Metodbeskrivning Dokumentnamn: COVID-19 Antigen Snabbtest Panbio

(1)

Upprättat av Granskad av Godkänt av Giltigt fr o m Dok nr-vers Minna Ygge Minna Ygge, Birgitta

Lundström Pernilla Jatko 2020-12-11 17974-2

ANALYSNAMN i VAS COV2AG

INDIKATION

Snabbtestet kan användas där det är behov av att snabbt identifiera högsmittsamma covid- 19-patienter, tex på akutmottagningar, öppenvården, särskilda boenden för äldre,

institutioner eller andra vårdmiljöer, smittspårning.

Ett negativt antigen snabbtest utesluter inte covid-19.

BAKGRUND

Snabbtestets känslighet, dvs sensitivitet, är framförallt beroende av när i infektionsförloppet det används och känsligheten korrelerar med virusnivån hos patienten. Högst känslighet ses i prov taget på patienter med typiska symtom senast dag 5 efter sjukdomsdebut, det är då patienten har höga virusnivåer. Överensstämmelsen med PCR som är ”gold standard” vid covid-19-diagnostik, är god när virusnivåer är höga (Ct<25), men sämre eller dålig när virusmängder är låga (Ct<30).

Enligt publicerade utvärderingar (se referenser) uppfyller Panbio snabbtest

Folkhälsomyndighetens rekommenderade prestanda: Sensitivitet >80 % respektive

Specificitet >99%. Sensitiviteten beror dock på vilken grupp du testar, sensitiviteten i gruppen asymtomatiska är endast drygt 50% i många utvärderingar. Specificiteten är god, med

positivt snabbtest hos asymtomatisk bör bekräftas med PCR för att undvika falskt positivt resultat.

Påvisning av antigen ingår i falldefinitionen för covid-19 och provsvaret kan anmälas direkt till SmiNet och användas för att ge förhållningsregler enligt smittskyddslagen.

Eftersom antigentestet har en sämre känslighet än PCR-tester finns risk för falskt negativa provresultat hos personer som inte har tillräckligt höga virusnivåer i de övre luftvägarna, vid klinisk covid-19 misstanke bör ett negativt antigentest följas upp med ett PCR-prov.

ANALYSPRINCIP

Analysprincipen är immunokromatografisk lateral flow-test för kvalitativ detektion av nukleokapsiden hos SARS-CoV-2 i nasopharynxprov.

Testet innehåller en membranremsa med två linjer, en testlinje T och en kontrollinje C.

Testlinjen T detekterar nukleokapsidantigen från SARS-CoV-2-viruset.

T-linjen är belagd med antikroppar mot SARS-CoV-antigen. Bufferten i ”Buffer”-flaskan innehåller guldkonjugerade antikroppar mot SARS-CoV-2-antigen. Om provet innehåller covid-antigen så kommer det att bildas ett antikropps-antigen-antikroppskomplex som blir synligt vid T-linjen. Om covid-antigen saknas så fastnar inget vid T-linjen och provbuffert- blandningen rör sig kromatografiskt uppåt förbi T-linjen.

Kontrollinjen C är belagd med musmonoklonal anti-kyckling-IgY. Kontrollinjen C ska alltid vara synlig för godkänt testresultat. Bufferten innehåller även guldkonjugerat kyckling-IgY som tillsammans med C-linjens antikroppar bildar ett immunkomplex som ska bli synligt med ett sträck vid C. Varken testlinjen eller kontrollinjen är synliga i resultatfönstret innan

patientprovet appliceras. En synlig kontrollinje krävs för att godkänna ett giltigt testresultatet.

(2)

PROVMATERIAL

Använd endast nasopharynxprov taget med för testet avsedda pinnar.

OBS! Testet ska utföras direkt efter provtagningen. Om detta ej är möjligt kan NPH-pinnen stå i extraktionsröret med 300 uL buffert i upp till 2 timmar.

REAGENS OCH MATERIAL

Varje förpackning/kit innehåller: 25 singelförpackade testkasetter, 1 Buffert-flaska, 25 extraktionsrör, 25 extraktionsrörs lock, 1 positiv kontroll, 1 negativ kontroll, 25

nasopharynxpinnar för provtagning, 1 ställ för extraktionsrören, beskrivning av testets utförande.

Kiten ska förvaras i rumstemperatur 2-30 °C, får ej frysas.

Stoppur (ingår ej i förpackningen, utan beställs separat).

ANALYSPROCEDUR

1. Förvara testmaterialet i rumstemperatur. (Om det förvarats i kyl så ska det rumstempereras i 30 minuter innan analys.)

