• Sonuç bulunamadı

Analitik Yöntemlerin Validasyonu

Belgede Zerrin SEZGİN BAYINDIR (sayfa 123-134)

3. BULGULAR

3.1. Paklitaksel Üzerinde Yapılan Çalışmalara Ait Bulgular

3.1.8. Analitik Yöntemlerin Validasyonu

Doğrusallık ve aralığı

PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarındaki miktar tayini yönteminin doğrusallık ve aralığı Bölüm 2.2.8’de belirtildiği şekilde tayin edilmiştir.

Elde edilen kalibrasyonların doğrusallık ve aralığı ile kalibrasyon doğrusuna ait istatistiksel veriler Çizelge 3.5’de verilmiştir.

Doğruluk ve Geri Elde

PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarındaki miktar tayini yönteminin doğruluk ve geri elde çalışması Bölüm 2.2.8’de belirtildiği şekilde tayin edilmiştir. PCT’nin belirtilen ortamlarda yapılan miktar tayini yönteminin analitik validasyonundan elde edilen doğruluk ve geri elde sonuçları Çizelge 3.6, Çizelge 3.7, Çizelge 3.8 ve Çizelge 3.9’da verilmiştir.

Çizelge 3.5. PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarındaki kalibrasyonlarının doğrusallık ve aralığı ile kalibrasyon doğrusuna ait istatistiksel veriler.

Metanol ortamı

PBS-Tw ortamı

SGF-Tw

ortamı Plazma Doğrusallık ve Aralığı 0,25-20 µg/ml 0,05-6 µg/ml 0,05-1 µg/ml 0,04-0,6 µg/ml

Eğim 40,58 78,64 79,37 0,8334

Eğimin % 95 Güven Aralığı

Alt Sınır:

40,48 Üst Sınır:

40,67

Alt Sınır:

78,17 Üst Sınır:

79,10

Alt Sınır:

78,91 Üst Sınır:

79,84

Alt Sınır:

0,7400 Üst Sınır:

0,9270 Eğimin Önemlilik Değeri <0,001 <0,001 <0,001 <0,001

Kesişim -3,364 -1,373 -0,6725 0,08580

Kesişimin % 95 Güven Aralığı

Alt Sınır:

-4,386 Üst Sınır:

-2,343

Alt Sınır:

-2,468 Üst Sınır:

-0,278

Alt Sınır:

-0,9330 Üst Sınır:

-0,4120

Alt Sınır:

0,0530 Üst Sınır:

0,1190 Determinasyon Katsayısı

(r2) 1 0,9999 1 0,9905

Çizelge 3.6. PCT’nin metanol ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen doğruluk ve geri elde sonuçları.

1.Konsantrasyon (1 μg/ml)

2.Konsantrasyon (10 μg/ml)

3.Konsantrasyon (17,5 μg/ml) Alan C

(μg/ml)

% Geri

Elde Alan C (μg/ml)

% Geri

Elde Alan C (μg/ml)

% Geri Elde 38,10 1,022 102,2 403,0 10,01 100,1 712,8 17,65 100,9 37,60 1,010 101,0 403,3 10,02 100,2 712,8 17,65 100,9 37,90 1,017 101,7 402,9 10,01 100,1 712,3 17,64 100,8 38,10 1,022 102,2 405,7 10,08 100,8 712,6 17,64 100,8 37,80 1,014 101,4 405,5 10,08 100,8 712,2 17,63 100,7 37,80 1,014 101,4 402,5 10,00 100,0 712,3 17,64 100,8

Ortalama 101,7 Ortalama 100,3 Ortalama 100,8

SS 0,481 SS 0,3670 SS 0,07528

% BSS 0,473 % BSS 0,3660 % BSS 0,07467

Çizelge 3.7. PCT’nin PBS-Tw ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen doğruluk ve geri elde sonuçları.

