4. BULGULAR VE TARTIŞMA
4.3 Supernatantların Salmonella typhimurium’a Karşı Etkileri
4.3.2 Diğer LAB suşlarından elde edilen supernatantların Salmonella
typhimurium’a karşı etkisine ait bulgular
Çalışmada, Lb. brevis türüne ait suşların dışında 2 adet Lb. pentosus, 4 adet Lb.
paracasei subsp. paracasei, 13 adet Lb. plantarum 1 ve 1 adet Lactococcus lactis
subsp. lactis izolatı kullanılmıştır. Bu izolatlara ait NNS, NS ve NKS’lerin
39
Şekil 4.3.1.1 : Lactobacillus brevis 1, 2, 3 suşlarından elde edilen nötralize edilmemiş supernatantların (NNS) Salmonella typhimurium üzerine etkileri
*23.1: Lb. brevis 2 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5 0 6 24 48 Lb. brevis 1 Lb. brevis 3
40
Şekil 4.3.1.2 : Lactobacillus brevis 1, 2, 3 suşlarından elde edilen nötralize edilmiş supernatantların (NS) Salmonella typhimurium üzerine etkileri
*23.1: Lb. brevis 2 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5 0 6 24 48 Lb. brevis 1 Lb. brevis 3
41
Şekil 4.3.1.3 : Lactobacillus brevis 1, 2, 3 suşlarından elde edilen nötrleştirilmiş, katalaz eklenmiş supernatantların (NKS) Salmonella typhimurium üzerine
etkileri *23.1: Lb. brevis 2 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5 0 6 24 48 Lb. brevis 1 Lb. brevis 3
42
Diğer laktik asit bakteri suşları olarak adlandırılan gruptan elde edilen nötralize edilmemiş supernatantların Salmonella typhimurium’a karşı antibakteriyel etkileri Şekil 4.3.2.1’de verilmiştir.
Lactobacillus pentosus suşlarından elde edilen NNS’lere ait absorbans değerlerinin,
48 saatlik inkübasyonun sonundaki ELISA okumalarında, kontrol grubu değerlerinin altında olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.1). Bu sonuçlar, Lb. pentosus suşlarına ait metabolitlerin (organik asitler, hidrojen peroksit, karbondioksit, bakteriyosin…vb.),
Salmonella typhimurium inhibisyonunda etkili olduğunu göstermektedir.
Lactobacillus plantarum 1 suşlarından elde edilen NNS’lere ait absorbans
değerlerinin, 48 saatlik inkübasyonun kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça altında olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.1). Bu durum Lb. plantarum 1 suşlarına ait metabolitlerin (organik asitler, hidrojen peroksit, karbondioksit, bakteriyosin…vb.),
Salmonella typhimurium inhibisyonunda etkili olduğunu göstermektedir.
Lactobacillus paracasei subsp. paracasei suşlarına ait NNS’lere ait absorbans
değerlerinin, 48 saatlik inkübasyonun sonunda yapılan ELISA kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça altında olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.1). Bu bulgular, Lb. paracasei subsp. paracasei suşlarına ait metabolitlerin (organik asitler, hidrojen peroksit, karbondioksit, bakteriyosin…vb.), Salmonella typhimurium inhibisyonunda etkili olduğunu göstermektedir.
Lactococcus lactis subsp. lactis suşuna ait NNS’e ait absorbans değerlerinin, 48
saatlik inkübasyonun sonunda yapılan ELISA okumalarında, kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça altında olduğu görülmüştür. Bu sonuç, Lc. lactis subsp. lactis suşuna ait metabolitlerin (organik asitler, hidrojen peroksit, karbondioksit, bakteriyosin vb.), Salmonella typhimurium inhibisyonunda etkili olduğunu göstermektedir.
Lactobacillus pentosus, Lactobacillus plantarum 1, Lactobacillus paracasei subsp. Paracasei ve Lactococcus lactis subsp. lactis suşlarından elde edilen nötralize
supernatantların (NS) Salmonella typhimurium’a karşı antibakteriyel etkisi Şekil 4.3.2.2’de verilmiştir.
43
Şekil 4.3.2.1: Diğer izolatlardan elde edilen nötralize edilmemiş supernatantların (NNS) Salmonella typhimurium üzerine etkileri
*27.3: Lc. lactis subsp. lactis
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5 0 6 24 48 Lb.
44
Lactobacillus pentosus türüne ait iki izolta ait absorbans değerlerinin, 48 saatlik
inkübasyonun sonunda yapılan ELISA okumalarında kontrol grubunun oldukça üzerinde olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.2). Bu bulgular, Lb. pentosus suşlarına ait nötr metabolitlerin (hidrojen peroksit, karbondioksit, bakteriyosin…vb.), Salmonella
typhimurium inhibisyonunda etkili olmadığını göstermiştir.
Lactobacillus plantarum 1 suşlarından elde edilen NS’lere ait absorbans değerlerinin,
48 saatlik inkübasyonun sonunda yapılan ELISA okumalarında kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça üzerinde olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.2). Sadece 2 adet suşa (41d ve 42.1) ait NS absorbans değerleri kontrol grubu absorbans değerlerine oldukça yakın fakat kontrolün üzerinde çıkmıştır. Bu bulgular, Lb.
plantarum 1 suşlarına ait nötr metabolitlerin (hidrojen peroksit, karbondioksit,
bakteriyosin…vb.), Salmonella typhimurium inhibisyonunda etkili olmadığını göstermiştir.
