VİRUS TİTRASYON
• VİRUS TİTRESİ: Bir virus süspansiyonunun enfeksiyözite gücünün rakamsal ifadesi
• Belirli bir hacimdeki virüs süspansiyonunda bulunan enfektif virion sayısını ifade eder.
• Enfeksiyözite gücünün tespit edilmesine ise TİTRASYON adı verilir.
Titrasyon
Hücre Kültürü
ETY
Deney Hayvanları
İn vitro
İn vivo
Makrotitrasyon Mikrotitrasyon Plak test
BİRİMLERİ
• DKID
50: D oku K ültürü I nfektif D oz 50=%50
• Testte kullanılan konakçı sistemlerin sayısal olarak en az yarısında enfeksiyon oluşturan virus sulandırması belirlenerek, virusun enfektif gücünü ifade etmek için kullanılır.
• YID
50: Y umurta I nfektif D oz 50=%50
• LD
50: L etal D oz 50=%50 (Deney hayvanları için)
Kullanım Amacı
1. Virolojik ve serolojik çalışmalarda kullanılacak virusların standardizasyonu 2. Aşı hazırlanması için virus dozunun ayarlanması
3. Virusların identifikasyonunda kullanılan fiziko-kimyasal testlerin değerlendirilmesi
4. İnaktivasyon kinetiğinin belirlenmesi
5. Virus soylarının saflaştırılması
4.5 ml
0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
Her pipetasyon öncesi pipet değiştir!!!!
10-1 10-2 10-3
10-6 10-4 10-5
HK VK
0.1 ml
VK: Virus Kontrol
0.05 ml VİRUS
0.05 ml Serumsuz Earle
HK: Hücre Kontrol
0.1 ml Serumlu Earle
HK VK
Son olarak, TÜM GÖZLERE 0.05 ml (1 DAMLA) hücre süspansiyonu
(DAMLALIKLA!)• Test bitti
Her gün mikroskopta bakıyoruz!
37℃ ve %5 CO2 etüv
CPE
Testin Değerlendirilmesi
Hücre Kontrol 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5
Hücre Kontrol 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5
CPE azalır !!!!!!
10-1 10-2 10-3
10-6 10-4
10-5
VK HK