1.Konsantrasyon (0,25 μg/ml)

2.Konsantrasyon (1 μg/ml)

3.Konsantrasyon (4 μg/ml) Alan C

(μg/ml)

% Geri

Elde Alan C (μg/ml)

% Geri

Elde Alan C (μg/ml)

% Geri Elde 18,40 0,2515 100,6 77,90 1,008 100,8 313,1 3,999 100,0 18,10 0,2476 99,06 77,80 1,007 100,7 313,4 4,003 100,1 18,40 0,2515 100,6 77,70 1,006 100,6 312,9 3,997 99,9 18,80 0,2565 102,6 77,90 1,008 100,8 314,0 4,011 100,3 18,90 0,2578 103,1 77,70 1,006 100,6 314,0 4,011 100,3 18,80 0,2565 102,6 78,20 1,012 101,2 313,2 4,000 100,0

Ortalama 101,4 Ortalama 100,8 Ortalama 100,1

SS 1,583 SS 0,2229 SS 0,1673

% BSS 1,560 % BSS 0,2211 % BSS 0,1672

Çizelge 3.8. PCT’nin SGF-Tw ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen doğruluk ve geri elde sonuçları.

1.Konsantrasyon (0,2 μg/ml)

2.Konsantrasyon (0,6 μg/ml)

3.Konsantrasyon (1μg/ml) Alan C

(μg/ml)

% Geri

Elde Alan C (μg/ml)

% Geri

Elde Alan C (μg/ml)

% Geri Elde 15,30 0,2012 100,6 46,60 0,5956 99,26 78,60 0,9988 99,88 15,30 0,2012 100,6 47,40 0,6057 100,9 79,40 1,009 100,9 15,00 0,1975 98,73 47,00 0,6006 100,1 79,70 1,013 101,3 15,00 0,1975 98,73 47,00 0,6006 100,1 79,00 1,004 100,4 15,10 0,1987 99,36 47,00 0,6006 100,1 80,10 1,018 101,8 14,70 0,1937 96,84 46,50 0,5943 99,05 79,20 1,006 100,6

Ortalama 99,14 Ortalama 99,92 Ortalama 100,8

SS 1,410 SS 0,6708 SS 0,6790

% BSS 1,422 % BSS 0,6714 % BSS 0,6735

Çizelge 3.9. PCT’nin plazmada yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen doğruluk ve geri elde sonuçları.

1.Konsantrasyon (0,1 μg/ml)

2.Konsantrasyon (0,2 μg/ml)

3.Konsantrasyon (0,5 μg/ml) Alan

PCT/ Alan

DCT

C (μg/ml)

% Geri Elde

Alan

PCT/ Alan

DCT

C (μg/ml)

% Geri Elde

Alan

PCT/ Alan

DCT

C (μg/ml)

% Geri Elde 0,1676 0,09810 98,10 0,2594 0,2083 104,1 0,4971 0,4936 98,71 0,1703 0,1014 101,4 0,2520 0,1994 99,71 0,5107 0,5099 102,0 0,1700 0,1011 101,1 0,2541 0,2020 101,0 0,5116 0,5109 102,2 0,1701 0,1011 101,1 0,2573 0,2058 102,9 0,5052 0,5032 100,6 0,1707 0,1019 101,9 0,2555 0,2037 101,8 0,4921 0,4875 97,50 0,1676 0,09819 98,19 0,2554 0,2035 101,7 0,5048 0,5028 100,6

Ortalama 100,3 Ortalama 101,9 Ortalama 100,3

SS 1,694 SS 1,516 SS 1,846

% BSS 1,689 % BSS 1,488 % BSS 1,841

Kesinlik

PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarındaki miktar tayini yönteminin kesinlik çalışmasında Bölüm 2.2.8’de belirtildiği şekilde yöntemlerin tekrarlanabilirliği ile farklı günlerdeki ve farklı analistlere ait ara kesinliği tayin edilmiştir. PCT’nin belirtilen ortamlarda yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen tekrarlanabilirlik çalışmasına ait sonuçlar Çizelge 3.10, Çizelge 3.11, Çizelge 3.12 ve Çizelge 3.13’de verilmiştir.

Çizelge 3.10. PCT’nin metanol ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen tekrarlanabilirlik sonuçları.

