ent o do 65Zn na purificação do 68Ga em resina cat iônica AG50W- X4 ( 200- 400 m esh) Et apa % 6 8Ga % 6 5Zn Colet a da Carga 9,5 36,0 Solução N1 1,2 39,2 Solução N2* 52,5 6,5 1m L HCl 4 m olL- 1+ 1m L de H 2O 36,8 18,3 Tot al 100,0 100,0
* Solução N2 é a solução em que o 68Ga é eluído
Os result ados da TAB. 23 m ost ram claram ent e que o 65Zn não ficou ret ido na
coluna crom at ográfica cont endo a resina AG50W- X4 ( 200- 400 m esh) e o rest ant e foi rem ovido com a solução N1, t ot alizando 75,0% do 65Zn rem ovido nas fases
prelim inares à eluição do 68Ga purificado, em que apenas 6,5% de 65Zn é ext raído. O
com port am ent o do 65Zn foi sem elhant e ao experim ent o realizado com a resina
AG50W- X8 ( 200- 400 m esh) com o m ost ra a TAB. 24:
TABELA 2 4 - Com port am ent o do 65Zn na purificação do 68Ga em resina cat iônica
AG50W- X8 ( 200- 400 m esh) Et apa % 6 8Ga % 6 5Zn Colet a da Carga 0,9 16,4 Solução N1 0,7 49,2 Solução N2* 39,4 12,7 1m l HCl 4 m olL- 1+ 1m L de H 2O 59,0 21,7 Tot al 100,0 100,0
6 .5 .2 – Pur ificação do 6 7 / 6 8Ga por Ex t r açã o por Solvent e s
6 .5 .2 .1 - Ex t r ação por Solve nt e s – Líquido- Líquido
No prim eiro experim ent o de ext ração por solvent es em m eio líquido foi usado o
67Ga em HCl 7 m olL- 1. O result ado de recuperação do 67Ga foi ( 72,5± 0,1) % ( n= 3) em
30m L de água deionizada. Apesar de se obt er um bom result ado, o volum e final cont endo 67Ga é considerado grande para a m arcação com biom oléculas. Além disso,
est e processo é longo e não é adequado para o t em po de m eia vida do 68Ga. Ao reduzir
o volum e final t ot al para 4,0m L ut ilizando um vort ex para m elhor agitação da solução, a recuperação do 68Ga foi de ( 97,7± 1,3) % ( n= 3) . Apesar dest e processo apresent ar
bons result ados de rendim ent o de recuperação do 67/ 68Ga, a presença de
cont am inant es aum ent ou em am bos os casos. É um m ét odo com m uit as dificuldades experim ent ais ( volatidade do ét er diisopropílico, dificuldade de verificar a linha da separação das fases) e pouco prát ico para aut om ação e m arcação de biom oléculas, sendo necessário um local adequado para m anipular os reagent es volát eis.
6 .5 .2 .2 - Ex t r ação por Solvent es em Coluna Crom at ogr áfica
A recuperação do 68Ga na ext ração por solvent es em coluna crom at ográfica
( 10m m de diâm et ro) foi de 83% em 3m L de água deionizada. O nível de cont am inant es foi reduzido em 69% no prim eiro procedim ent o. Um dia após, foi realizada out ra purificação com a m esm a coluna, o nível de im purezas foi reduzido para 67% e 59% nove dias após a prim eira purificação, com o m ost ra a FI G. 42. A recuperação do 68Ga t am bém decaiu para 81% e 79% , respect ivam ent e. Est a redução
0 20 40 60 80 100 1 2 9 Dias % im p u rez as
FI GURA 4 2 – Redução das im purezas present es no eluat o com os int ervalos de
eluição
O eluent e foi alt erado para HCl 0,05 m olL- 1. A recuperação do 68Ga foi de 71% ,
porém houve um a redução das im purezas t ot ais de 72% . A presença do HCl no eluat o aum ent a a quant idade de im purezas t ot ais, principalm ent e o Fe e o Zn.
6 .5 .2 .2 .1 - Efeit o da Adição de Age nt e s Redut ore s par a reduzir Fe3 +
par a Fe2 +
O suport e da coluna foi m udado para m icropipet a plástica. Com est a alt eração, o t em po t ot al do processo foi reduzido para cinco m inut os e o volum e final cont endo
68Ga purificado foi reduzido para 1m L em t odos os experim ent os. Apesar de recuperar
apenas 52% do 68Ga, houve um a redução de 82% das im purezas. Out ros
experim ent os foram realizados na m esm a coluna, com o cit ado no parágrafo ant erior e o nível de im pureza foi reduzido para 78% e 70% , respect ivam ent e. Porém , a recuperação do 68Ga foi m aior ( 56% ) em am bos os casos.