Experimento I: Avaliação do efeito comportamental do NPS em camundongos
no campo aberto
A fim de buscar a dose de NPS que provocasse efeito hiperlocomotor nos animais em nossas condições experimentais, um grupo de camundongos foi submetido à cirurgia estereotáxica para implantação da cânula-guia no ventrículo lateral. Depois de 3 a 5 dias de recuperação, os camundongos foram
administrados com salina, NPS 0,1 nmol ou NPS 1 nmol via icv por meio da cânula-guia, e submetidos ao campo aberto 5 min após a administração (figura 7).
Figura 7 - Delineamento experimental do Experimento I.
Experimento II: Efeito do tratamento prévio com AMPT na hiperlocomoção
induzida por metilfenidato e por NPS
Etapa A: Avaliação do efeito comportamental do AMPT em camundongos
no campo aberto
Na etapa A do experimento II, demonstrada na figura 8, os camundongos receberam a injeção de veículo ou de uma das seguintes doses de AMPT: 100, 200, 250 ou 300 mg/kg, ip. Após o período de 24 h, os animais foram submetidos ao campo aberto. A atividade locomotora dos animais foi acessada a fim de saber qual das doses não alterava a locomoção dos animais em relação ao grupo controle (veículo).
Figura 8 - Delineamento experimental da etapa A do experimento II.
Etapa B: Efeito da administração prévia de AMPT sobre a
hiperlocomoção do metilfenidato em camundongos no campo aberto
Vinte e quatro horas antes do teste comportamental, uma parte dos animais recebeu injeção de AMPT 250 mg/kg, ip, e a outra parte recebeu a injeção apenas do veículo onde o AMPT foi solubilizado. No dia do teste, parte dos animais que receberam AMPT foi administrada com metilfenidato 5 mg/kg, sc, e a outra parte foi administrada com veículo de metilfenidato; da mesma forma, uma parte dos animais que haviam recebido apenas o veículo de AMPT foi injetada com metilfenidato e o restante recebeu o veículo do metilfenidato (figura 9). Quinze minutos após a administração de metilfenidato ou veículo, os animais foram submetidos ao campo aberto. O metilfenidato foi empregado como forma de controle positivo do experimento, por possuir efeito hiperlocomotor consistente ocasionado por aumento da disponibilidade sináptica de dopamina.
Figura 9 – Delineamento experimental da etapa B do experimento II.
Etapa C: Efeito da administração prévia de AMPT sobre a
hiperlocomoção do NPS em camundongos no campo aberto
Camundongos passaram por cirurgia estereotáxica para implantação da cânula no ventrículo lateral e tiveram 3 a 5 dias de recuperação. Os animais devidamente canulados receberam AMPT 250 mg/kg, ip, ou veículo de AMPT, ip, e 24 h depois, receberam NPS 1 nmol ou salina, icv, visando avaliar se a pré-administração de AMPT modifica a atividade locomotora dos animais que receberam NPS. O esquema dessa etapa está mostrado na figura 10 a seguir.
Experimento III: Efeito do tratamento prévio com reserpina na hiperlocomoção
induzida por metilfenidato e por NPS
Etapa A: Avaliação do efeito comportamental da reserpina em
camundongos no campo aberto
A fim de investigar a dose de reseprina a ser empregada neste estudo, camundongos foram administrados com as doses de 1, 2 ou 5 mg/kg de reserpina, sc, ou ainda, veículo de reserpina. Vinte e quatro horas depois, os animais foram submetidos ao campo aberto, conforme mostra a figura 11.
Figura 11 - Delineamento experimental da etapa A do experimento III
Etapa B: Efeito da administração prévia de reserpina sobre a
hiperlocomoção do metilfenidato em camundongos no campo aberto
Camundongos receberam reserpina 2 mg/kg ou veículo, por via s.c., e vinte e quatro horas depois, foram administrados com o controle positivo metilfenidato 5 mg/kg, s.c. ou salina, conforme esquematizado na figura
12. A avaliação do comportamento locomotor do animal foi acessada no campo aberto.
Figura 12 - Delineamento experimental da etapa B do experimento III.
Etapa C: Efeito da administração prévia de reserpina sobre a
hiperlocomoção do NPS em camundongos no campo aberto
A figura 13 demonstra o esquema da etapa C. Camundongos foram submetidos à cirurgia estereotáxica para implantação de cânula guia no ventrículo lateral, e foram tratados 3 a 5 dias depois com reserpina 2 mg/kg, sc, ou com veículo. Após 24 h, os animais receberam NPS 1 nmol ou salina icv e foram submetidos ao campo aberto depois de 5 min, a fim de avaliar se o tratamento com reserpina altera a atividade locomotora dos animais que receberam NPS.
Figura 13 - Delineamento experimental da etapa C do experimento III.
Experimento IV: Efeito do tratamento prévio com sulpiride na hiperlocomoção
induzida por metilfenidato e por NPS
ETAPA A: Avaliação do efeito comportamental de sulpiride em
camundongos no campo aberto
Camundongos foram tratados com veículo ou sulpiride nas doses de 25 ou 50 mg/kg, ip, então, depois de 45 min, foram colocados no campo aberto para avaliação da atividade locomotora, conforme esquematizado na figura 14. Essa etapa visou escolher a dose de sulpiride que não afetasse a locomoção espontânea dos animais no campo aberto.
ETAPA B: Efeito da administração prévia de sulpiride sobre a
hiperlocomoção do metilfenidato em camundongos no campo aberto
Camundongos foram pré-tratados com sulpiride 25 mg/kg ou veículo, ip, e 45 min depois, foram administrados com metilfenidato 5 mg/kg ou veículo, sc, conforme esquematizado abaixo na figura 15. Quinze minutos após a administração de metilfenidato ou veículo, os animais foram submetidos ao campo aberto.
Figura 15 - Delineamento experimental da etapa B do experimento IV.
ETAPA C: Efeito da administração prévia de sulpiride sobre a
hiperlocomoção do NPS em camundongos no campo aberto
Camundongos canulados no ventrículo lateral por meio de cirurgia estereotáxica foram utilizados. Três a 5 dias após o procedimento, eles receberam injeção de sulpiride 25 mg/kg ou veículo, ip. Os animais foram administrados com NPS 1 nmol ou salina, icv, 45 min depois da administração de sulpiride ou veículo, conforme esquematizado abaixo
(figura 16), a fim de avaliar se a pré-administração de sulpiride provoca alteração na hiperlocomoção causada pela administração de NPS em camundongos submetidos ao campo aberto.
Figura 16 - Delineamento experimental da etapa C do experimento IV.