• Sonuç bulunamadı

KOLİN KLORİT VE ANALİZ YÖNTEMLERİ

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2022

Share "KOLİN KLORİT VE ANALİZ YÖNTEMLERİ"

Copied!
7
0
0

Yükleniyor.... (view fulltext now)

Tam metin

(1)

Sayı : 2003 / Br – 01 Sayfa : 1 – 7

KOLİN KLORİT VE ANALİZ YÖNTEMLERİ

 KONU : KOLİN KLORİT a İLGİ : KANATLI BESLEME

³ KELİMELER : • Metabolizma Fonksiyonu • İnorganik Klorit

• Organik Hidroklorit

• Reinecke Gravimetrik Tuz Yöntemi • İyon Kromotografi Yöntemi

• Avrupa ve Çin’de Uygulanan Analizlerin Kıyaslanması

KAYNAKÇA :

Tercüme: Seyfi Ay, İnterkim. World Poultry Eylül-2002 sayısından

Prof. Chang Biying ve Song Rong:Çin Ulusal Yem Analiz ve Kalite Kontrol Merkezi DingYong Sheng: Çin Bilim Enstitüsü, Biyoloji ve Çevre Araştırma Departmanı

Liew Chee Young: UCB-Asya Pasifik YAYININ KAPSAMI :

Ürün tanıtımıdır … Tercümedir ; Kişisel veya kurumsal değerlendirmedir … Derlemedir …

ÖZET :

) Bazı ülkelerde (özellikle Çin) üretilen kolin klorit ürünlerine yasal olmamasına rağmen; çok ucuz maliyetli inorganik ve organik klor tuzları katılmaktadır.

Hileli olarak üretilen bu ürünler dünya piyasasında pazarlanabilmektedir.

) İçerisine ucuz maliyetli inorganik ve organik klorit tuzları katılan kolin klorit ürünleri hileli ürünlerdir ve kullanıldığında beklenilen fayda sağlanamadığı gibi, rasyon mineral ) Hileli ve gerçek kolin klorit ürünleri Çin’de ve Çin bilim adamları tarafından

geliştirilen Reinecke Gravimetrik Tuz Analiz Yöntemi sayesinde birbirinden kolayca ayırt edilebilmektedir.

SONUÇ :

% 60’lık Kolin Klorit olarak piyasaya arz edilen Çin ve Avrupa’dan temin edilen ürünler arasında, içerik yönünden fark olabileceği ihtimalinin her zaman olası olduğu, Reinecke Gravimetrik Tuz Yöntemi ile kanıtlanmıştır.

(2)

2 KOLİN KLORİT İCERİĞİNİ TESPİTE YÖNELİK ANALİZ YÖNTEMLERİ

Chang Biying, Song Rong, Ding Yong Sheng ve Liew Chee Young*

Kolin klorit veya kimyasal tanımıyla Trimetil 2 hidroksietil amonyum klorit, optimum gelişimi temin için önemli bir yem bileşenidir.Suda çözünebilen B grubu vitaminler sınıfında tanımlanan Kolin, aşağıda sıralı metabolizma fonksiyonlarında önemli rol üstlenir:

1. Organizmadaki toplam fosfolipitlerin yaklaşık %70-80’ini temsil eder,fosfatidilkolin ve fosfokolin bileşiklerinin önemli bir elementidir.

2. Organizmada yağ transportunda önemli rol oynar ve bu rolü sayesinde karaciğerde aşırı yağ birikimini önler.Hücre zarı oluşumunda ve korunmasında önemli görev üstlenir.

3. Asetilkolin sentezinde ve sinir hücrelerine taşınmasında rol üstlenir.

4. Serbest metil gruplarının kaynağıdır ve organizmada cereyan eden bir çok biyolojik fonksiyon için gereklidir.

Doğal olarak yem hammaddelerinde belirli miktarda kolin bulunmaktadır ancak bu miktar arzu edilen düzeyde hayvan gelişimi için yetersizdir. Bu nedenle ilave olarak dışarıdan alınması gerekmektedir. Bu anlamda Kolin klorit içeren ürünler ekonomik anlamda oldukça önem kazanmıştır.

