T. Oft. Gaz. 30, 255-258, 2000
Ratlarda On Kamaraya Kristal Viyole injeksiyonu Sonras1 Histopatolojik Degerlendirme •
Kaan Unlii (* ), Ahmet Aksiinger (**),Sevin Saker(***), Nihal K1lznr; (****** ), Candan Karaca (**** ), Meral Erdinr; (******)
OZET
Ama«;: Bu eksperimental<;ah§mada rat on kamaralanna kristal viyole soltisyonu injeksiyo- nu sonrasmda olu§an hisopatolojik degi§ikliklerin ara§tmlmasi ve bu soliisyonlann sterilizasyon yonteminin degerlendirilme(>i·ama<;lanmi§tlr.
Metod: Bu kor, eksperimental <;ah§mada toplam 30 Wistar albino ratm 30 goziine Grup l'de 0.05 ml, %0.01'lik (12 goz) ve Grup 2'de 0.05 ml %0.001'lik kristal viyole soliisyonu (12 goz) on kamara i<;ine injekte edildi. 6 goziin on kamarasma ise kontrol amac1yla 0.05 ml dengeli tuz soltisyonu (BSS) verildi (Grup 3). injeksiyondan 1, 24 ve 48 saat sonra her defasmda Grup 1 ve 2'den 4 goz, Grup 3'ten ise 2 goz eniiklee edilerek histopatolojik inceleme yap1ld1. Soltis- yonlann haz1rlanmasmdan 1, 24, 48 ve 72 saat sonra alman ornekler bakteriyel ve fungal besi yerlerine ekildi.
Bulgular: Histopatolojik incelemede Grup 1, 2 ve 3'teki gozlerin hi<;birinde patoloji tespit edilmedi. Besi yerlerinde hi<;birinde iireme olmad1.
Sonu«;: Bu <;ah§mada %0.01 ve %0.001 konsantrasyonundaki kristal viyole soliisyonlannm gozi<;inde histopatolojik degi§iklige neden alan belirgin bir toksik etkisi gozlenmedi. Soliisyon- lann haz1rland1ktan sonra en az 72 saat steril kald1klan tespit edildi.
Anahtar Kelimeler: Kristal viyole, rat gozii, histopatolojik degerlendirme
SUMMARY
Histopathological Evaluation After Injection of Gentian Violet Solution To Anterior Chamber; An Experimental Study
Purpose: To investigate the histopathological changes after injection of gentian violet so- lution to anterior chamber of rats and to evaluate the effectiveness of sterilization method of this solution.
Medhods: In this masked, experimental study, 0.05 ml of 0.01% (Group 1) and 0.001%
(Group 2) gentian violet solutions, and BSS (Group 3) for control were injected to anterior
(*) Dicle Dniversitesi Ttp Faktiltesi Goz Hastahklan Anabilim Dah, Yrd. Doc;:. Dr.
(**) Dicle Universitesi Ttp Faktiltesi Goz Hastahklan Anabilim Dah, Doc;:. Dr.
(***) Dicle Dniversitesi Ttp Faktiltesi Goz Hastahklan Anabilim Dah,Uzm. Dr.
(****) Dicle Dniversitesi Ttp Faktiltesi Goz Hastahklan Anabilim Dah, Ara§. Gor.
(*****) Dicle Dniversitesi Ttp Faktiltesi Patoloji Anabilim Dah Uzm. Dr.
(******) Dicle Universitesi Ttp Faktiltesi Farmakoloji Anabilim Dah Yrd. Doc;:. Dr.
+ XII. A vrupa Oftalmoloji Kongresinde poster olarak teblig edilmi§tir (Stockholm, isvec;:, 27 Haziran-1 Temmuz 1999).
Mecmuaya Geli§ Tarihi: 11.08.1999 Diizeltmeden Geli§ Tarihi.· 03.12.1999 Kabul Tarihi: 22.12.1999
256 Kaan Unlti, Ahmet Aksiinger, Sevin Saker, Nihal Kiim9, Candan Karaca, Meral Erdin9
chamber of total 30 eyes of 30 Wistar albino rats. One, 24 and 48 hours after injection, 4 eyes in per study group and 2 eyes in control group were enucleated and histopathological examination was performed. Samples were taken from the solutions for bacterial and fungal culture medi- ums 1, 24, 48 and 72 hours after preparation.
Results:
In histopathological examination no pathology was observed in all groups. No contamination was observed.
Conclusions:
This preliminary study showed that 0.01% and 0.001% gentian violet soluti- ons have no evident toxic effect that cause significant histopathological changes. This solutions stayed sterile at least 72 hours after preparation.