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

1 0,9183 10 9,980 17,5 17,60

1 0,9282 10 9,982 17,5 17,60

1 0,9331 10 9,977 17,5 17,59

1 0,9183 10 9,977 17,5 17,60

1 0,9282 10 9,980 17,5 17,61

1 0,9307 10 10,01 17,5 17,60

Ortalama 0,9261 Ortalama 9,984 Ortalama 17,60

SS 0,006335 SS 0,01272 SS 0,006325

% BSS 0,6840 % BSS 0,1274 % BSS 0,03594

Çizelge 3.11. PCT’nin PBS-Tw ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen tekrarlanabilirlik sonuçları.

Çizelge 3.12. PCT’nin SGF-Tw ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen tekrarlanabilirlik sonuçları.

Çizelge 3.13. PCT’nin plazmada yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen tekrarlanabilirlik sonuçları.

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

0,25 0,2565 1 1,006 4 3,999

0,25 0,2578 1 0,9980 4 4,003

0,25 0,2565 1 1,003 4 3,997

0,25 0,2604 1 1,008 4 4,006

0,25 0,2591 1 1,006 4 3,990

0,25 0,2578 1 1,003 4 4,011

Ortalama 0,2580 Ortalama 1,004 Ortalama 4,001 SS 15,20x10-4 SS 35,21x10-4 SS 73,48x10-4

% BSS 0,5890 % BSS 0,3507 % BSS 0,1837

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

0,2 0,2012 0,6 0,5994 1 1,013

0,2 0,1975 0,6 0,6069 1 0,9988

0,2 0,2090 0,6 0,5981 1 1,009

0,2 0,2012 0,6 0,6019 1 0,9899

0,2 0,2000 0,6 0,5918 1 1,009

0,2 0,1940 0,6 0,5943 1 1,009

Ortalama 0,2005 Ortalama 0,5987 Ortalama 1,005

SS 0,004995 SS 0,005391 SS 0,008697

% BSS 2,491 % BSS 0,9003 % BSS 0,8655

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

Teorik C (μg/ml)

Pratik C (μg/ml)

0,1 0,1019 0,2 0,2036 0,5 0,4929

0,1 0,09918 0,2 0,1989 0,5 0,4960

0,1 0,1011 0,2 0,2014 0,5 0,5108

0,1 0,1004 0,2 0,2032 0,5 0,4960

0,1 0,1019 0,2 0,1998 0,5 0,5024

0,1 0,09819 0,2 0,1975 0,5 0,5028

Ortalama 0,1004 Ortalama 0,2007 Ortalama 0,5002

SS 0,001507 SS 0,002426 SS 0,006519

% BSS 1,500 % BSS 1,209 % BSS 1,304

PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarında yapılan miktar tayininden elde edilen farklı günlerdeki ara kesinlik çalışmasına ait sonuçlar Çizelge 3.14, Çizelge 3.15, Çizelge 3.16 ve Çizelge 3.17’de verilmiştir.

Çizelge 3.14. PCT’nin metanol ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen farklı günlerdeki ara kesinlik sonuçları.

1. Konsantrasyon: 1 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) 34,70 0,9381 34,50 0,9331 34,50 0,9331 34,30 0,9282 34,50 0,9331 34,30 0,9282 34,60 0,9356 34,50 0,9331 34,50 0,9331 34,50 0,9331 34,40 0,9307 34,30 0,9282 34,70 0,9381 34,30 0,9282 34,60 0,9356 34,60 0,9356 34,70 0,9381 34,70 0,9381 Ortalama 0,9348 Ortalama 0,9327 Ortalama 0,9327

SS 0,003728 SS 0,003283 SS 0,003960

% BSS 0,3989 % BSS 0,3520 % BSS 0,4245 2. Konsantrasyon: 10 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

401,9 9,987 401,8 9,985 400,5 9,953

401,5 9,977 401,0 9,965 402,1 9,992

402,0 9,990 401,7 9,982 403,4 10,02

403,6 10,03 401,6 9,980 401,6 9,980

402,8 10,01 401,7 9,982 403,9 10,04

402,8 10,01 401,5 9,977 401,8 9,985

Ortalama 10,00 Ortalama 9,979 Ortalama 9,995

SS 0,01947 SS 0,007120 SS 0,03082

% BSS 0,1947 % BSS 0,07136 % BSS 0,3083 3. Konsantrasyon: 17,5 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

