A. O. Veteriner Fakültesi Bakter0'oloji ve Salgın Hastalıklar Kürsüsü Prof. Dr. Ömer Ertürk
KOYUNLARDA MYCOPLASMA AGALACTİAE'NİN
İLK İZOLASYONU ÜZERİNDE
ARAŞTffiMALAR Muzaffer Beşe*
Giriş
Mustafa Arda**
Koyun ve keçilerde bulaşıCl agalactia (Contagious agalactia) hastalığı önce i574 yılında İspanyada, daha sonra 1816 yılında İtalyada Metaxa tarafından tarif edilmiştir (17,18,19,24). Ancak ctiolojisi 1923
yılında Bridre ve Donatien'in izolasyon araştırmaları ile açıklığa ka-vuşmuş ve hastalığın, morfolojik ve kültürel karakterleri bakımından sığırlarda görülen contagious pleuropncumonia etkenine benzer bir mikroorganizma tarafından ileri geldiği bildirilmiştir (I 9,24). İki yıl son-ra bu ason-raştırıcılar kültürel ve serolojik çalışmalar ilc bu iki
mikroor-ganizmi (Mycopiasma mycoides ve Myocplasma agalactia)
birbirin-den ayırmayı başarmıştır(8).
Bugün birçok Avrupa, Kuzey Mrika, Uzak Doğu ve Amerika
ülkelerinde koyun ve keçilerde bulaşıcı agalactia, az sayıda vakalar halinde veya bu ülkelerin muayyen bölgelerinde görülmesine karşılık yaluıı doğudaözellikle Türkiye ve !randa yaygındır (5,18,20). Hastalık klinikman yurdumuzda eskidenberi"süt kesen hastalığı" diye bilin-mektedir. Özsoy (20) Yurdumuzun çeşitli bölgelerinden temin edilen süt numunelerinden M. agalactia; Arısoy ve arkadaşları (4) normal görünüşlü ve hastalıklı koyun ve keçilerin süt ve diğer exudatlarından
246 Mycoplasma suşu izole etmişlerdir. Cottew ve arkadaşları(ı i)
yurdumuzun batı bölgelerinden izole edilen 128 suşu koloni
görünüş-M. Beşe, Veteriner Fakültesi, Bakteriyoloji ve Salgın Hastalıklar Kürsüsü Doçenti,
Ankara, Türkiye.
M. Arda, Veteriner Fakülteri, Bakteriyoloji ve Salgın Hastalıklar Kürsüsü
258 Bese • Arda
lerine, morfoloji, hemoliz yapma (at, tavuk ve koyun kanında), glucose buyyonda pH deği~tirme kabiliyetlerine ve antijenik karakterlerine göre A, C ve ~ tipleri adı altında gruplandırmı~lardır. Watson ve ar-kada~ları( ıg) N tip su~ların keçilere patogen olmadığını, A tip su~ların koyun ve keçilerde, keratitis görülmeksizin tipik contagious agalactia husule getirdiğini, C tip su~lann enjeksiyon yerinde subkutan bir ödem ve nekroza sebeb olduğunu bildirmişlerdir.
Biz bu ara~tırmayı son yıllarda Ankara ve civarında çok sayıda gö-rülen bula~ıcı agalactia vakalarından ba~arılı bir M. agalactiae izo-lasyonu yapabilmek için çeşitli besiyerlerini denemek gayesile ele al-dık.
Mat e r y a
ı
ve Me t odÇalı~malarımızda kullanılan materyaller Ankaraya bağlı Bağlıca ve Çiftlik köyleri koyunlarından temin edildi.
Sütler, klinik semptom gösteren (mastitis, keratitis ve arthritis) koyunlardan elde edildi. Meme b~ları alkollü pamukla iyice silindik-ten ve birkaç damla dı~arı sağıldıktan sonra her memeden ayrı ayrı aseptik ~artlar altında tüplere alındı. Bu köylerden toplam olarak 60 süt numunesi -toplandı.
Konjuktiva sıvısı, keratitis gösteren koyunların her iki göz kor-nea ve konjunktivasına steril pamuklu ekuviyon sürü Im ek suretiyle alındı. Ekuviyonlar hemen, içinde 2 cc. VF buyyonu bulunan tüplere daldırıldı. Her iki köy den toplam olarak 25 numune temin edildi.
Eklem sıvısı, hasta koyunların ~i~miş ve hassas olan eklemlerinden steril şırınga ile çekildi ve sonra tüplere kondu. Her iki köyden 10 eklem sıvısı alındı.