Son yıllarda Kolin klorit ürünlerinde yapılan hileler, yem endüstrisini etkilemektedir.Bunun nedenlerinden birisi Çin’de kullanılan ve Kolin tespiti açısından düşük seçiciliği(selectivity) bulunan analiz yöntemidir. Bu yöntem HG2941-1999 olarak isimlendirilmektedir. Yasadışı olmasına rağmen, Kolin klorit ürünlerine analizi olumsuz yönde etkileyen ve yanlış sonuçlara neden olan ucuz maliyetli inorganik klorit, organik hidroklorit veya diğer klor içeren maddeler katılabilmektedir.

Çin Tarım Bakanlığı ve Ulusal Yem Analiz ve Kalite Denetim Merkezi Kolin analizi için mevcut standart yöntem (HG2941-1999) yerine yeni bir yöntem uygulama konusunda mutabakat sağladı. Yemlik Kolin preparatlarının analizinde en yaygın kullanılan yöntemler;

Volhardt titrasyonu olarak ta bilinen Gümüşnitrat (AgNO3) titrasyonu, perklorik asit (Gümüş titrasyonu) yöntemi, Na-tetrafenilborat yöntemi ve tuz rengi kıyasına dayalı Reinecke yöntemidir. Volhardt ve Perklorik asit yöntemleri Choline açısından seçiciliği zayıf ve spesifik olmayan yöntemlerdir. Na-tetrafenilborat yöntemi seçicilik açısından iyi ancak üründe sodyum (Na +) ve amonyum (NH4 +) katyonlarından etkilendiği için analiz sonucuna tesir eden bir yöntemdir. Kolin seçiciliği açısından diğerlerine göre daha hassas olanı Reinecke yöntemidir. Amerika Yem Hammaddeleri Birliği (NFIA) bitkisel ürünler ve premikslerde Kolin Klorit analizi için bu yöntemi kullanmaktadır. Çin’de bu yöntem, yem premiksleri içindeki Kolin klorit tayini için ulusal standart bir yöntemdir (GB/T 17481-1998).

Ancak bu yöntem, oldukça yüksek varyasyon nedeniyle sadece ppm düzeyindeki düşük Kolin içerik tayinleri yapmaya yöneliktir. %50 ve %70 gibi yüksek konsantrasyonlar için bu yöntem güven verici değildir. Çin’de Kolin klorit tespitine yönelik daha hassas ve Reinecke Tuz Gravimetrik Metod olarak isimlendirilen yeni bir yöntem geliştirdik.Bu yöntemin yanısıra ileride oluşabilecek muhtemel hile yöntemleri de göz önünde bulundurulduğunda, bu yöntemle yapılan analizin teyidi için daha bilimsel ve hassas kromotografi yöntemini öneririz.

Bu metodların, hassasiyetini, güvenilirliğini ve istikrarını teyid için gerçek ve hileli ürünler ile bir dizi test analiz yaptık

(3)

Reinecke Tuz Gravimetrik Metodu

Renk kıyaslaması esasına dayalı Reinecke Yöntemine göre değişiklik çok fazla değildir. Bu yöntemde 70ºC’de (+/-) 3 C sabit tutulan ve ortamdaki muhtemel trimetilamin ve bazı primer ve sekonder aminleri uzaklaştırmaya yönelik, 5-6 pH ortamında ve 5 dakika kaynatılarak elde edilen 3ml NaOH içeren bir su ekstraksiyonu kullanılmaktadır.Analiz ile ilgili ayrıntılar, yetkili merciden temin edilebilir.