Key Words:
Gentian violet, rat's eye, histopathological evaluation
GiRi~
Gilnilmilz katarakt operasyonunda tercih edilen sirkiller kapsilloreksis (SK) yonteminin kullamldigi fakoemillsifikasyon teknigidir (1-3). Ancak beyaz ve matilr katarakth olgularda on kapsilliln iyi gorillememesi nedeniyle kapsilloreksis safhasmda gus:lilkle kar§I- la§Ilmaktadu. Bu nedenle bu olgularda diatermi, iki basamakh SK uygulanmas1 veya on kamaraya hava verildikten sonra kapsilloreksis yap!lmas1 yada kapsil- liln s:e§itli boyalarla boyanmas1 tavsiye edilmektedir ( 4- 10).
Bu eksperimental s:ah§mada on kapslililn boyanma- smda yeni bir teknik olan kristal viyolenin farkh kon- santrasyonlannm gozis:inde olas1 toksik etkilerinin histo- patolojik olarak incelenmesi ve hastahane §artlannda ha- Zirlanan solilsyonlann sterilizasyon as:ISlndan degerlen- dirilmesi amas:lanmi§tir.
MATERYAL ve METOD
Bu s:ah§mada %0.01 ve %0.001 konsantrasyonlann- da kristal viyole solilsyonlan kullamld1. Solilsyonlar ha- zirlamrken oncelikle toz §eklinde bulunan 0.5 gr kristal viyole 100 cc distile su is:inde iyice eritilerek %0.5'lik konsantrasyon elde edildi. B u kan§Imdan 1 cc almarak 4 cc dengeli tuz solusyonu (BSS) ile kan§tlnlarak
%0.1 'lik, bu solilsyondan da 1 cc ahmp 9 cc BSS ile ka- n§tmlmasi ile de %0.01 'lik ve bu solilsyondan da 1 cc ahmp 9 cc BSS ile kan§tmlmasi ile de %0.001'lik kon- santrasyonlarda kristal viyole solilsyonlan elde edildi.
Haz1rlanan solusyonlar direkt lama yay!larak havada ku- rumaya bJrakildi ve l§Ik mikrokobu altmda kristal varhg1 as:ISlndan degerlendirildi.
Elde edilen solusyonlar otoklavda 120 derecede 20 dakika tutularak steril edildi. Kullamlan sterilazasyon yonteminin etkinliginin degerlendirilmesi amac1yla so- lilsyonlann haz1rlanmasmdan 1, 24, 48 ve 72 saat sonra 0.1 cc almarak eozin methilen mavisi (EMB), kanh agar ve Saburo besiyerlerine ekildi. Besi yerleri etilvde sak-
land1 ve ekimden 24, 72 saat sonra degerlendirildi, Sa- buro besi yeri ise 1 hafta boyunca sakland1.
<;ah§mamJZda toplam 30 Wistar albino ratm 30 sag gozil kullamld1. Topikal anestezi altmda (%0.4 oksibup- rokain solilsyonu) periferal saydam korneadan 28 G in- sUlin enjekt6ril ile on kamaraya girilip 12 goze 0.05 ml
%0.01'lik kristal viyole solilsyonu (Grup 1), 12 goze 0.05 ml %0.001 'lik kristal viyole solilsyonu (Grup 2) ve 6 goze ise kontrol amaCiyla 0.05 ml dengeli tuz solilsyo- nu (BSS) (Grup 3) injekte edildi. injeksiyondan 1, 24 ve 48 saat sonra Grup 1 ve 2'den 4'er rat, Grup 3'ten de 2 rat yilksek doz pentotal (80 mg/kg) ile sakrifiye edilerek s:ah§ma gozleri enilklee edildi ve histopatolojik incele- me is:in kodlanarak patolog hekim maskelendi. Enilklee edilen gozler bir gun silreyle %10 formaldehit solilsyo- nunda tespit edildikten sonra ikiye bolilnerek parafin bloklara gomlildil. Bu doku bloklanndan 4 mikron ka- lmhgmda kesitler haz1rlamp hematoksilen eosin ile bo- yandl. Histopatolojik degerlendirme ( 40, ( 100, (200 bil- yiltme ile I§Ik mikroskobu altmda gers:ekle§tirildi.
SONU<;LAR
%0.01 ve %0.001 solusyonlanndan lam ilzerine ha- Zirlanan direkt yaymamn I§Ik mikroskobu altmda deger- lendirilmesinde kristal gozlenmedi.
