Posteriormente, verificamos as categorias biológicas representadas pelos genes expressos em níveis diferentes (β≥) nas orelhas das sublinhagens no período de 24 horas após a lesão.
Observamos genes participantes na transdução de sinal, adesão celular e transporte de elétrons expressos em maior nível em camundongos AIRmaxSS (Figura 12 A, B e C), e genes envolvidos na resposta imune, processos metabólicos e transdução de sinal nos animais AIRminSS (Figura 12 D, E e F).
Diferentes genes, embora envolvidos na mesma categoria de transdução de sinal, apresentaram maior ou menor expressão nos AIRmaxSS em relação aos AIRminSS (Figura 12 A e F). Transporte de elétrons Adesão celular Transdução de sinal A B C
Figura 12: Análise da expressão gênica global. A, B e C- Categorias funcionais de genes com
expressão 2 vezes nos animais AIRmaxSS comparados aos animais AIRminSS. D, E e F-
Categorias funcionais de genes com expressão 2 vezes nos animais AIRminSS
comparados aos animais AIRmaxSS. Nestes experimentos foram avaliados somente
animais submetidos ao protocolo de perfuração tissular durante um período de 24 horas (n=4).
Na figura 13, estão representadas as categorias funcionais contendo genes ativados por conta do estímulo em camundongos AIRmaxSS e AIRminSS em relação aos seus respectivos controles.
Nos animais AIRmaxSS categorias envolvendo genes de queratinização, resposta imune, quimiotaxia e resposta inflamatória foram conferidas (Figura 13 A,
B, C e D). Os genes moduladores participantes do fenótipo cicatricial observado nos
animais AIRminSS foram classificados em temas como: desenvolvimento epidermal, diferenciação de queratinócitos, resposta inflamatória, processo catabólico de colágeno, transdução de sinal e quimiotaxia (Figura 13 E, F, G, H, I e J).
Resposta imune Processos metabólicos
Transdução de sinal
D E
C D
E F
Queratinização Resposta imune
Quimiotaxia Resposta inflamatória
Desenvolvimento epidermal Diferenciação de queratinócitos
Figura 13: Análise de expressão gênica global. A, B, C e D-Genes ativados em categorias funcionais
sobrerrepresentadas nos animais AIRmaxSS 24 horas após perfuração das orelhas em
comparação aos animais controles (2X). E, F, G, H, I e J-Genes ativados em categorias
funcionais sobrerrepresentadas nos animais AIRminSS 24 horas após perfuração das
orelhas em comparação aos animais controles ( 2 X). Nestes experimentos foram utilizados 4 animais de cada sublinhagem.
Os temas biológicos envolvendo genes reprimidos nos animais AIRmaxSS foram: regulação da contração muscular, contração do músculo estriado, organização do sarcômero e processos metabólicos do carboidrato (Figura 14 A, B,
C e D). Nos animais AIRminSS observamos algumas categorias biológicas tais como transporte de elétrons, processos biológicos, organização do citoesqueleto e biogênese, e processos metabólicos (Figura 14 E, F, G e H).
Resposta inflamatória Processo catabólico decolágeno
G H
Figura 14: Análise de expressão gênica global. A, B, C e D-Genes reprimidos em categorias
funcionais sobrerrepresentadas nos animais AIRmaxSS 24 horas após perfuração das
orelhas em comparação aos animais controles (2X). E, F, G e H-Genes reprimidos em
categorias funcionais sobrerrepresentadas nos animais AIRminSS 24 horas após
perfuração das orelhas em comparação aos animais controles (2X). Nestes experimentos foram utilizados 4 animais de cada sublinhagem.
Processos
D
Regulação da contração Contração do músculo estriado
Processos metabólicos docarboidrato
Organização do sarcômero Processos C E F G H A B
Organização do citoesqueleto e biogênese
4.1.3 Categorias biológicas verificadas 10 dias após a perfuração da orelha
Aos dez dias de lesão, identificamos em quais funções biológicas os genes diferencialmente expressos entre as duas sublinhagens estavam agrupados. As categorias observadas com maior expressão de genes nos animais AIRmaxSS foram: fosforilação de proteína, transdução de sinal, processos metabólicos e adesão celular (Figura 15 A, B, C e D).