İyon Kromotografi; Kromotografi Tipinin Seçilmesi

Ürün içerisindeki hileli maddelerin ve safsızlıkların separasyonu (ayrılması) için iletken detektöre sahip katyon değişimli kromotograf’ın kullanılması tavsiye edilmektedir. Bu kromotografın nitelikleri aşağıdadır:

Kolon:4x250 mm Karboksilik/Fosforik asit katyon değişim reçine Tanecik Yapısı: 8.5ųm.

Kolon Sıcaklığı: 30 C

Akış: 17,5 mmol/L sülfirik asit çözeltisi Akış Hızı: 1mL/min.

Detektör: Elektrik iletkenliğe haiz detektör Separasyon Sonuçları

Şekil 1 Katyon değişim kromotografi metodu kullanılarak , Kolin klorit ürününde yaygın olarak bulanan 6 katyona ve trimetilenamin-NH4’a ait separasyon sonuçlarını göstermektedir.

(4)

4 Metodun Hassasiyeti

Hassasiyet testi için ilk önce farklı konsantrasyondaki (%75 ve %50) iki Kolin klorit ile çalıştık ve mısır koçanı taşıyıcılı ve likit formülasyonda trimetilenamin-HCL’yi sabit tuttuk.

Kolin’in geri kazanımı ve varyasyon hesaplandı. Aynı çalışmalar pirinç kavuzu, pirinç kepeği ve susuz silisik taşıyıcıya sahip Kolin klorit ürünleri için tekrarlanmıştır. Sonuçlar, farklı taşıyıcılara sahip Kolin ürünleri için bu analizin doğruluğunun oldukça yüksek olduğunu göstermiştir.( Tablo 1 )

TABLO 1 : Hassasiyet testi

Taşıyıcı Kolin klorit

Katılım oranı (%) Test

Sayısı Sonuç

(% Kolin klorit) Geri dönüşüm

(%) CV

(%)

likit 75

70 3

3 74.57

69.65 99.40

99.50 0.26

Mısır koçanı 50 5 50.42 100.8 0.74

Pirinç kavuzu 60 4 59.58 99.30 0.62

Kepek 50 5 50.02 100.0 1.20

Susuz silisik Asit

(Anhydrosus )

50 5 50.44 100.9 0.74

Laboratuar Karşılaştırma Testi

Bu metodun (Reinecke Gravimetrik Tuz Metodu) doğruluğunu teyit etmek için çeşitli testler yaptık. Bu teyid test çalışmalarında da görüldü ki yöntem oldukça hassastır. Ve bu hassasiyet CV değeri olarak %0.44 düzeyindedir.

TABLO 2 : Piyasada mevcut Kolin klorit örnek analizlerinin Reinecke Gravimetrik Tuz Yöntemine göre karşılaştırılması

Taşıyıcı K. klorit Katılım oranı (%)

Test Sayısı

Test sonuçları (% K. klorit) Merkez Yem Lab.

Geri dönüşüm (%)

Merkez Yem lab.

CV (%)

Merkez Yem lab.

Lab Pirinç

kavuzu 60 3 59.64 59.94 99.4 99.9 0.95 0.31 Buğday 60 4 60.14 60.27 100.2 100.4 0.34 0.12 Susuz silisik

asit

50 4 49.89 50.00 99.8 100.0 0.57 0.34

(5)

% 50 Kolin klorit içeren ürün her iki yöntemle analiz edilmiş ve analiz sonuçları tablo-3’te gösterilmiştir.

TABLO 3 : Reinecke Gravimetrik Tuz ve Reinecke Tuz Renk Kıyası Yöntemlerinin Karşılaştırılması

Tekerrür Reinecke Gravimetrik Tuz

(% Kolin klorit) Reinecke Tuz Renk Kıyası

(% Kolin klorit )

1 50.26 45.77

2 50.23 51.41

3 51.09 48.40

4 50.23 51.78

5 50.29 52.96

Ortalama 50.42 50.06

Ortalama Geri kazanım (%)

100.8 100.1

CV (%) 0.74 5.85

Tabloda yer alan değerlerden de anlaşıldığı üzere Gravimetrik Tuz Tayini diğer yönteme göre daha doğru ve hassastır. Bu nedenle Gravimetrik Metod Kolin klorit analizleri için daha uygundur.