Solilsyonlann haz1rlanmasmdan 1, 24, 48 ve 72 saat sonra alman ornekler eozin metilen blue (EMB), kanh agar ve Saburo besiyerlerine ekildi. Ekimden 24 ve 72 saat sonraki degerlendirmelerde besi yerlerinin his:birin- de ilreme gozlenmedi. Saburo besi yerinin 1 hafta sonra- ki degerlendirmesinde de ilreme yoktu.
<;ah§ma gozlerinin kornea, iris, lens, silier cisim ve OTI kamara a\{1 elemanlannm histopatolojik incelemesin- de kristal viyole solilsyonuna bagh olarak geli§en her- hangi bir toksik etki gozlenmedi, hem s:ah§ma hem de kontrol gozlerinin tilmilnde gozis:i dokular normal ola- rak degerlendirildi (Resim I, 2). Aynca gozlerin his:bi- rinde gozis:inde kristal viyole kristalleri gozlenmedi.
Ratlarda On Kamaraya Kristal Viyole injeksiyonu Sonras1 Histopatolojik Degerlendirme 257
Resim I. On kamaraya %0.01 kristal viyole injeksiyonundan 24 saat sonra enuklue edilen gozde korneamn Z§zk mikroskobu altznda incelemesinde normal doku yapzsz gorulmektedir (hematoksilen eosin, x 100).
Resim2. On kamaraya %0.001 kristal viyole injeksiyonundan1 saat sonra enukliie edilen gozde silier cisim ve irisinz§zk mikroskobu altznda incelemesinde normal doku yapzsz gorUlmektedir (hematoksilen eosin, x 100).
TARTISMA
Beyaz ve mattir katarakth olgularda on kapsiiltin iyi goriilememesi nedeniyle kapsiiloreksis safhasmda gti<;:- ltikle kar§Ila§llmaktadir. Bu hastalarda tamamen kesif olan korteks nedeniyle operasyon oncesi ntikleusun sert- lik derecesini de degerlendirmek her zaman mtimktin ol- mayabilir. Kapsiiloreksisin tam ger<;:ekle§tirilemedigi bu sert ntikleuslu olgularda fakoemtilsifikasyon s1rasmda beklenmeyen komplikasyonlar gozlenebilir. Bu nedenle bu olgularda diatermi, iki basamal;<:h SK uygulanmas1 veya on kamaraya hava verildikten sonra kapsiiloreksis yapilmas1 yada kapstiltin <;:e§itli boyalarla boyanmas1 tavsiye edilmektedir ( 4-1 0).
Kristal viyole Rose anilininin penta ve hekzametil derivesi kaTI§Imidir. Parlak menek§e renginde antiseptik ozelligi olan bir anilin boyas1d1r. Kimyasal ismi hexa- methylrosanilin olan kristal viyolein erime noktas1 215 derece olup bu derecenin tisttinde bozulur. Toz §eklinde bulunan bu boya 166 k1Slm su, 7 klSlm alkol, 20 klSlm kloroform ve 30 k1s1m gliserinde <;:oztintir. Fungus ve gram pozitif bakterilere kar§l bakteriostatik ve bakterisid etkisi olan ve oksiytir tedavisinde, baz1 cilt hastahklann- da kullamlan bu boyamn bir diger ad1 da "gentian vio- let"tir. Dokulara direkt uygulamada %0.02 - % 1'lik, ka- pab kavitelere olan uygulamalarda ise %0.01'lik kon- santrasyonundaki soltisyonlannm kullamlmas1 tavsiye edilmektedir (11, 12).
258 Kaan On!ti, Ahmet Akstinger, Sevin Soker, Nihal Krlm~, Candan Karaca, Meral Erdin~
ilk defa Prieto ve ark. 50 insan goziinde on kapsiiliin boyanmasmda hastahane §artlannda haz1rlanan
%0.01 'lik kristal viyole kullanml§lar ve gozlerde her- hangi bir komplikasyon gozlemlemediklerini bildirmi§- lerdir (13). Ancak bu soliisyonun gozir;:inde kullamm1 ile ilgili literatiirde bildirilmi§ herhangi bir histopatolojik incelemenin bulunmamas1 yams1ra %2 gibi yiiksek kon- santrasyonlarda kornea ve konjoktivada abrazyonlann goriilmesi gibi toksik etkilerinin bildirilmesi nedeniyle (14) bu boyanm olas1 toksik etkilerini oncelikle rat goz- lerinde histopatolojik olarak incelemeyi uygun gordiik.