Burun akıntısı; mastitis, keratitis, ekı em şi~liği ve burun akıntısı gösteren koyunlara burun içi ekuviyon tatbik ederek alındı ve ekuviyon içinde 2 cc. VF buyyonu bulunan tüpe daldırıldı. Toplam olarak 25 materyal temin edildi.
Materyaller, buz sandığı içinde laboratuvara getirildi ve besiyer-lerine inokule edilinceye kadar
+
4 oC. e muhafaza edildi.Çalı~malarımızda Viande foie (VF) besiyeri, Fransız besiyeri ve Sığır kalp infuzyonlu besiyeri kullanıldı:
Viande foie (VF) besiyeri: Barkcl' ve Fabricant (6), AI-Aubaidi ve Fabricant (2) tarafından bildirildiği gibi hazıi"landı.
Koyunlarda :\Iycoplaşma Aglactia'nın İzolasyonu 259
Fransız besiyeri: Bu besiyeri, Fransada bir biyolojik firma tara-fından M. gallisepticum antigen istihsalinde kullanılmı~ ve Frey (I5) in bildirildiği gibi hazırlanmıştır.
Casamino acids (Difco) , , .
Casitone (Difco) . Tryptone (Difco) . N eopeptone (Difco) . Yeast extract , . Glucose . NaCl . Kcl . MgS04• 7. HıO . Naı HP04 ••••••••••••••••••••••••••••••••••• KHıP04 ••••••••••••••••••••••••••••• , •••••• DPN (Cozymase) . Thiamine . Riboflavin . Caleium pantothenate . Folic asit . Choline chloride . 3.0 gr. 2.0 gr. 3.0 gr. 2.0 gr. 5.0 gr. 10.0 gr. 5.0 gr. 0.4 gr. 0.2 gr. 1.6 gr. 0.1 gr. 0.1 gr. 2.5 mgr. 2.5 mgr. 2.5 mgr. 2.5 mgr. 2.5 mgr. Yukarıda bildirilen maddeler 500 cc. suda critildi. NaOH solus-yon u (% 10) ilc pH 7.6 - 7.7 ayarlandı. Eşit miktarda steril su veya otoklavlanmış agar solusyonu, besiyerinin hazırlanması zamanında ilave edildi.
Sığır kalp infuzyonlu besiyeri: Bu besiyeri daha önce yaptığımız araştırmalarda bildirildi (3,7).
Çalışmalarımızda kullanılan bu üç ayrı besiyerinden sıvı besiyeri-ne
%
20 steril at serı.:mu, katı besiyerine%
10 at serumu ve%
10 defibrine koyun kanı ilave edildi. Ayrıca hem sıvı ve htmde katı besi-yerine thallium acetate (1: 8000) ve penicillin kris. (1000 U.1.
fcc.) ilave edildi.İzolasyon amacilc süt ve eklem sıvıları, 3 çeşit katı besiyerine öze ile; konjuktiva ve burun akıntısı, ekuviyonlar VF buyyondan çı-karıldıktan sonra, katı besiyerine sürülerek ekiidi. İnokule edilen katı besiyerleri 37°C. lik rutubetli etüve kondu ve 2. günden sonra hergün kontrol edilerek 8 gün süre ilc muayene edildi. üreme, gözle ve kola-ni mikroskopu altında tetkik edildi. Üreme görüldükten sonra, tipik PPLO kolani karakteri gösterenler agar blokları ile birlikte kendilerine ait olan sıvı besiyerlerine aktarıldı. Böylece katı besiyerlerinden sıvı
260 Dese - Arda
besiyeri kültürleri elde edildi. üreme elde edildikten sonra 0.5 cc. miktarında pasaj yapılarak kültürler idame edildi.
İzole edilen Mycoplasmaların kültürel, morfolojik özellikleri katı ve sıvı VF besiyeri ve oFransız besiyerinde incelendi. Koloni morfolo-jileri
%
20 at serumu ilave edilmiş ayni besiyerinde tetkik edildi. Kar-bonhidrat fermentasyon testi; VF buyyona%
i oranında çeşitli kar-bonhidratlar (glucose, galactose, lactose, saccharose ve maltose) ve brom thymol mavisi ilave ederek yapıldı.Hemoliz deneyi;
%
5oranında koyun at ve tavuk kanı ilave edil-miş VF agarında incelendi. Ekimler yapıldıktan sonra petri kutuları 5 gün 37cC. de tutuldu ve hemolizin varlığı gözle değerlendirildi.Diskolarasyon deneyi; Yamamoto ve Adler (23) tekniğine göre ya-pıldı ve koyun, keçi, at ve tavuk kanı kullanıldı. Denemede izole edilen Mycoplasma'ların 72 saatlik kültürleri kullanıldı.