712,1 17,63 711,9 17,63 709,5 17,57

711,2 17,61 711,2 17,61 710,2 17,59

710,7 17,60 710,4 17,59 711,3 17,61

711,9 17,63 710,7 17,60 711,3 17,61

712,6 17,64 710,9 17,60 711,0 17,61

712,2 17,63 710,4 17,59 705,6 17,47

Ortalama 17,62 Ortalama 17,60 Ortalama 17,58

SS 0,01506 SS 0,01506 SS 0,05465

% BSS 0,08543 % BSS 0,08553 % BSS 0,3109

Çizelge 3.15. PCT’nin PBS-Tw ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen farklı günlerdeki ara kesinlik sonuçları.

1. Konsantrasyon: 0,25 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

18,8 0,2565 18,8 0,2565 18,7 0,2553

18,9 0,2578 18,8 0,2565 18,5 0,2527

18,8 0,2565 18,9 0,2578 18,9 0,2489

19,1 0,2604 18,8 0,2565 19,0 0,2489

19,0 0,2591 18,8 0,2565 18,7 0,2553

18,9 0,2578 19,1 0,2604 18,7 0,2553

Ortalama 0,2580 Ortalama 0,2574 Ortalama 0,2527

SS 0,001520 SS 0,001574 SS 0,003135

% BSS 0,5890 % BSS 0,6117 % BSS 1,241

2. Konsantrasyon: 1 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

77,2 0,9992 77,5 1,003 76,5 0,9903

76,5 0,9903 77,1 0,9979 77,1 0,9979

77,7 1,006 77,5 1,003 77,5 1,003

77,9 1,008 76,7 0,9929 76,7 0,9929

77,7 1,006 77,4 1,002 77,8 1,007

78,2 1,012 77,2 0,9992 77,9 1,008

Ortalama 1,004 Ortalama 0,9997 Ortalama 0,9999

SS 0,007716 SS 0,003919 SS 0,007359

% BSS 0,7689 % BSS 0,3920 % BSS 0,7360 3. Konsantrasyon: 4 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

313,1 3,999 313,6 4,006 313,2 4,000

313,4 4,003 314,0 4,011 314,0 4,011

312,9 3,997 312,8 3,995 312,8 3,995

314,0 4,011 313,1 3,999 312,6 3,993

314,0 4,011 312,4 3,990 312,3 3,989

313,2 4,000 312,3 3,989 314,3 4,014

Ortalama 4,004 Ortalama 3,998 Ortalama 4,000

SS 0,006124 SS 0,008802 SS 0,01011

% BSS 0,1530 % BSS 0,2201 % BSS 0,2528

Çizelge 3.16. PCT’nin SGF-Tw ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen farklı günlerdeki ara kesinlik sonuçları.

