Biyokimyasal Testler Fermentasyon Testleri

Biyokimyasal Testler Fermentasyon Testleri

Fermentasyon enerji üretimi için oksijen molekülüne gerek duyulmayan, susbstrat düzeyinde fosforilasyonun

gerçekleştiği biyokimyasal tepkimelerdir.

Anaerob, fakültatif anaerob ve mikroaerofil mikroorganizmalar tarafından gerçekleştirilir.

Fermentasyon sonunda etanol, laktik asit, bütanol,

aseton gibi ürünler oluşur.

Fermentasyon Testleri

Clostridium türleri: Bütanol, etanol, aseton Saccharomyces cerevisiae gibi mayalar yada

Zymomonas mobilis gibi bakteriler etanol

Lactobacillus pentosus gibi bakteriler laktik asit

üretebilir.

Fermentasyon Testleri

Bu testler kalitatif olarak yapıldığında ortamda

genellikle mikroorganizmaların fermente edebilecekleri şekerler ve indikatör maddeler beraber bulunur.

Şeker olarak glukoz, laktoz, inülin vb. şekerler

kullanılabilir.

Fermentasyon Testleri

İndikatör Asidik ortam Bazik Ortam

Bromtimol mavisi sarı Mavi

Bromkresol moru sarı Mor

Fenol Kırmızısı sarı Kırmızı-Pembe

Fermentasyon sırasında ortamın pH değeri düşünce, indikatör boyaların rengi değişir.

Bu sayede fermentasyonun varlığı anlaşılabilir.

Fermentasyon Testleri

Fermentasyon testleri sırasında ortamda gaz da

oluşabilir (CO

gibi). Bu gazların varlığı dürham tüpü ile belirlenebilir.

Dürham tüpü sıvı besiyerine ters bir şekilde konulduğunda fermentasyon sırasında şayet gaz

üretiliyor ise tüpün üst kısmında gözle görülebilinecek

şekilde gaz oluşur.

Fermentasyon Testleri

1)Fermentasyon deneyi için glukoz, sükroz, laktoz ve ksiloz içeren dört adet nutrient broth besiyerine fenol

kırmızısı konulur.

2) Dürham tüpleri besiyerlerine konulur.

3) Escherichia coli, Staphylococcus aureus,

Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis bakterilerinin her biri bu besiyerlerine aseptik koşullarda ekilir.

4) Mikroorganizmalar 24 saat 37 ºC’de inkübasyona

bırakılır.

Fermentasyon Testleri

Glukoz Laktoz Sükroz Ksiloz Gaz

Oluşumu

E. coli

S. Aureus

P. aeruginosa

B. subtilis

Aşağıdaki tablo elde edilen sonuçlara göre doldurulur. Deney farklı şekerler için tekrarlanabilir.

Fermentasyon Testleri

Önemli Not:

Fermentasyon testlerinde deney periyodik olarak takip edilmeli ve renk değişimi gözlenince deneye son

verilmelidir.

Eğer deneye devam edilirse besiyerinde bulunan peptonlar mikroorganizmalar tarafından kullanılarak

pH tekrar yükselir pH yükselmesi sonucu indikatör maddelerin renkleri eski hallerine döner. Bu durumda

yalancı negatif sonuç elde edilir.