Sonuçlar
İzolasyon maksadiyle alınan sütler, genellikle bozuk karekterde olup çokça sulu ve kirli-sarımsı renkte gran.üller ihtiva etmekte veya
tamamiyle koagule olmuş durumda idi. Bazı koyunların memeleri
sıcak ve ağrılı, çoğunlukla soğuk ve sert noduller teşekkül etmişti. Süt n.umuneleri ile VF, Fransız ve sığır kalp infuzyonlu besiyerlerinde ya-pılan i~olasyonlar Çizelge- i. de gösterildi:
Çizclge i
Sütlen İzolasyonlar
Besiyeri Muayene
i
İzolasyon sayısı İzolasyonedilen süt sa- % yısı i ---00 ---- --- ---1- ---VF besiveri 60
i
37 61.6 Fransız besiyeri 60 32 53.3Kalp infusyonlu besiyeri 60 25 41.6
Çizelge- i.den anlaşılacağı üzere en fazla izolasyon VF besiyerinde yapıldı. Bunu Fransız besiyeri ve sığır infusyonlu besiyeri takip etmek-tedir.
Konjunktiva sıvısı alınan koyunlarda bir veya iki gözde tipik keratitis ile purulcnt conjunctivitis ve bazende körlük müşahade edildi. Konjunktiva sıvısından yapılan İzolasyonlar Çizelge-2. de gösterildi. Çizclge-2. de görüldüğü gibi konjunktiva sıvısından en fazla izo-lasyon VF besiyerinde sağlandı.
Koyunlarda :\Iyeoplaşma Aglaetia'nın tzola"yonu
ÇtZELCE 2
Konjunktiva Sıvısından İzolasyonlar
261
Besiyeri Konjuktiva İzolasyon sayısı İzolasyon
sıvısı sayısı %
-- ---
---VF besiyeri 25 6
24-Fransız besiyeri 25 3 12
Kalp infiızyonlu besiyeri 25 2 8
25 burun içi sıvısından yapılan izolasyon çalışmalarında; VF besi-yerinde 7 (% 28), Fransız besibesi-yerinde 5 (% 20) ve sığır kalp infuzyonlu besiyerinde 3 (%
ı
2) Mycoplasma suşu izole edildi.ı
o
eklem sıvısı numunesinden 2 M ycoplasma suşu, VF ve Fransız besiyerinde izole edildi. Buna mukabil sığır kalp infuzyonlu besiyerin-de izolasyon yapılamadı.tdendifikasyon Çalışınaları
Çeşitli materyallerden izole edilen
ıo
Mycoplasma suşu (sütten 6, konjunktiva sıvısından 2, burun akıntısındanı
ve eklem sıvısındanı)
identifikasyon çalışmalarında kullanıldı.Serumlu agarda: !zole edilen Mycoplasma suşları, serumlu VF ve Fransız besiyerinde; kenarları düzgün, yuvarlak, konveks, parlak ve ortaları düğmeli kolaniler meydana getirmektedir. Çapları ıhafta sonra 0.5 mm. ye ulaşmakta, seyrek düşen kolonilerde çap, diğerlerine nazaran biraz daha büyük olmaktadır..
Kanlı agarda:Çcşitli hayvanların (koyun, keçi, at ve tavuk) kanlarını ihtiva eden kanlı agarda bu Mycoplasma suşları, dar bir hemoliz sa-hası meydana getirerek üremektedir. Hemolizden ötürü kanlı agardaki üremc, serumlu agardaki üremeden daha erken teşhis edilmektedir ve koloniler daha iyi geli~mektedir. Hemoliz daha ziyade alfa hemoliz karekterlerj taşımaktadır.
Sıvı besiyerinde üreme: Mycoplasma suşları, sıvı besiyerinde 2. günden sonra kuvvetlice belli olan homogen bir üreme meydana ge-tirmekte ve bir hafta sonra tüpün dibinde çok az bir tortu teşekkül etmektedir. Sıvı besiyerinde üreme, VF besiyerinde 36. saatte iyice bel-li olmakta, Fransız ve sığır kalp infuzyonlu besiyerinde ancak 2 gün sonra fark edilmektedir.