Metodun Hassasiyeti ve Geri Kazanım

Saf mısır koçanı, pirinç kavuzu ve silika gibi farklı taşıyıcılı ve belirli miktar Koline klorit içeren ürünler kullandık. Ekstraksiyon, filtrasyon ve seyreltme işlemlerini müteakiben ilgili ürünler İyon Kromotografi Metodu kullanılarak analiz edildi. Sonuçlar tablo 4’te gösterilmiştir.

TABLO 4 : İyon Kromotografi Metoduyla yapılan Kolin analizleri

Taşıyıcı Kolin klorit

Katılım oranı (g)

Tekerrür Analiz içeriği (g K. Klorit )

Geri dönüşüm (%)

CV (%)

Mısır koçanı 0.246 5 0.2436 99.04 0.55

Pirinç kavuzu 0.25 6 0.2503 100.1 0.92

Buğday 0.25 5 0.2528 101.1 1.25

Silika 0.20 5 0.2048 102.4 0.81

Bu sonuçlar İyon Kromotografi Yönteminin doğruluğunu ve hassasiyetini göstermektedir. Bu hassasiyet CV (Coefficient Variation) olarak ifade edildiğinde ortalama olarak %0,88’dir.

(6)

6 Farklı Analiz Yöntemlerinin Karşılaştırılması

İyon Kromotografi ,Reineche Gravimetrik Tuz ve Perklorik Asit Yöntemlerinin karşılaştırılması için piyasadan 12 Kolin klorit numunesi topladık ve ilgili yöntemlere göre her numuneyi analiz ettik. Sonuçlar tablo-5’te gösterilmiştir.

TABLO 5 : Kolin analizinde farklı metodların karşılaştırılması

Örnek Reinecke tuzu Kolin klorit içeriği(%)

İyon kromotografisi Perklorik asit titrasyonu

1 61.37 62.19 61.92

2 50.88 50.67 50.83

3 50.84 50.79 50.06

4 50.81 50.52 -

5 50.66 49.25 52.28

6 45.90 46.16 52.63

7 46.12 44.77 49.64

8 11.69 11.84 50.05

9 9.00 8.88 55.26

10 8.74 8.37 52.98

11 0 0 67.71

12 0 0 23.6

Kaliteli Kolin klorit örnekleri için her üç analiz değerleri de birbirine yakın ve varyasyonları da %3’ten daha düşüktür. Hileli ürünler için ise(örnek 8-12) Gravimetrik Tuz ve Kromotografi yöntemlerinde birbirine oldukça yakın değerler bulunmuş ve dolayısıyla ürüne yapılan hile hakkında bilgi sahibi olunmuş ancak , Perklorik Asit yönteminde sonuç yanıltıcı olmuştur.

Avrupa Analiz Sonuçları

Belçika’da bulunan UCB laboratuarında önerilen Reinecke Gravimetrik Tuz yöntemi kullanılarak piyasadan toplanan 6 adet Kolin klorit örneği analiz edilmiş ve sonuçlar tablo- 6’da gösterilmiştir.

TABLO 6 : Avrupa analiz sonuçları

Örnek Koline klorit içeriği (%)

Volhardt Reinecke İyon kromotografi Diğer katyonlar (µg / g )

Na NH4+ K TMA Ca Mg 1 52.20 51.30 50.80 50 - 1760 370 600 180

(0.03) - (0.6) (0.06) (0.4) (0.21) 2 49.20 46.90 44.40 - - - 17135 - 285

(4.0) (0.3) 3 52.20 16.90 13.40 5400 28800 2700 22000 650 147

(3.3) (22.3) (1.0) (5.1) (0.4) (0.2) 4 56.80 5.80 6.00 48000 100 2800 - 17000 6500 (29.1) (0.1) (1.0) - (11.9) (7.5) 5 54.70 6.90 5.80 16900 - - 7500 73000 700