2. Använd handskar och övrig nödvändig skyddsutrustning vid provtagningen (enligt Vårdhygiens riktlinjer).

3. Läs noggrant igenom Metodbeskrivningen innan du utför testet för första gången.

4. Kontrollera utgångsdatum på kit. Om passerat utgångsdatum, använd annat kit.

5. Ta fram 1 testkasett, 1 NPH-provtagningspinne, 1 extraktionsrör och Buffert-flaskan.

Öppna inte testkasetten förrän den är rumstempererad.

(3)

6. Öppna testkasetten. Ställ den på en ren yta avsedd för analysarbetet.

Se följande på testkasetten:

1. Resultat fönster

2. Provbrunnen – S (Sample)

7. Märk testkasetten med patient-ID.

8. Håll Buffert-flaskan lodrätt och droppa buffert, ca 10 droppar, upp till sträcket/markeringen på extraktionsöret = 300 uL.

OBS! Viktigt med rätt mängd buffert! För lite eller för mycket buffertvätska kan ge felaktigt testresultat.

9. Utför NPH-provtagning enligt Labhandbokens NPH-provtagningsanvisning för SARS- CoV-2, viktigt att snurra pinnen i bakre nasopharynx i 10 sekunder.

10. Efter provtagningen sätts pinnen i röret med buffert. Snurra pinnen i buffertvätskan och tryck spetsen mot rörets kant minst 5 gånger.

(4)

11. Lyft sedan pinnen något och krama sedan ur provpinnen genom att klämma hårt på röret med fingrarna.

12. Bryt sedan av provpinnen vid brytpunkt och stäng noggrant igen röret med den blå skruvkorken.

13. Skruva av den vita nedre skruvkorken längst ned på röret.

14. Håll röret lodrätt och droppa 5 droppar med jämnt tryck i provbrunnen S. En rödaktig vätska ”vandrar” nu upp längs med testmembranet.

(5)

OBS! Undvik att skapa bubblor i extraktionsröret. Bubblor kan leda till felaktigt analysresultat. Om det inte går att skapa tillräckligt med droppar kan det bero på att doseringsmunstycket är tilltäppt. Skaka röret försiktigt för att frigöra blockeringen tills du ser att provet i extraktionsröret är slemmigt eller

innehåller något annat kletigt som förhindrar ett jämnt droppflöde, skaka röret försiktigt så att fria droppar kan bildas.

15. Ställ stoppuret på 15 minuter och starta tiden.

16. OBS! Hantera eller flytta inte testkasetten förrän testet är slutfört och klart för avläsning.

17. Stäng munstycket och kassera röret i Smittförande avfall.

AVLÄSNING

Testresultatet ska läsas av efter 15 minuter, ej senare än 20 minuter. Har det gått mer än 20 minuter måste ett nytt test utföras för att säkert kunna lita på resultatet.

Negativt test: Enbart kontrollinjen framträder vid C.

(6)

Positivt test: En testlinje ses vid T och en kontrollinje ses vid C.

OBS! Förekomst av en testlinje T, oavsett hur svag den är, ska bedömas som ett positivt testresultat. Därför är det viktigt med bra belysning i analysrummet. Det spelar ingen roll vilken av linjerna som blir positiv först.

Ogiltiga testresultat:

OBS! Om kontrollinjen C inte syns är testet ogiltigt och kan inte avläsas. Nytt test måste utföras.

Kassera testkasetten i Smittförande avfall.

SVARSRUTIN

Lägg in testresultatet i VAS provkod COV2AG.

(7)

• Negativt antigentest besvaras: SARS-CoV-2 antigentest Negativt ”Negativt antigentest utesluter inte COVID-19. Om klinisk misstanke på covid-19 rekommenderas PCR”

• Positivt antigentest besvaras: SARS-CoV-2 antigentest POSITIVT

”Anmälningspliktig enligt smittskyddslagen.”

• Ogiltigt antigentest besvaras: SARS-CoV-2 antigentest Ej bedömbart ”Överväg PCR-prov”

INTERN KONTROLL

1. Positiv och negativ kontroll som följer med varje kit testas när varje ny kartong öppnas.

2. Håll buffert flaskan lodrätt och fyll extraktionsröret med buffert, ca 10 droppar, tills den når upp till markeringen på röret (= 300 uL).

OBS! Viktigt med rätt mängd buffert! För lite eller för mycket buffertvätska kan ge felaktigt resultat.

3. Lägg provpinnen för positiv eller negativ kontroll i buffertvätskan inuti extraktionsröret och blötlägg den i 1 minut. Snurra kontrollpinnens spets i buffertvätskan röret, tryck den mot extraktionsrörets vägg minst 5 gånger.