Sıvı besiyerinde üretilen Mycoplasma'ların Giemsa preparasyon-larında genellikle hücreler, daha ziyade nokta şeklinde ve arasırada halka formları halinde görüldü.
262
Karbonhidrat jermentasyonu testi: İzole ettiğimiz 10 M ycoplas-ma suşu ile yapılan muayenelerde, suşların hiçbirisi kullanılan kar-bonhidratları fermente etmemiştir.
Diskolarasyon testi: 10 Mycoplasma suşunun hiçbirisi koyun, keçi, at ve tavuk kanını diskolore etmemiştir.
Tartışma
Edward (I2) PPLO grubu mikroorganizmaların güçlükle üretil-diğini, genel besiyerlerinde bazı modifikasyoların yapılması gerektiğini tavsiye etmiştir. Son yıllarda birçok araştırıcı, çeşitli orijinli (İnsan, hayvan ve kanatlı) Mycoplasmaların izolasyonu için değişik tip besi-yerleri bildirmişlerdir. Smith ve Morton (21) PPLO"lann üremeleri için çeşitli serum kullarulmasını ve serumdaki üreme faktörüne ihtiyaç olduğunu, keza bir lipoprotein olan bu serum faktörü yerine cholos-teryl laurate, lecithin kullanılabileceğini; Edward ve Fitzgerald (13) temel besiyerinde cholesterol, cholestaol ve Stigmasterol'ün üremeyi artırdığını; Grumbles ve arkdaşları (16) serum yerine serum fraksiyo-dan istifade edilebileceğini; Adlcr ve Yamamoto (I) besiyerinde maya preparasyonlarının değer taşıdığını; Chalquest ve Fabricant (ıo) ve Chalqucst (g) micrococcal koloniler tarafından sağlanan üreme fak-faktörü yerine diphosphopyridine nucleotide (DPN) ve L- Cysteine'nin kullanılabileceğini bildirmişlerdir. Freund (14) her mycoplasma nev'i veya suşunun maksimal üremesi için tck bir besiyerinin tavsiye edile-miyeceğini açıklamıştır.
Biz, çeşitli orijinli Mycoplasma'ların izolasyonu için son yıllarda fazlaca kullanılan VF, Sığır kalp infuzyonlu ve Fransız besiyerlerinde, bulaşıcı agalactia'lı koyunlardan Mycoplasma agalactiae izolasyonunu araştırdık. Çeşitli matryal (süt, konjunktiva sıvısı, burun için sıvısı ve eklem sıvısı) ile yapılan mukayeseli çalışmalarımızda, en fazla izolas-yonu VF besiyeri ilc elde ettik. Bunu takiben sırasile Fransız ve sığır kalp infuzyonlu besiyerinde de başarılı izolasyonlar sağlandı. Hatta, bazı vakalarda aynı materyalden VF besiyerinde izolasyon yapılama-mamasına karşılık, bazen Fransız besiyerinde ve bazende Sığır kalp infuzyonlu besiyerinde başarılı izolasyonlar yapılmıştır. Bu durum, Freund (14) ve AI-Aulaidi ve Fabricant (2) ında belirttiği gibi, çeşitli orijinli PPLO grubu mikroorganizmaların ilk izolasyonu için kullanı-lacak besiyederi üzerinde daha geniş araştırmaların yapılması gerek-tiğ!ni göstermektedir.
Yurdumuzda Arısoy ve arkadaşları (4) ve Cottew ve arkadaşları (I r) sağlam ve bulaşıcı agalactia'lı sürülerdeki koyun ve keçilerden
Koyunlarda MyeoplRşrna AlIlaetia'nın İzolasyonu 263
izole ettikleri su~ları kültürel, serolojik, patogenite ve kısmen serolojik karakterlerine göre, A, C ve N tipleri halinde kla~ifiye etmi~lerdir. Bula~ıcı agalactia'lı koyunlardan izole ettiğimiz
ı
o
M ycoplasma su~u, morfolojik, kültürel ve biyokimyasal özelliklerine göre Mycoplasmaagalactiae olarak identifiye edildi. \
Özet
ı
968 yılı, yaz aylarında Ankara köylerinde (bilhassa Bağlıca ve Çiftlik köyleri) koyunlarında mastitis, keratitis, iritis, purulent con-junctivitis ve arthritis semptomları ilc seyreden bir bula~ıcı agalactiasalgını mü~ahade edildi.