Saf suda r;:oziildiigii bildirilen bu boyanm goz ir;:inde kristal formunun etkilerinin bilinmemesi nedeniyle so- liisyonun haz1rlanmasmda oncelikle distile suda eritil- mesini uygun gordiik. Nitekim soliisyonlann direkt lam iizerine yap1lan yaymasmda kristal gozlenmemi§tir. An- cak distile suyun gozir;:inde kullamlamayacagmdan otiirii as1l kan§lm BSS ile olu§turulmu§tur.
Krista! viyolenin %0.01 ve %0.001'lik soliisyonlan- nm gozir;:ine injeksiyonundan 1, 24, ve 48 saat sonra eniikle edilen gozlerin histopatolojik incelenmesinde do- kularda herhangi bir patolojik degi§iklik saptanmaml§tlr.
Sadece kapsiiloreksis safhasmda kullamlacak olan bu boya katarakt operasyonu s1rasmda normalde gozir;:inde k1sa bir sure kalacakt1r. Bizim r;:ah§mam1zda on kamara- ya injekte edilen boya irrigasyonla temizlenmemi§ ve gozir;:inde b1rakllm1§ olmasma ragmen 1, 24, 48 saat sonraki histopatolojik incelemelerde dokular normal ola- rak degerlendirilmi§tir.
Piyasada gozir;:i kullamm1 ir;:in haz1r preperatlan bu- lunmayan bu boyamn hastahane §artlannda haz1rlanan soliisyonlan sterilizasyon ar;:1smdan degerlendirildiginde ise bu soliisyonlann en az 72 saat steril kald1g1 gozlen- mi§tir.
Her ne kadar rat gozleri insan gozlerinden farkh ol- sa da bu oncii r;:ah§ma belirgin bir histopatolojik degi§ik- lige neden olan bir toksik etkisinin gozlenmedigi bu bo- yamn %0.01 ve %0.00 1'lik soliisyonlanmn beyaz ve matiir katarakth olgularda kapsiiloreksis safhasmda kul- lamlabilir oldugunu dii§iindiirmektedir.
KAYNAKLAR
1. Gimbel HV, Neuhann T: Development, advantages, and- methods of the continuous circular capsulorrhexis techni- que. J Cataract Refract Surg. 1990; 16:31-37.
2. Pande M: Continuous curvilinear (circular) capsulorhexis and planned extracapsular cataract extraction-are they compatible?.Br J Ophthalmo1.1993; 77: 152-7.
3. Assia EI, Apple DJ, Tsai JC, Lim ES: The elastic proper- ties of the lens capsule in capsulorhexis. Am J Ophthal- mol. 1991; 111:628-32.
4. Gimbel HV, Willerscheidt AB: What to do with limited view: the intumescent cataract. J Cataract Refract Surg.
1993; 19: 657-61.
5. Horiguchi M, Miyake K, Ohta I, Ito Y: Staining of the lens capsule for continuous circular capsulorrhexis in eyes with white cataract. Arch Ophthalmol. 1998; 116:
535-7.
6. Cimetta DJ, Gatti M, Labianco G: Haemocoloration of the anterior capsule in white cataract CCC. Eur J Implant Refract Surg 1995; 7: 184-5.
7. Hoffer KJ, McFarland JE: Intracameral subcapsular fluo- rescein staining for improved visualization during capsu- lorhexis in mature cataracts (letter). J Cataract Refract Surg 1993; 19: 566
8. Gimbel HV: Two-stage capsulorhexis for endocapsular phacoemulsification. J Cataract Refract Surg 1990; 16:
246-9.
9. Hausmann N, Richard G: Investigations on diathermy for anterior capsulotomy. Invest Ophthalmol Vis Sci 199 I;
32: 2155-9.
10. Vasavada A, Singh R, Desai J: Phacoemulsification of white mature cataracts. J Cataract Refract Surg 1998; 24:
270-7.
11. Gtiven KC. Trbbi Formtiller: istanbul. Modern Ofset Ba- srmevi, 1988: 228.
12. Goodman S, Gilman A: The pharmacological basis of therapeutics. New York: Macmillan Publishing Company, 1980: 1145
13. Prieto I, Cabral J, Roque J, Esperancinha FE: Capsular staining with gentian violet. XVIth Congress of the ESCRS, Nice, 1998; s:141.
14. Pessah A, Ofosu JR, Klein BL: Conjunctival staining and corneal and conjunctival abrasions caused by 2% aqueous gentian violet solution. Pediatr Emerg Care 1998; 14:
285-6.