4. Lyft sedan upp pinnen en bit i röret och krama ur pinnen genom att klämma hårt i röret med fingrarna.

5. Kassera den använda kontrollpinnen i Smittförande avfall.

6. Skruva på den blå korken på röret.

7. Följ testproceduren enligt ovan.

8. Positiva kontrollen ska vara positiv, negativa kontrollen ska vara negativ. Godkända resultat på kontrollerna är en förutsättning för att få använda testkiten i förpackningen.

9. Kontrollresultaten ska dokumenteras på kartongen med datum och signatur. Det är bra att dokumentera resultaten även på särskilda Loggblad för Interna kontroller COVID-19 antigen snabbtest PANBIO.

TESTBEGRÄNSNINGAR, FELKÄLLOR OCH FELSÖKNING 1. Testet skall endast användas av utbildad vårdpersonal.

2. Om analysanvisningarna inte följs får testresultaten inte avläsas.

(8)

3. Endast korrekt utförda nasopharynxprov ska användas, andra provtyper är inte validerade för testet.

4. Ett falskt negativt testresultat kan fås om nasopharynxprovtagningen ej utförts korrekt.

5. Falska testresultat kan fås om fel mängd buffert är tillsatt i extraktionsröret eller om fel mängd provblandning tillsätts i provbrunnen.

6. Falskt negativt svar om provet är taget sent i sjukdomsförloppet > 5dagar.

7. Ett negativt testresultat utesluter inte pågående COVID-19-infektion och nytt PCR-prov bör tas vid covid-19-misstanke.

8. Felaktigt svar kan fås om analystiden ej är rätt, testet ska avläsas efter 15 minuter, ej senare än 20 minuter.

9. Testet ska märkas med patient ID så att inte provförväxlingar sker.

10. Testet ska ej flyttas under analystiden.

11. God belysning krävs i analysrummet för att kunna se även svaga sträck vid testlinjen T.

12. Om råd och/eller hjälp med felsökning behövs kontakta Mikrobiologens personal.

REFERENSER

1. Kit insert, användarmanual, Panbio COVID-19 Ag Rapid Test Device

2. https://www.globalpointofcare.abbott/sv/product-details/panbio-covid-19-ag-antigentest.html

3. https://www.folkhalsomyndigheten.se/publicerat-

material/publikationsarkiv/v/vagledning-for-anvandning-av-antigentester-vid-covid-19/

4. WHO: Antigen-detection in the diagnosis of SARS-CoV-2 infection using rapid immunoassays. Interim guidance 11 September 2020

5. EU-kommissionen: Commission Recommendation on 18.11.2020 on the use of rapid antigen tests for the diagnosis of SARS-CoV-2 infection:

6. ECDC Technical report: Options for the use of rapid antigen tests for COVID-19 in the EU, EEA and the UK

7. Norwegian Directorate of Health: COVID-19 pandemic: Evaluation of Abbot’s Panbio COVID-19 rapid antigen test in Norway 3 December 2020

(9)

8. Evaluation of the Panbio Covid-1 19 rapid antigen detection test device for the screening of patients with Covid-19 Fenollar F et al. J. Clin. Microbiol.

doi:10.1128/JCM.02589-20

9. Panbio antigen rapid test is reliable to diagnose SARS-CoV-2 infection in the first 7 days after the onset of symptoms. Linares M et al. Journal of Clinical Virology 133 (2020) 104659

10. Recommendations for use of antigenic tests in the diagnosis of acute SARS-CoV-2 infection in the second pandemic wave: attitude in different clinical settings. Candel FJ. Revista Española de Quimioterapia doi:10.37201/req/120.2020

11. Analytical and Clinical Performance of the Panbio COVID-19 Antigen-Detecting Rapid Diagnostic Test. Alemany A. medRxiv preprint doi:

https://doi.org/10.1101/2020.10.30.20223198; this version posted November 3, 2020

12. Real-life validation of the Panbio COVID-19 Antigen Rapid Test (Abbott) in community-dwelling subjects with symptoms of potential SARS-CoV-2 infection.

Gremmels H et al. this version posted October 20, 2020. doi:

https://doi.org/10.1101/2020.10.16.20214189. medRxiv preprint

13. Field evaluation of a rapid antigen test (Panbio™ COVID-19 Ag Rapid Test Device) for the diagnosis of COVID-19 in primary healthcare centers. Albert E et al. medRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.10.16.20213850.this version posted

October 20, 2020

14. From more testing to smart testing: data-guided SARS-CoV-2 testing choices. van Beek J. medRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.10.13.20211524.this version posted October 14, 2020