Lactobacillus paracasei subsp. paracasei suşlarından elde edilen NS’lere ait
absorbans değerlerinin, 48 saatlik inkübasyonun sonunda yapılan ELISA okumalarında kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça üzerinde olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.2). 4 adet Lb. paracasei subsp. paracasei suşundan sadece birine (44a) ait NS absorbans değerleri kontrol grubu absorbans değerlerine yakın fakat kontrol grubunun üzerinde çıkmıştır. Sonuçlar, Lb. paracasei subsp. paracasei suşlarına ait nötr metabolitlerin (hidrojen peroksit, karbondioksit, bakteriyosin…vb.),
Salmonella typhimurium inhibisyonunda etkili olmadığını göstermiştir.
Lactococcus lactis subsp. lactis suşundan elde edilen NS’in absorbans değerlerinin
48 saatlik inkübasyonun sonunda yapılan ELISA okumalarında kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça üzerinde tespit edilmiştir. Bu durum, Lc. lactis subsp.
lactis 1 suşuna ait nötr metabolitlerin (hidrojen peroksit, karbondioksit, bakteriyosin
vb.), Salmonella typhimurium inhibisyonunda etkili olmadığını göstermiştir.
Lactobacillus pentosus, Lactobacillus plantarum 1, Lactobacillus paracasei subsp. Paracasei ve Lactococcus lactis subsp. lactis suşlarından elde edilen nötralize,
katalaz eklenmiş supernatantların (NKS) Salmonella typhimurium’a karşı antibakteriyel etkisi Şekil 4.3.2.3’de verilmiştir
45
Lactobacillus pentosus izolatlarından elde edilen NKS’lere ait absorbans değerlerinin
48 saatlik inkübasyonun sonunda yapılan ELISA okumalarında kontrol grubunu absorbans değerlerinin oldukça üzerinde olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.3). Bu bulgular, Lb. pentosus suşlarına ait nötr metabolitlerin (karbondioksit, bakteriyosin…vb.), Salmonella typhimurium patojeninin inhibisyonunda etkili olmadığını göstermiştir.
Lactobacillus plantarum 1 suşlarına ait NKS’lere ait absorbans değerlerinin, 48
saatlik inkübasyon sonunda yapılan ELISA okumalarında kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça üzerinde olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.3). Sadece iki izolata (41d ve 42.1) ait NKS absorbans değerleri kontrol grubu değerlerine yakın fakat üzerinde gözlemlenmiştir. Bu durum, Lb. plantarum 1 suşuna ait nötr ve katalaz eklenmiş metabolitlerin (karbondioksit, bakteriyosin…vb.), Salmonella typhimurium patojeninin inhibisyonunda etkili olmadığını göstermiştir.
Lactobacillus paracasei subsp. paracasei suşlarından elde edilen NKS’lere ait
absorbans değerlerinin, 48 saatlik inkübasyon sonunda yapılan ELISA okumalarında kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça üzerinde olduğu tespit edilmiştir (Şekil 4.3.2.3). Sadece 44a izolatına ait NKS absorbans değeri kontrol grubu absorbans değerine yakın fakat yine üzerinde tespit edilmiştir. Bu durum, Lb. paracasei subsp.
paracasei suşlarına ait nötr ve katalaz eklenmiş metabolitlerin (karbondioksit,
bakteriyosin…vb.), Salmonella typhimurium patojeninin inhibisyonunda etkili olmadığını göstermiştir.
Lactococcus lactis subsp. lactis suşuna ait NKS’nin absorbans değerlerinin, 48
saatlik inkübasyon sonunda yapılan ELISA okumalarında kontrol grubu absorbans değerlerinin oldukça üzerinde olduğu görülmüştür (Şekil 4.3.2.3). Bu durum, Lc.
lacits subsp. lactis suşuna ait nötr ve katalaz eklenmiş metabolitlerin [karbondioksit,
bakteriyosin (Lc. lactis türüne ait önemli metabolitlerden birisi nisindir)…vb.],
46
Şekil 4.3.2.2: Diğer izolatlardan elde edilen nötralize edilmiş supernatantların (NS) Salmonella typhimurium üzerine etkileri
*27.3: Lc. lactis subsp. lactis
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5 0 6 24 48 Lb.
47
ELISA okumalarının doğrulamasını yapmak için Salmonella typhimurium içeren NS, NNS ve NKS’ler Xylose Lysine Deoxycholate Agar’a ekilmiş ve 24 saat 37˚C’de inkübasyonun sonunda NNS ekilen petrilerde gelişme çok az oranda görülür veya hiç görülmezken, NS ve NKS ekilmiş petrilerde kontrol petrisiyle benzer oranlarda, sayılamayacak miktarda koloni gelişimi gözlenmiştir.
Lb. brevis türüne ait izolatların dışında incelenmiş olan Lb. pentosus, Lb. plantarum
1, Lb. paracasei subsp. paracasei ve Lactococcus lactis subsp. lactis suşlarına ait metabolitler içinde yalnızca organik asitlerin Salmonella typhimurium patojeninin inhibisyonunda etkili olduğu görülmüştür. Lc. lactis türüne ait önemli bir bakteriyosin olan nisinin de Salmonella typhimurium patojeni üzerinde etkisiz olduğu belirlenmiştir.