Bu ara~tırmada, bula~ıcı agalactia'nın birçok klinik semptomlarını gösteren hayvanlardan Mycoplasmaların ilk izolasyonu için Viande foie (VF), Fransız ve Sığır kalp infuzyonlu besiyerleri kullanıldı.
Bu çalı~manın sonuçlarına göre: koyunlardan Mycoplasma orga-nizmalarının ilk izolasyonu, VF besiyerinden daha ba~arılı olarak ya-pıldı. Mamafih Fransız besiyeri, hemen hemen VF besiyeri kadar iyi ,
sonuç verdi.
Bu araştırmada izole edilen
ı
o
M ycoplasma organizmi; morfolo-jik, kültürel ve biyokimyas~l karakterlerine göre Mycoplasmaagalac-olarak identifiye edildi.
Sunınıary
Studies on the primary isolation of Mycoplasma agalactiae from sheep.
An outbreak contagious agalactia occurred among sheep in Anka-ra during the summer season in
ı
968.In this study, Viande foie (VF) medium, French medium and
ox heart infıısion medium were used for the primary isolation ofmycop-lasmas from animals showing various clinical 'signs of contagious agalactia. These three media were supplemented with
ı
o
percent sheep blood,ı
o
percent hors serum, penicillin(ı
000 units per ml) and thal-lium aeetate (i: 8000).Samples were eollected from ab normal milk, eye discharges, nasal discharges and synovial fluid.
Each specimen was streaked on plates of solid media. The plates were incubated at 37°C. for 8 days. All plates were examined at 2, 4, 6 and 8 days under dissecting microscope. Mycoplasma colonies werc
264 Bese - Arda
removed by cutting blocks of agar. They transferred in broth
cor-responding to the medium which was enriched wİth only 20
per-cent horse serum. The transferred liquid medium was incubated for 3 days then examined for growth on agar corresponding to the medi-um which was enriched with only 20 percent horse serum.
Of the 60 abnormal milk samples, 37 (6 i. 6
%)
isolates were ob-tained on the VF medium, 32 (53.3 %) isolates on the French medium and 25 (41.6% )
isolates on the ox heart infussion medium.Of the 25eye discharge samples, 6 (24 %) İsolates were obtained on the VF medium, 3 (I 2
% )
isolates on the French medİum and 2 (8 %) isolates on the ox heart infusion medium.Of the 25nasal discharge samples, 7(28
% )
isolates were obtainedon the VF medium, 5(20 %) isolates on the French medium and 3
(12 %) isolates on the ox heart infusion medium.
Of the iO synovial fluid samples, 2 isolates were obtained on the
VF Medium and on the French medium. No Mycoplasma İsolation
was made on the ox heart infusİon medium.
The results of this study indicate that the primary isolation of Mycoplasma organisms from sheep with clinical signs of contagious agalactia is most successfuııy accomplished by cultuvation on the Viande foie (VF)medium. However, the French medium appeared to be al most as good as the VF medium for the primary isolation of mycoplasma.
The morphological, culturcl and biochemical studies were made on the LO representative isolates (6 isolates from abnormal milk, 2 İsolates from eye discharges, i isoiate from nasal discharges and i iso-Iate from synovial fluids). They were identified as Mycoplasma aga-Iactiae.
Literatür
1- Adler, H. E., and Yamamoto, M. A. 1956. Preparation
if
new pleuropneumolZia - !ike organism antigen for the diagnosis of chronic res-piratory disease by agglutination test. Am.J.
Vet. Res., 63, 290 - 293 2- AI - Aubidi,J.
M., and Fabricant,J.
1968. Technics for the iso-lation of Mycoplasma from caltle. Corneıı Vet., 58, 555 - 57 i. 3- Arda, M. 1968. Keçi ve kanatlı orijinli Pleuropneumonia - likeorga-nizmaların genel karakterleri ile, üreme - inhibisyon, presipitasyon, aglu-tinasyon ve indirekt hemagluaglu-tinasyonla idantifikasyonları. A.Ü.Veterİner Fakültesi yayınları, 229. çalı~malar, 131. Ankara.
Koyunlarda Mycaplaşma A~lactia'nın İzolasyalltı 26:;
4- Arısoy, F., Erdağ, O., Cottew, G.S., ve Watson, W. A. 1967. Investigations into contagious agalactia of sheep and goats in Turkey.