1. Konsantrasyon: 0,2 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

15,3 0,2012 15,2 0,2000 14,8 0,1949

14,9 0,1962 15,1 0,1987 15,1 0,1987

15,0 0,1975 15,2 0,2000 14,9 0,1962

15,1 0,1987 15,3 0,2012 15,0 0,1975

14,8 0,1949 15,3 0,2012 15,1 0,1987

15,0 0,1975 15,9 0,2088 14,7 0,1937

Ortalama 0,1977 Ortalama 0,2017 Ortalama 0,1966

SS 0,002164 SS 0,003624 SS 0,002054

% BSS 1,095 % BSS 1,094 % BSS 1,045

2. Konsantrasyon: 0,6 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

47,5 0,6069 46,7 0,5968 46,5 0,5943

47,1 0,6019 45,6 0,5830 46,3 0,5918

46,9 0,5994 46,5 0,5943 46,6 0,5956

46,9 0,5994 46,6 0,5956 47,0 0,6006

46,3 0,5918 47,4 0,6057 47,0 0,6006

46,8 0,5981 47,0 0,6006 46,4 0,5931

Ortalama 0,5996 Ortalama 0,5960 Ortalama 0,5960

SS 0,004935 SS 0,007589 SS 0,003779

% BSS 0,8230 % BSS 1,273 % BSS 0,6341

3. Konsantrasyon: 1 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

80,6 1,024 77,9 0,9899 78,6 0,9988

80,4 1,021 77,7 0,9874 79,4 1,009

79,7 1,013 79,9 1,015 79,7 1,013

79,6 1,011 78,6 0,9988 79,0 1,004

79,4 1,009 79,4 1,009 80,1 1,018

79,4 1,009 79,7 1,013 79,2 1,006

Ortalama 1,015 Ortalama 1,002 Ortalama 1,008

SS 0,006442 SS 0,01191 SS 0,006790

% BSS 0,6350 % BSS 1,188 % BSS 0,6735

Çizelge 3.17. PCT’nin plazmada yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen farklı günlerdeki ara kesinlik sonuçları.

1. Konsantrasyon: 0,1 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan PCT/ Alan DCT

C (μg/ml) Alan PCT/ Alan DCT

C (μg/ml) Alan PCT/ Alan DCT

C (μg/ml) 0,1676 0,09810 0,1695 0,1004 0,1706 0,1018 0,1703 0,1014 0,1708 0,1020 0,1679 0,09847 0,1700 0,1011 0,1685 0,09918 0,1706 0,1017 0,1701 0,1011 0,1695 0,1005 0,1691 0,1000 0,1707 0,1019 0,1688 0,09965 0,1687 0,09943 0,1676 0,09819 0,1694 0,1003 0,1721 0,1035 Ortalama 0,1003 Ortalama 0,1004 Ortalama 0,1008

SS 0,001694 SS 0,0009600 SS 0,001846

% BSS 1,689 % BSS 0,9568 % BSS 1,831

2. Konsantrasyon: 0,2 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan PCT/

Alan DCT C (μg/ml) Alan PCT/

Alan DCT C (μg/ml) Alan PCT/

Alan DCT C (μg/ml) 0,2524 0,1999 0,2537 0,2014 0,2551 0,2032 0,2516 0,1989 0,2548 0,2027 0,2510 0,1983 0,2504 0,1975 0,2530 0,2006 0,2555 0,2036 0,2554 0,2035 0,2494 0,1963 0,2515 0,1988 0,2522 0,1997 0,2590 0,2078 0,2546 0,2025 0,2581 0,2068 0,2558 0,2040 0,2566 0,2049 Ortalama 0,2011 Ortalama 0,2021 Ortalama 0,2019

SS 0,003448 SS 0,003817 SS 0,002702

% BSS 1,715 % BSS 1,888 % BSS 1,339

3. Konsantrasyon: 0,5 μg/ml

1. Gün 2.Gün 3.Gün

Alan PCT/ Alan DCT

C (μg/ml) Alan PCT/ Alan DCT

C (μg/ml) Alan PCT/ Alan DCT

C (μg/ml) 0,4971 0,4936 0,4995 0,4965 0,5005 0,4976 0,5107 0,5099 0,5076 0,5061 0,5056 0,5038 0,5116 0,5109 0,4992 0,4960 0,4953 0,4913 0,5052 0,5032 0,4980 0,4946 0,5027 0,5003 0,4921 0,4875 0,4966 0,4929 0,5106 0,5098 0,5048 0,5028 0,5045 0,5024 0,5042 0,5021 Ortalama 0,5013 Ortalama 0,4981 Ortalama 0,5008

SS 0,009184 SS 0,005074 SS 0,00620

% BSS 1,832 % BSS 1,019 % BSS 1,239

Farklı günlerdeki ara kesinliği göstermek amacıyla 3 farklı konsantrasyona ait ölçüm sonuçlarının ortalamaları arasında 1., 2. ve 3. günlerde anlamlı farklılıklar olup olmadığını göstermek amacıyla uygulanan tek yönlü ANOVA testinde günlerarası fark tüm kalibrasyon ortamları için önemsiz çıkmıştır (p>0,05).

PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen farklı analistlere ait ara kesinlik çalışmasına ait sonuçlar Çizelge 3.18, Çizelge 3.19 ve Çizelge 3.20’de verilmiştir.

Çizelge 3.18. PCT’nin metanol ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen farklı analistlere ait ara kesinlik sonuçları.

Konsantrasyon: 1,000 μg/ml 1. Analist 2. Analist Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

34,7 0,9381 35,2 0,9504

34,3 0,9282 34,9 0,9430

34,6 0,9356 35,3 0,9528

34,5 0,9331 34,4 0,9307

34,7 0,9381 34,2 0,9257

34,6 0,9356 34,4 0,9307

Ortalama 0,9348 Ortalama 0,9389

SS 0,003728 SS 0,01141

% BSS 0,3989 % BSS 1,215

Çizelge 3.19. PCT’nin PBS-Tw ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen farklı analistlere ait ara kesinlik sonuçları.

Konsantrasyon: 1,000 μg/ml 1. Analist 2. Analist Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

78,1 1,011 78,1 1,011

77,7 1,006 78,1 1,011

78,3 1,013 77,7 1,006

78,2 1,012 77,6 1,004

78,8 1,020 77,7 1,006

77,9 1,008 78,0 1,009

Ortalama 1,012 Ortalama 1,008

SS 0,004844 SS 0,002927

% BSS 0,4788 % BSS 0,2904

Çizelge 3.20. PCT’nin SGF-Tw ortamında yapılan miktar tayininin analitik validasyonundan elde edilen farklı analistlere ait ara kesinlik sonuçları.

Konsantrasyon: 0,6 μg/ml 1. Analist 2. Analist Alan C (μg/ml) Alan C (μg/ml)

46,6 0,5956 47,0 0,6006

47,4 0,6057 47,0 0,6006

47,0 0,6006 47,8 0,6107

46,7 0,5970 47,3 0,6044

45,6 0,5830 47,3 0,6044

46,5 0,5943 47,1 0,6019

Ortalama 0,5960 Ortalama 0,6038

SS 0,007593 SS 0,003806

% BSS 1,274 % BSS 0,6303

Farklı analistlere ait ara kesinliği göstermek için ise 2 farklı analiste ait ölçüm sonuçlarının arasında anlamlı fark olup olmadığını göstermek amacıyla uygulanan student-t testinde analistler arasındaki fark metanol, PBS-Tw ve SGF-Tw ortamları için önemsiz çıkmıştır (p>0,05).

Teşhis ve Tayin Sınırları

PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarındaki miktar tayini yönteminin teşhis ve tayin sınırları Bölüm 2.2.8’de belirtildiği şekilde tayin edilmiştir. Elde edilen bulgular Çizelge 3.21’de verilmiştir.

Çizelge 3.21. PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarındaki miktar tayini yönteminin teşhis ve tayin sınırları.

Metanol ortamı PBS-Tw ortamı SGF-Tw ortamı Plazma LOQ 0,2234 µg/ml 0,04677 µg/ml 0,03872 µg/ml 0,01618 µg/ml LOD 0,07372 µg/ml 0,01544 µg/ml 0,01278 µg/ml 0,005339 µg/ml

Özgünlük

PCT’nin metanol, PBS-Tw, SGF-Tw ve plazma ortamlarındaki miktar tayini yönteminin özgünlüğü Bölüm 2.2.8’de belirtildiği şekilde tayin edilmiştir.

İn vitro deneylerde PCT miktar tayini yapılırken niozom formülasyonuna katılan yardımcı maddelerin PCT’nin HPLC analizinde elde edilen piki ile girişim yapmadığını bulunmuştur.

İn vivo deneylerde dokulardaki ve kandaki PCT miktar tayininde kullanılmak üzere analitik yöntem geliştirirken yöntemin özgünlüğünü belirlemek amacıyla plazma, dokular, ekstraksiyonda kullanılan yardımcı solvanlardan gelen pikler ile DCT ve PCT piklerinin girişim yapmadığı bulunmuştur.

Belgede Zerrin SEZGİN BAYINDIR (sayfa 123-134)

Benzer Belgeler