Processos metabólicos, transdução de sinal, via de sinalização de neuropeptídios e organização do citoesqueleto e biogênese foram as categorias observadas com expressão gênica mais elevada nos animais AIRminSS (Figura 15
Fosforilação de proteína Transdução de sinal
Processos metabólicos Adesão celular
Processos metabólicos Transdução de sinal
Via de sinalização de neuropeptídios Organização do citoesqueleto biogênese
A B
C D
E F
G H
Figura 15: Análise de expressão gênica global. A, B, C e D- Categorias funcionais de genes com
expressão 2 vezes nos animais AIRmaxSS comparados aos animais AIRminSS. E, F, G
e H- Categorias funcionais de genes com expressão 2 vezes nos animais AIRminSS
comparados aos animais AIRmaxSS. Nestes experimentos foram avaliados somente
animais submetidos ao protocolo de perfuração tissular durante um período de 10 dias (n=4).
Na lista de genes ativados pela lesão no grupo de animais AIRmaxSS, identificamos as categorias biológicas relacionadas à adesão celular, queratinização, transporte de fosfato, organização do citoesqueleto e biogênese, proteólise, regulação do ciclo celular, adesão a matriz extracelular e desenvolvimento de vasos sanguíneos (Figura 16 A, B, C, D, E, F, G e H). Nos animais AIRminSS, as
Adesão celular Queratinização
Transporte de fosfato Organização do citoesqueleto e biogênese
Proteólise Regulação do ciclo celular
Adesão a matriz extracelular Desenvolvimento de vasos sanguíneos
A B
D
E F
G H
C
categorias funcionais envolvidas no processo de reparação tissular aos 10 dias foram: adesão celular, transporte de fosfato, contração muscular, organização do citoesqueleto e biogênese, regulação da contração muscular e proteólise (Figura 16
Transporte de fosfato
Contração muscular Organização do citoesqueleto e biogênese
Regulação da contração muscular Proteólise
I
K
J
L
M N
Figura 16: Análise de expressão gênica global. A, B, C, D, E, F, G e H-Genes ativados em categorias
funcionais sobrerrepresentadas nos animais AIRmaxSS 10 dias após perfuração das
orelhas em comparação aos animais controles (2X). I, J, K, L, M e N-Genes ativados em
categorias funcionais sobrerrepresentadas nos animais AIRminSS 10 dias após perfuração
das orelhas em comparação aos animais controles (2 X). Nestes experimentos foram utilizados 4 animais de cada sublinhagem.
A figura 17 ilustra as categorias funcionais contendo genes reprimidos em animais AIRmaxSS e AIRminSS após 10 dias de perfuração das orelhas.
Verificamos genes nas categorias de processos metabólicos do radical superóxido, processos metabólicos, processos metabólicos do leucotrieno, transcrição e modificação da cromatina nos animais AIRmaxSS (Figura 17 A, B, C, D
e E) e observamos as categorias relacionadas a resposta imune, processos
metabólicos, quimiotaxia, proliferação celular e diferenciação de queratinócitos nos animais AIRminSS (Figura 17 F, G, H, I e J)
Processos metabólicos do leucotrieno Transcrição
Modificação da cromatina
C D
Resposta imune Processos metabólicos
Quimiotaxia Proliferação celular
Diferenciação de queratinócitos
F
H I
J
G
Figura 17: Análise de expressão gênica global. A, B, C, D e E-Genes reprimidos em categorias
funcionais sobrerrepresentadas nos animais AIRmaxSS 10 dias após perfuração das
orelhas em comparação aos animais controles (2X). F, G, H, I e J-Genes reprimidos em
categorias funcionais sobrerrepresentadas nos animais AIRminSS 10 dias após perfuração
das orelhas em comparação aos animais controles (2X). Nestes experimentos foram utilizados 4 animais de cada sublinhagem.