Türk Vet. Hekim. Dem. Derg., 37, II - 17.
5- Baharsefat, M., and Yaınini, B. i968. Animal Mycoplasmosis
in iran. Areh. Inst. Razi. 20, 39 - 42.
6- Barker, T. L., and Fabricant, J. 1962. Primary isolation of My-coplasma organismas (PPLO) from mammalian sources.
J.
Baet., 83,1268 - 1273..
7- Beşe, M. 1963. Keçi ciğerağrısı hastalık etkeninin (Mycoplasma My-coides var. capri) izolasyonu: Biyolojik, biyoşimik ve serolojik özellikleri.
A. Ü. Veteriner Fakültesi yayınlan, i55 çalı~malar, 93. Ankara.
8- Bridıre,
J.,
et Donaden, A. i925. Le tnicrobe de l' agalaxie conta-gieuse du mouton et de la chevre. Ann. Inst. Pasteur. 39, 925 - 95 i. 9- Chalquest, R. R. 1962. Cultivation of infectious Synovitis - typepleuropneumonia - like organisms. Avian Dis., 6, 36 - 43.
10- Chalquest, R. Ro, and Fabricant, 1960. Pleuropneumonia - like organisms associated with synovitis infowls. Avian Dis., 4,515 - 539. 11- Cottew, G. So, Watson, W. A., Arısoy, F. Erdağ, O., and Buc-ley, L. S. 1968. Differentiation of Mycoplasma agalactiae from other mycoplasmas of sheep and goats.
J.
eomp. Path., 78, 275 - 282.12- Edward, D. G. i9540 The pleuropneumonia gruop of organism:
A review, together with some new observations.
J.
gen. MierobioL.,10, 27-64.
13- Edward, D. G., and Fitzgerald, W. A. i95
ı.
Cholosterol in the growth of organism of pleuropneumonia group.J.
gen. MierobioL.,5, 576-586.
14- Freuınd, E. A. 1967. Problems of morphology and ultrastructure: An introduction. Ann. N. Y. Aead. Sei., 143, 48-49.
15- Frey, M. L. i966. The isolation and characterization of mycoplasmas from turkeys. Ph. D. thesis. Univ. of Wiseonsin. Dept. of
Veteri-nary Seieneeo
16- Grwnbles, L. C., Philips, E., Boney, W. A.Jr., and Delapıane,
J.
P. 1953. Cultural and biochemical characteristic of the agent causing infectious sinusitis of turkeys and chronic respiratory disease of chickens.Sou th western Vet., 6, 166 - 168.
i7- Hudson, J. R., Cottew, G. S., and Adler, H. E. 1967. Diseases of goats caused by mycoplasma: A review of the subject with some new findingj'. Ann. N. Y. Aead. Sei., 143, 287 - 297.
266 Bese - Arda
18- KIieneberger ~ Nobel, E. 1962. Pleuropneumonia - like organism~ (PPLO) Myeoplasmataeeae. Aeademie Press. London and New york.
19- Kujumgiev, I. 1959. ,(uraetiologie der inJectiö'senagalactie der schofe und ziegen. ZbI. Vet. Med., 6, 37-45.
20- Özsoy, A. i96 i. Koyun ve keçilerin bulaşıcı agalaksisi'ne karşı hazır-lanan üç muhtelif aşı ve bunların birbiriyle mukayeseleri. Etlik V ct. Bakt. Enst. Derg. I, 267-286.
21- Smith, P. F., and Morton, H. E. 1951. The separation and cha-racterization
OJ
the growth Jactor in serum and ascitis Jluid which is req-uired by certain pleuropneumonia-like organisms.J.
Baet., 6 I, 395 - 405.22- Watson, W. A., Cottew, G. S., Erdağ, O., and Ansoy, F.
1968. The pathogenicity J Mycoplasma organisms isolatedfrom sheep and goats in Türkq.
J.
eomp. Path. 78, 283 - 29 i.23- Yamamoto, R., and Adler, H. E .
.ı
958.CharacterizationOJ
pleu-.ropneumonia - like organisms oj avian origilZ. II. Cultural, biochemical, morphological aiıdJurther serological studies.J.
Infeet. Dis. 102, 243-250 24- Zavagli, V. i95 i. L' agalaxie contagieuse des brebis et des chevres.BulI. Off. İnt. Epiz., 36, 336 - 362.