(10.3) - - (1.7) (51.1) (0.8) 6 58.40 24.50 24.00 41500 200 - 370 5300 -

(25.2) (0.2) - (0.08) (3.7) -

Bu tabloda yer alan sonuçlar da Kolin analiziyle ilgili yüksek seçicilik ve doğruluk açısından

Reineche Gravimetrik Tuz ve Iyon Kromotografi metodunun güvenilirliğini teyit etmektedir.

(7)

Sonuç

Ticari numunelerde Kolin klorit içeriğini hızlı ve güvenilir bir şekilde tahmin için Mohr Metodu olarak ta bilinen Volhardt Metodu uygundur. Ancak ürünün hileli olduğu (sodyum kalsiyum klorit ve benzeri tuzları içerdiğinde) durumlarda bu yöntemin uygulanması doğru değildir.Tedarikçi garantisi açısından, Kolin klorit ürünündeki Kolin klorit içeriği ile klorit içeriği arasındaki ilişkinin 1:1 verilmesi gerekir. Tedarikçi hakkında bir endişe var ise, Kolin klorit içerik tayinine yönelik analiz yapılabilir. Reinecke Gravimetrik Tuz Metodu doğru ve güvenilir bir yöntem olarak önerilmekte ve teyid analizi için de İyon Kromotografi Analizi tavsiye edilmektedir. Her iki metod ta doğru ve güvenilir yöntemlerdir ve hile olarak karıştırılan komponentleri ayırma yeteneğine haizdir. Öte yandan bu analizlerin uygulanması da kolaydır. Özellikle Reineche Gravimetrik Tuz Analizi için laboratuarın sofistike cihazlara ihtiyacı da yoktur ve bu nedenle ürün ile ilgili endişe var ise bu metodun kullanılması gerekir.

İyon Kromotografi Analizi Kolin tayini için daha spesifik bir yöntemdir ve yakın gelecekte meydana çıkabilecek muhtemel hilelere karşı kullanılabilecek bir konfirmasyon (Teyid) analizi olarak değerlendirilebilir.

Referanslar

Benzer Belgeler

Bir gazın ortalama kinetik enerjisiyle sıcaklığı arasın- da Boltzmann sabiti ile tanımlanan bir oran olduğu için geçmişte benzer bir yöntem Boltzmann sabitinin değeri- ni

Müslüman bir Türk kadını olarak yasaklanma korku­ sundan uzak, Atatürk’ ün desteğiyle, 1922’de ilk kez sahneye çıkan Muvahhit’ in öyküsü şöyle başlıyor:

ve kalk›nma-turizm etkileflim sürecinden bahsedilmifl, turizm ve sürdürülebilir kalk›nma ba¤lant›s› de¤erlendirilmifl ve ekonomik anlamda göreceli olarak az

8. Işık ve diğer fiziksel faktörler 9. Iyonların tabiatı ve yoğunluğu 10. Allosterik etki. 11. Hormonlar ve diğer

Bu çalışmada, Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi Eğitim ve Araştırma Hastanesi Kadın Hastalıkları ve Doğum Polikliniği’ne vajinal akıntı şikayeti ile

• Çöken maddeyi ortamdan alabilmek için sıvı fazın aktarılması gerekir. Aktarma ya da dökme (dekantasyon) yoluyla sıvı fazın uzaklaştırılması için çökeltinin

Filtre kağıtı kare veya yuvarlak olabilir. Tür seçildikten sonra ikiye katlanır ve huni duvarından çok uzun olmayacak şekilde işaretlenir. Sonra katlama işlemine

Su, tuzla doyurulduğu zaman uçucu yağdaki suda çözünebilen bileşikleri kendisine çekemez, uçucu yağın tamamen etere çekilmesi kolaylaşır... Farmakopelerde genellikle